PCR reactions were carried out in 5

PCR reactions were carried out in 50 ml volumes, including 2 ml
of each primer (10 pmol/ml), 5 ml of 106PCR buffer (Bioline),
2.5 ml MgCl 2 (50 mM), 1 ml dNTPs (10 mM each) and 0.5 ml
BioTaq DNA polymerase (5 U/ml, Bioline). The PCR cycling
conditions for ATPase 6 and ATPase 8 were as follows: 3 min at
94 uC, 35 cycles of 1 min at 94 uC, 45 s at 50 uC and 1 min at 72
uC, followed by a final step of 5 min at 72 uC. The amplification
conditions for COI were 94 uC for 3 min, followed by 40 cycles at
94 uC for 30 s, 43–48uC for 30 s and 72 uC for 1 min, with a final
step at 72 uC for 5 min. The PCR products were purified and
sequenced both directions by Macrogen (Korea). All the obtained
sequences were aligned using CLUSTALW [25], included in
BioEdit v5.0.9 [26], subsequently analyzed in MEGA v6.0.5 [27],
in DnaSP v5.10.1 [28] and subjected to a BLAST search in
GenBank for comparison with deposited Heloderma sequences. All
sequences have been deposited to GenBank under the accession
numbers KJ917179-KJ917183.

Results (Thai) 1:

ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินในปริมาณ 50 ml รวม 2 mlแต่ละพื้น (10 pmol/มล.), 5 ml 106PCR บัฟเฟอร์ (นำ),2.5 ml MgCl 2 (50 mM), 1 ml dNTPs (10 mM แต่ละ) และ 0.5 mlBioTaq ดีเอ็นเอพอลิเมอเรส (5 U/ml นำ) PCR การขี่จักรยานเงื่อนไขสำหรับ ATPase 6 และ ATPase 8 มีดังนี้: 3 นาทีที่94 uC, 35 รอบ 1 นาทีที่ 94 uC, 45 s 50 uC และ 1 นาทีที่ 72uC ตาม ด้วยขั้นตอนสุดท้ายของ 5 นาทีที่ 72 uC ขยายการเงื่อนไขสำหรับ COI ได้ 94 uC สำหรับ 3 นาที ตาม ด้วยรอบ 40 ที่uC 94 สำหรับ 30 s, 43-48uC สำหรับ 30 s และ uC 72 ใน 1 นาที มีตัวสุดท้ายขั้นตอนที่ 72 uC สำหรับ 5 นาที ผลิตภัณฑ์ PCR ได้บริสุทธิ์ และเรียงลำดับทั้งสองทิศทาง โดย Macrogen (เกาหลี) ทั้งหมดที่ได้รับมีจัดลำดับใช้ CLUSTALW [25], รวมอยู่ในV5.0.9 BioEdit [26], มาวิเคราะห์ในเม v6.0.5 [27],ใน DnaSP v5.10.1 [28] และต้องการค้นหาระเบิดGenBank สำหรับเปรียบเทียบกับนำฝาก Heloderma ลำดับ ทั้งหมดลำดับได้รับฝากไว้กับ GenBank ภายใต้การภาคยานุวัติหมายเลข KJ917179-KJ917183

Results (Thai) 2:

ปฏิกิริยา PCR ได้ดำเนินการใน 50 มล. ปริมาณรวมทั้ง 2 มิลลิลิตร
ของแต่ละไพรเมอร์ (10 pmol / ml), 5 ml ของบัฟเฟอร์ 106PCR (Bioline)
2.5 มล MgCl 2 (50 มิลลิเมตร) 1 มิลลิลิตร dNTPs (10 มม) และ 0.5 มล
BioTaq ดีเอ็นเอโพลิเมอร์ (5 U / ml Bioline) การขี่จักรยาน PCR
เงื่อนไขสำหรับ ATPase ที่ 6 และ 8 ATPase มีดังนี้: 3 นาทีที่
94 UC, 35 รอบ 1 นาทีที่ 94 UC, 45 S ที่ 50 UC และ 1 นาทีที่ 72
UC ตามด้วยขั้นตอนสุดท้ายของ 5 นาที 72 UC ขยาย
เงื่อนไขสำหรับ COI เป็น 94 UC เป็นเวลา 3 นาทีตามด้วย 40 รอบที่
94 UC เป็นเวลา 30 วินาที, 43-48uC 30 และ 72 UC เป็นเวลา 1 นาทีด้วยขั้นสุดท้าย
ขั้นตอนที่ 72 UC เป็นเวลา 5 นาที ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์มีความบริสุทธิ์และ
ติดใจทั้งสองทิศทางโดย Macrogen (เกาหลี) ทั้งหมดที่ได้รับ
ลำดับถูกจัดชิดโดยใช้ ClustalW [25] รวมอยู่ใน
BioEdit v5.0.9 [26] วิเคราะห์ในภายหลัง v6.0.5 MEGA [27]
ใน DnaSP v5.10.1 [28] และยัดเยียดให้ค้นหาระเบิดใน
GenBank สำหรับ เปรียบเทียบกับฝากลำดับวงศ์กิล่ามอนสเตอร์ ทั้งหมด
ลำดับได้รับการฝากไปยัง GenBank ภายใต้การภาคยานุวัติ
หมายเลข KJ917179-KJ917183

Results (Thai) 3:

ปฏิกิริยา PCR พบว่าใน 50 ml ปริมาณ 2 มิลลิลิตร
ของแต่ละสี ( 10 pmol / ml ) 5 มิลลิลิตร 106pcr บัฟเฟอร์ ( bioline )
2.5 ml คลอไรด์ 2 ( 50 มม. ) 1 ml . ( 10 มม. dntps แต่ละ ) และ 0.5 ml
biotaq DNA polymerase ( 5 U / ml . bioline ) ร่วมจักรยาน
เงื่อนไขและหมู่ 6 หมู่ 8 มีดังนี้ : 3 นาทีที่ 94
UC 35 รอบ 1 นาทีที่ 94 UC 45 S ที่ UC 50 และ 1 นาทีที่ 72
UC ,ตามด้วยขั้นตอนสุดท้ายของ 5 นาทีที่ 72 เป็นต้น . โดยการเพิ่มเงื่อนไขสำหรับผมเท่ากับ 94
UC 3 นาที ตามด้วย 40 รอบใน
94 UC 30 , 43 – 48uc 30 และ 72 UC 1 นาทีด้วยขั้นตอนสุดท้าย
72 UC 5 นาที ผลิตภัณฑ์ทั้งหมดจะถูกทำให้บริสุทธิ์และ
ลำดับทั้งสองทิศทาง โดย macrogen ( เกาหลี ) . ทั้งหมดได้รับ
ลำดับชิดใช้ clustalw [ 25 ] 3
bioedit v5.0.9 [ 26 ]โดยวิเคราะห์ในเมกะ v6.0.5 [ 27 ] ,
ใน dnasp v5.10.1 [ 28 ] และต้องระเบิดค้นหา
ขนาดเปรียบเทียบกับฝากวงศ์กิล่ามอนสเตอร์ ลำดับ ทั้งหมด
ลำดับ ได้รับเงินที่จะพบได้ที่ภาคยานุวัติ
ตัวเลข kj917179-kj917183 .