3. Results and discussionThe DNA wa

3. Results and discussion
The DNA was extracted from raw Cyprinidae fish and amplified
using the primers L14734-Glu/H15557-CYB (823 bp) and Cytb-F/
Thr-R (521 bp). After sequencing and aligning the sequences with
that of Danio rerio (GenBank ID: NC002333), the complete cytb
sequences (1141 bp) of the 10 Cyprinidae fish were obtained by
overlapping. These complete cytb sequences were subsequently
submitted to the GenBank database, including A. paradoxus
(HQ443699), C. auratus auratus (HQ443698), Ca. barbatus
(JN673555), Cy. carpio carpio (HQ443697), Ct. idella (JN673555),
H. labeo (HQ443702), V. barbatulus (HQ443700), and
Z. pachycephalus (HQ443701) in our published research (Chen et al.,
2012); additionally, P. parva (JX472459) and R. ocellatus ocellatus
(JX472460) were added in this study.
In this study, the sequence variation of these 10 fish is shown in
Fig. 1. And, there is a range 6%e19% of difference between 10 Cyprinidae
fish species (Table 1). The PCR-RFLP model was established
on the QIAxcel automated CE system (Qiagen) using a 331 bp cytochrome
b fragment amplified by the CypbL/CypbH primer set
from 10 Cyprinidae fish (Fig. 2A). The PCR products were then codigested
with two endonucleases (NlaIII and MseI). Afterward, the
PCR-RFLP products were analyzed by the QIAxcel system using the
AM420 method (Fig. 2B). The separation time for 12 samples was
only approximately 10 min. A similar finding was also reported by
Wang et al. (2009), indicating that the CE separation time of 12
samples was less than 12 min and was faster than the agarose and
polyacrylamide gels analyses. The predicted and observed fragment
sizes of the PCR-RFLP profiles are shown in Fig. 2B and Table 2. The
results show a variation of less than 8.3 bp between the predicted

Results (Thai) 1:

3. ผลลัพธ์ และสนทนาดีเอ็นเอที่สกัดจากปลาวงศ์ปลาตะเพียนที่ดิบ และขยายใช้ไพรเมอร์ L14734-Glu/H15557-CYB (823 bp) และ Cytb F /Thr R (521 bp) หลังจากลำดับเบส และการจัดเรียงลำดับด้วยที่ rerio ปลาซิวใบไผ่ (GenBank ID: NC002333), cytb สมบูรณ์ลำดับ (1141 bp) ของปลาวงศ์ปลาตะเพียน 10 ได้รับโดยซ้อนทับกัน เหล่านี้ทำ cytb ได้ลำดับต่อมาส่งไปยังฐานข้อมูล GenBank รวม paradoxus อ.(HQ443699), C. auratus auratus (HQ443698), Ca. barbatus(JN673555), Cy carpio carpio (HQ443697), idella กะรัต (JN673555),H. ปลา (HQ443702), V. barbatulus (HQ443700), และPachycephalus z. (HQ443701) ในการวิจัยของเราเผยแพร่ (Chen et al.,2012); นอกจากนี้ P. parva (JX472459) และอาร์ ocellatus ocellatus(JX472460) ถูกเพิ่มเข้ามาในการศึกษานี้ศึกษา การเปลี่ยนแปลงลำดับของปลาเหล่านี้ 10 มีแสดงในFig. 1 และ มี%เป็น 6% e19 ช่วงความแตกต่างระหว่างเห็นจะ 10พันธุ์ปลา (ตารางที่ 1) แบบ PCR-RFLP ก่อตั้งใน QIAxcel อัตโนมัติระบบ CE (Qiagen) ใช้ 331 bp cytochromeb ส่วนขยาย โดยตั้งพื้น CypbL/CypbHจากวงศ์ปลาตะเพียน 10 ปลา (Fig. 2A) ผลิตภัณฑ์ PCR ได้แล้ว codigestedกับ endonucleases สอง (NlaIII และ MseI) หลังจากนั้น การผลิตภัณฑ์ PCR-RFLP ถูกวิเคราะห์ โดยใช้ระบบ QIAxcelวิธี AM420 (Fig. 2B) เวลาแยกตัวอย่าง 12 มีเพียงประมาณ 10 นาที ยังมีรายงานค้นหาที่คล้ายกันวัง et al. (2009), ระบุที่เวลาแยก CE 12ตัวอย่างไม่น้อยกว่า 12 นาที และได้เร็วกว่าใน agarose และpolyacrylamide gels วิเคราะห์ ส่วนคาดการณ์ และการสังเกตแสดงขนาดของโพรไฟล์ PCR-RFLP ใน Fig. 2B และตารางที่ 2 ที่ผลลัพธ์แสดงการดัดแปลงน้อยกว่า 8.3 bp ระหว่างการคาดการณ์

