The basic procedure requires the sy

The basic procedure requires the synthesis of a short DNA primer. This synthetic primer contains the desired mutation and is complementary to the template DNA around the mutation site so it can hybridize with the DNA in the gene of interest. The mutation may be a single base change (a point mutation), multiple base changes, deletion, or insertion. The single-strand primer is then extended using a DNA polymerase, which copies the rest of the gene. The gene thus copied contains the mutated site, and is then introduced into a host cell as a vector and cloned. Finally, mutants are selected by DNA sequencing to check that they contain the desired mutation.

The original method using single-primer extension was inefficient due to a low yield of mutants. This resulting mixture contains both the original unmutated template as well as the mutant strand, producing a mixed population of mutant and non-mutant progenies. Furthermore the template used is methylated while the mutant strand is unmethylated, and the mutants may be counter-selected due to presence of mismatch repair system that favors the methylated template DNA, resulting in fewer mutants. Many approaches have since been developed to improve the efficiency of mutagenesis.

Results (Thai) 1:

ขั้นตอนพื้นฐานจำเป็นต้องสังเคราะห์พื้นเป็นดีเอ็นเอสั้น ๆ รองพื้นนี้สังเคราะห์ประกอบด้วยการกลายพันธุ์ต้อง และท่องเที่ยวไปยังแม่แบบดีเอ็นเอรอบ ๆ บริเวณกลายพันธุ์เพื่อให้มันสามารถคือ มีดีเอ็นเอในยีนที่น่าสนใจ การกลายพันธุ์อาจเปลี่ยนฐานเดียว (กลายพันธุ์เป็นจุด), หลายแปลงฐาน การลบ หรือแทรก รองพื้นเดียวสาระอยู่แล้วขยายใช้เป็นดีเอ็นเอพอลิเมอเรส การคัดลอกส่วนเหลือของยีน ยีนที่ทำ การคัดลอกประกอบด้วยไซต์กลาย แล้วนำเข้าสู่เซลล์โฮสต์เป็นเวกเตอร์ และโคลน สุดท้าย สายพันธุ์ที่เลือกตามลำดับดีเอ็นเอเพื่อตรวจสอบว่า ประกอบด้วยการกลายพันธุ์ที่ต้องวิธีการเดิมที่ใช้นามสกุลเดียวพื้นต่ำเนื่องจากผลตอบแทนต่ำสุดของสายพันธุ์ได้ ส่วนผสมที่ได้นี้ประกอบด้วยทั้งแบบ unmutated เดิมตลอดจนสาระกลายพันธุ์ การผลิตประชากรผสมกลายพันธุ์ และไม่ mutant progenies นอกจากนี้ แม่แบบที่ใช้เป็น methylated สแตรนด์กลายพันธุ์เป็น unmethylated และสายพันธุ์อาจเลือกทวนเนื่องจากระบบซ่อมแซมตรงที่ให้ความสำคัญในดีเอ็นเอแม่ methylated เกิดในสายพันธุ์น้อย หลายวิธีมีตั้งแต่ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพของ mutagenesis

Results (Thai) 2:

ขั้นตอนพื้นฐานต้องมีการสังเคราะห์ดีเอ็นเอไพรเมอร์สั้น ไพรเมอร์สังเคราะห์นี้มีการกลายพันธุ์ที่ต้องการและเป็นที่เกื้อกูลดีเอ็นเอแม่แบบรอบเว็บไซต์กลายพันธุ์เพื่อที่จะสามารถผสมพันธุ์กับดีเอ็นเอในยีนที่น่าสนใจ การกลายพันธุ์อาจจะมีการเปลี่ยนแปลงฐานเดียว (จุดกลายพันธุ์) การเปลี่ยนแปลงหลายฐานการลบหรือแทรก ไพรเมอร์เดียวสาระก็จะขยายการใช้ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ซึ่งสำเนาส่วนที่เหลือของยีน ยีนจึงคัดลอกเว็บไซต์มีการกลายพันธุ์และเป็นที่รู้จักแล้วเป็นเซลล์โฮสต์เป็นเวกเตอร์และโคลน สุดท้ายกลายพันธุ์จะถูกเลือกโดยลำดับดีเอ็นเอเพื่อตรวจสอบว่าพวกเขามีการกลายพันธุ์ที่ต้องการ. วิธีการเดิมโดยใช้ไพรเมอร์ส่วนขยายเดียวก็ไม่มีประสิทธิภาพเนื่องจากผลผลิตต่ำของการกลายพันธุ์ นี้ส่วนผสมที่เกิดมีทั้งแม่แบบ unmutated เดิมเช่นเดียวกับกลุ่มสาระการกลายพันธุ์, การผลิตประชากรผสมของลูกกลายพันธุ์และไม่กลายพันธุ์ นอกจากนี้แม่แบบที่ใช้ methylated ขณะที่สาระกลายพันธุ์เป็น unmethylated และกลายพันธุ์อาจจะเลือกที่เคาน์เตอร์เนื่องจากการมีระบบไม่ตรงกันซ่อมแซมที่โปรดปรานดีเอ็นเอแม่แบบสารที่มีผลในการกลายพันธุ์น้อยลง วิธีการหลายคนได้รับการพัฒนาตั้งแต่การปรับปรุงประสิทธิภาพของฉับ

Results (Thai) 3:

กระบวนการพื้นฐานต้องมีการสังเคราะห์ primer ดีเอ็นเอสั้น ๆ ไพรเมอร์สังเคราะห์นี้มีการกลายพันธุ์ และต้องการ ประกอบกับแม่แบบดีเอ็นเอรอบของเว็บไซต์จึงสามารถผสมกับดีเอ็นเอในยีนที่น่าสนใจ การกลายพันธุ์อาจจะเปลี่ยนแปลงฐานเดียว ( การผ่าเหล่า ) หลายฐานการเปลี่ยนแปลงการลบหรือแทรก .ไพรเมอร์เส้นเดียวแล้วขยายการใช้ DNA polymerase ซึ่งสำเนาที่เหลือของยีน ยีนกลายพันธุ์จึงคัดลอกประกอบด้วยเว็บไซต์และจากนั้นเข้าไปในเซลล์โฮสต์เป็นเวกเตอร์และโคลน ในที่สุด , พวกกลายพันธุ์จะถูกคัดเลือกโดยการตรวจสอบว่าพวกเขามีการกลายพันธุ์ดีเอ็นเอที่ต้องการ

วิธีเดิมที่ใช้นามสกุลเดียวไม่มีประสิทธิภาพรองพื้นเนื่องจากผลผลิตต่ำของพวกกลายพันธุ์ นี้ส่งผลให้ส่วนผสมมีทั้งต้นฉบับ unmutated แม่แบบเช่นเดียวกับกลุ่มมนุษย์กลายพันธุ์ผลิตประชากรผสมของลูกกลายพันธุ์และไม่กลายพันธุ์ นอกจากนี้ แม่แบบที่ใช้ methylated ในขณะที่เส้น unmethylated กลายพันธุ์เป็น ,และสายพันธุ์ที่อาจจะนับจากการปรากฏตัวของการซ่อมแซมระบบที่โปรดปรานดีเอ็นเอแม่แบบ methylated ส่งผลให้น้อยลง มนุษย์กลายพันธุ์ หลายวิธีที่ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อปรับปรุงประสิทธิภาพของการ .