2. Materials and methods2.1. Fungus

2. Materials and methods
2.1. Fungus cultivation

P. indica ATCC (204458) was cultured in potato dextrose broth with constant shaking at 100 rpm at 30 °C. The mycelium was harvested 8 days after inoculation by filtration to remove liquid media.

2.2. Preparation of soil

Field soil was collected from an agricultural field with no soybean cyst nematode infestation at the Southern Outreach and Research Station in Waseca, Minnesota, USA. Soil was mixed with 30% sand and autoclaved at 121 °C for 60 min. Mycelium of P. indica at concentrations of 2.5% (w/w) and 5% (w/w) was thoroughly mixed with soil and placed into four 16-cm-diameter clay pots. A control treatment consisting of the autoclaved soil mixture with no P. indica amendment was similarly prepared. Eight soybean seeds were surface sterilized with 0.5% NaOCl for 3 min, rinsed three times in sterile water, and sown in each pot. One week after planting, seedlings were thinned to keep only five seedlings of approximately the same size and developmental stage per pot. The pots were arranged randomly and maintained in a greenhouse with a temperature ranging from 26 °C ± 4 °C with 16 h light/8 h dark. Pots and seedlings were watered daily.

Results (Thai) 1:

2. วัสดุและวิธีการ2.1. เชื้อราเพาะปลูกP. indica ATCC (204458) มีอ่างในมันฝรั่งซุปขึ้นกับการสั่นคงที่ที่ 100 รอบต่อนาทีที่ 30 องศาเซลเซียส Mycelium ถูกเก็บเกี่ยววัน 8 หลัง inoculation โดยกรองเอาสื่อของเหลว2.2 การเตรียมดินฟิลด์ดินรวบรวมจากฟิลด์การเกษตรด้วยไม่รบกวนนีมาโทดาถุงถั่วที่ภาคสนามภาคใต้สถานีวิจัยใน Waseca มินเนโซต้า สหรัฐอเมริกา ดินที่ผสมกับทราย 30% และ autoclaved ที่ 121 ° C สำหรับ 60 นาที indica Mycelium P. ที่ความเข้มข้น 2.5% (w/w) และ 5% (w/w) อย่างละเอียดผสมกับดิน และวางลงในหม้อดินเหนียว 16-ซม.เส้นผ่าศูนย์กลาง 4 ในทำนองเดียวกันมีเตรียมการรักษาควบคุมที่ประกอบด้วยส่วนผสมดิน autoclaved กับ P. ไม่แก้ไข indica เมล็ดถั่วเหลือง 8 ถูกผิว sterilized 0.5% NaOCl ใน 3 นาที rinsed สามครั้งในกระบอกน้ำ และหว่านในกระถางแต่ละ หนึ่งสัปดาห์หลังปลูก กล้าไม้ได้ thinned เพื่อให้กล้าไม้ 5 เท่าประมาณขนาดเดียวกันและพัฒนาขั้นต่อหม้อ หม้อถูกจัดเรียงแบบสุ่ม และรักษาในเรือนกระจกที่ มีไข้ตั้งแต่ 26 ° C ± 4 ° C กับ 16 h ไฟ/8 h สีดำ กระถางและกล้าไม้ที่มีผู้บริการ

Results (Thai) 2:

2. วัสดุและวิธีการ
2.1 การเพาะปลูกเชื้อราพี indica ATCC (204,458) ได้รับการเพาะเลี้ยงในน้ำซุปมันฝรั่งที่มีเดกซ์โทรสคงเขย่าที่ 100 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 30 องศาเซลเซียส เส้นใยเก็บเกี่ยว 8 วันหลังจากการฉีดวัคซีนโดยการกรองเพื่อเอาของเหลวสื่อ. 2.2 การเตรียมดินดินสนามที่ถูกเก็บรวบรวมจากการเกษตรที่ไม่มีถุงถั่วเหลืองรบกวนไส้เดือนฝอยที่ภาคใต้บริการวิชาการและสถานีวิจัยวาเซมินนิโซตาสหรัฐอเมริกา ดินผสมกับทราย 30% และเบาที่ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 60 นาที เส้นใยของ indica พีที่ระดับความเข้มข้น 2.5% (w / w) และ 5% (w / w) ได้รับการผสมกับดินและวางลงในสี่ 16 เซนติเมตรเส้นผ่าศูนย์กลางหม้อดิน การรักษาควบคุมประกอบด้วยส่วนผสมของดินเบาที่ไม่มีการแก้ไข indica พีถูกจัดทำขึ้นในทำนองเดียวกัน แปดเมล็ดถั่วเหลืองพื้นผิวที่ผ่านการฆ่าเชื้อด้วย 0.5% NaOCl เป็นเวลา 3 นาทีล้างสามครั้งในน้ำหมันและหว่านในแต่ละหม้อ หนึ่งสัปดาห์หลังจากปลูกต้นกล้าถูกบางตาเพื่อให้เพียงห้าต้นกล้าประมาณขนาดเดียวกันและขั้นตอนการพัฒนาต่อกระถาง หม้อถูกจัดแบบสุ่มและเก็บรักษาไว้ในเรือนกระจกที่มีอุณหภูมิตั้งแต่ 26 องศาเซลเซียส± 4 ° C ที่มีแสง 16 ชั่วโมง / 8 ชั่วโมงที่มืด หม้อและต้นกล้าถูกรดน้ำทุกวัน

Results (Thai) 3:

2 . วัสดุและวิธีการ
2.1 . เพาะเชื้อรา P . indica ~ i (

204458 ) เลี้ยงใน Potato Dextrose Broth คงที่สั่นที่ 100 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิ 30 องศา เจริญเก็บเกี่ยว 8 วัน หลังจากได้รับเชื้อโดยการกรองเพื่อเอาอาหารเหลว .

. . การเตรียมดิน

สนามดินที่รวบรวมได้จากแปลงเกษตรที่ไม่มีถั่วเหลืองงอกระบาดที่ภาคใต้ โดยการขยายและสถานีวิจัยในวาเซกา , Minnesota , USA เป็นดินผสมทราย 30% และสังเคราะห์ที่ 121 ° C เป็นเวลา 60 นาที เส้นใย P . indica ที่ความเข้มข้น 2.5% ( w / w ) และ 5% ( w / w ) คือให้ละเอียดผสมกับดินและวางลงในหม้อสี่ 16 ซม. เคลย์การควบคุมการรักษาประกอบด้วยส่วนผสมดินสังเคราะห์ที่ไม่มีหน้า 3 การแก้ไขเช่นกัน เตรียมไว้ แปดเมล็ดถั่วเหลืองฆ่าเชื้อที่ผิวด้วยไม่ระบุ 0.5 % นาน 3 นาที ล้าง 3 ครั้ง น้ำหมัน และหว่านในแต่ละหม้อ หนึ่งสัปดาห์หลังปลูก ต้นกล้ามีขนาดเล็กเพื่อให้เพียงห้าต้นกล้าประมาณขนาดเดียวกัน และพัฒนาการขั้นต่อหม้อหม้อถูกจัดเรียงแบบสุ่ม และรักษาในเรือนกระจกที่มีอุณหภูมิตั้งแต่ 26 ° C ± 4 ° C กับ H 8 H / 16 แสงมืด หม้อและต้นกล้าก็รดน้ำทุกวัน