Through the RT-PCR and rapid amplif

Through the RT-PCR and rapid amplification of cDNA ends, two complementary deoxyribonucleic acid (cDNA) clones encoding heat-shock cognate 70 (HSC70, designated Sp-HSC70) and inducible heat-shock protein 70 (HSP70, designated Sp-HSP70) were isolated from the liver of Prenant's schizothoracin (Schizothorax prenanti). The cDNAs were 2344- and 2292-bp in length and contained 1950- and 1932-bp open reading frames, encoded proteins of 649 and 643 amino acids, respectively. Amino acid sequence analysis indicated that both Sp-HSC70 and Sp-HSP70 contained three signature sequences of HSP70 family, two partial overlapping bipartite nuclear localization signal sequences (an ATP-binding site motif, a bipartite nuclear targeting signal), and a cytoplasmic characteristic motif EEVD. Homology analysis revealed that Sp-HSC70 and Sp-HSP70 shared 77.5% identity and Sp-HSC70 shared more than 81.1% identity with the known HSC70s of other vertebrates, while Sp-HSP70 shared more than 77.5 % identity with the known HSP70s of other vertebrates. Fluorescent real-time quantitative RT-PCR showed that Sp-HSC70 and Sp-HSP70 mRNAs were found in all tested tissues, including blood, brain, heart, liver, spleen, head kidney, white muscle, skin, gonad, hypophysis, red muscle, and gill. The Sp-HSC70 and Sp-HSP70 mRNA expression level in blood and head kidney displayed a significant increase in vibrio-challenged group with the bacterium Aeromonas hydrophila at 24 h post-infection compared to a control group. Temporally, there was a clear time-dependent expression pattern of Sp-HSC70 or Sp-HSP70 gene after bacterial challenge, and the expression of Sp-HSC70 and Sp-HSP70 mRNAs reached a maximum level at 12 and 6 h post-challenge, respectively. Both returned to control level after 7 × 24 h. The results suggest that Sp-HSC70 and Sp-HSP70 genes may play important roles in mediating the immune responses of A. hydrophila-related diseases in the Prenant's schizothoracin.

Results (Vietnamese) 1:

Thông qua các đảng Cộng sản Romania RT và nhanh chóng khuếch đại của cDNA kết thúc, hai bổ sung deoxyribonucleic acid (cDNA) bắt chước mã hóa nhiệt-shock cùng nguồn gốc 70 (HSC70, khu vực cho phép Sp-HSC70) và cú sốc nhiệt inducible protein 70 (HSP70, khu vực cho phép Sp-HSP70) được cô lập từ gan của Prenant schizothoracin (Schizothorax prenanti). Các cDNAs là 2344 và 2292-bp dài và chứa khung đọc mở năm 1950, 1932 bp, mã hóa protein của 649 và 643 amino acid, tương ứng. Axit amin tự phân tích chỉ ra rằng Sp-HSC70 và Sp HSP70 chứa ba chữ ký trình tự của các gia đình HSP70, hai phần chồng chéo nội địa hóa hạt nhân hai tín hiệu chuỗi (một motif trang web ATP-ràng buộc, một tín hiệu hai hạt nhân nhắm mục tiêu), và một đặc tính của tế bào chất motif EEVD. Phân tích đồng điều tiết lộ Sp-HSC70 và Sp-HSP70 chia sẻ nhận dạng 77.5% và Sp-HSC70 chia sẻ nhiều hơn 81,1% nhận dạng với HSC70s được biết đến vật có xương sống khác, trong khi Sp-HSP70 chia sẻ nhiều hơn 77.5% nhận dạng với HSP70s vật có xương sống khác, được biết đến. Huỳnh quang thời gian thực định lượng RT-PCR cho thấy rằng Sp-HSC70 và mRNAs Sp-HSP70 đã được tìm thấy trong tất cả các mô thử nghiệm, bao gồm cả máu, não, tim, gan, lá lách, thận đầu, trắng cơ, da, gonad, tùng qủa tuyến, cơ bắp đỏ, và mang. Sp-HSC70 và Sp HSP70 mRNA biểu hiện mức độ trong máu và đầu thận Hiển thị một sự gia tăng đáng kể trong thách thức vibrio nhóm với vi khuẩn Aeromonas hydrophila lúc 24 h sau nhiễm so với một nhóm kiểm soát. Tạm, có là một mô hình rõ ràng phụ thuộc vào thời gian biểu hiện của gen Sp-HSC70 hoặc Sp-HSP70 sau khi vi khuẩn thách thức, và sự biểu hiện của Sp-HSC70 và Sp HSP70 mRNAs đạt đến một mức độ tối đa 12 và 6 h sau Challenge, tương ứng. Cả hai trở lại để kiểm soát mức độ sau 7 × 24 h. Các kết quả đề nghị rằng Sp-HSC70 và Sp HSP70 gen có thể đóng vai trò quan trọng trong việc làm trung gian phản ứng miễn dịch của A. hydrophila liên quan đến bệnh trong Prenant của schizothoracin.

Results (Vietnamese) 2:

Thông qua RT-PCR và khuếch đại nhanh chóng của cDNA kết thúc, hai axit deoxyribonucleic (cDNA) nhái bổ sung mã hóa kích thích nhiệt cùng nguồn gốc 70 (HSC70, định Sp-HSC70) và cảm ứng protein sốc nhiệt 70 (Hsp70, định Sp-Hsp70) là phân lập từ gan của schizothoracin Prenant của (Schizothorax prenanti). Các cDNA là 2344- 2292 và bp dài và chứa 1950- 1932 và bp khung đọc mở, protein được mã hóa của 649 và 643 axit amin, tương ứng. Phân tích trình tự axit amin chỉ ra rằng cả hai Sp-HSC70 và Sp-Hsp70 chứa ba chuỗi chữ ký của Hsp70 gia đình, hai chồng chéo song phương trình tự một phần tín hiệu định vị nhân (một motif trang web ATP-binding, một tín hiệu mục tiêu hạt nhân song phương), và một motif đặc trưng của tế bào chất EEVD. Phân tích tương đồng tiết lộ rằng Sp-HSC70 và Sp-Hsp70 chia sẻ 77,5% tính và Sp-HSC70 chia sẻ nhiều hơn 81,1% tính với HSC70s tiếng của vật có xương sống khác, trong khi Sp-Hsp70 chia sẻ nhiều hơn 77,5% tính với HSP70s tiếng của vật có xương sống khác . Huỳnh quang thời gian thực định lượng RT-PCR cho thấy Sp-HSC70 và Sp-Hsp70 mRNA được tìm thấy trong tất cả các mô thử nghiệm, bao gồm máu, não, tim, gan, lá lách, thận đầu, cơ bắp trắng, da, tuyến sinh dục, tuyến yên, cơ đỏ , và mang. Các Sp-HSC70 và Sp-Hsp70 mRNA mức độ biểu hiện trong máu và thận đầu hiển thị một sự gia tăng đáng kể trong nhóm Vibrio-thách thức với vi khuẩn Aeromonas hydrophila lúc 24 h sau nhiễm so với nhóm chứng. Tạm thời, đã có một thời gian phụ thuộc vào biểu hiện xu hướng rõ ràng của Sp-HSC70 hoặc Sp-Hsp70 gen sau khi thách thức do vi khuẩn, và các biểu hiện của Sp-HSC70 và Sp-Hsp70 mRNA đạt mức tối đa ở mức 12 và 6 h sau thách thức, tương ứng . Cả hai quay trở lại để kiểm soát mức độ sau 7 × 24 h. Kết quả cho thấy rằng gen Sp-HSC70 và Sp-Hsp70 có thể đóng vai trò quan trọng trong việc làm trung gian cho các phản ứng miễn dịch của bệnh A. hydrophila liên quan trong schizothoracin của Prenant.