Results (Thai) 2:

3. ผลและการอภิปราย
ดีเอ็นเอเป็นสารสกัดจากปลาดิบปลาตะเพียนและขยาย
การใช้ไพรเมอร์ L14734-Glu / H15557-CYB (823 bp) และ Cytb-F /
Thr-R (521 bp) หลังจากที่การจัดลำดับและสอดคล้องกับลำดับ
ที่ของ Danio rerio (รหัส GenBank: NC002333) cytb สมบูรณ์
ลำดับ (1141 bp) ของปลา 10 ปลาตะเพียนได้จากการ
ทับซ้อนกัน เหล่านี้วนเวียน cytb สมบูรณ์ต่อมาถูก
ส่งไปยังฐานข้อมูลของ GenBank รวมทั้งเอ paradoxus
(HQ443699) auratus C. auratus (HQ443698), แคลิฟอร์เนีย barbatus
(JN673555) ภาวะ ไนไน (HQ443697), CT idella (JN673555),
เอช Labeo (HQ443702) barbatulus V. (HQ443700) และ
Z. pachycephalus (HQ443701) ในการวิจัยที่ตีพิมพ์ของเรา (. เฉินและคณะ,
2012); นอกจากนี้พีพาร์วา (JX472459) และอาร์ ocellatus ocellatus
(JX472460) ถูกเพิ่มเข้ามาในการศึกษาครั้งนี้
ในการศึกษานี้การเปลี่ยนแปลงลำดับของ 10 ปลาเหล่านี้ก็แสดงให้เห็นใน
รูป 1. และยังเป็นช่วงที่ 6%% E19 ของความแตกต่างระหว่าง 10 ปลาตะเพียน
ปลา (ตารางที่ 1) รูปแบบ PCR-RFLP ก่อตั้งขึ้น
เมื่อวันที่ QIAxcel ระบบ CE อัตโนมัติ (Qiagen) โดยใช้ 331 bp cytochrome
ขส่วนขยายโดยชุดไพร CypbL / CypbH
จาก 10 ปลาตะเพียนปลา (รูปที่ 2A.) ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ได้รับการ codigested แล้ว
กับสอง endonuclease ที่ (NlaIII และ MseI) หลังจากนั้น
ผลิตภัณฑ์ PCR-RFLP การวิเคราะห์ระบบ QIAxcel โดยใช้
วิธี AM420 (รูป. 2B) ระยะเวลาที่แยกสำหรับ 12 ตัวอย่างเป็น
เพียงประมาณ 10 นาที การค้นพบที่คล้ายกันนอกจากนี้ยังได้รับรายงานจาก
วังและคณะ (2009) แสดงให้เห็นว่าระยะเวลาที่แยก CE 12
ตัวอย่างน้อยกว่า 12 นาทีและได้เร็วกว่า agarose และ
วิเคราะห์ polyacrylamide เจล ที่คาดการณ์ไว้และตั้งข้อสังเกตส่วน
ขนาดของรูปแบบ PCR-RFLP จะแสดงในรูป 2B และตารางที่ 2
แสดงผลการเปลี่ยนแปลงของน้อยกว่า 8.3 bp ระหว่างที่คาดการณ์ไว้

Results (Thai) 3:

3 ผลและการอภิปราย
ดีเอ็นเอที่สกัดจากปลาวงศ์ปลาตะเพียนดิบและขยาย
ใช้ไพรเมอร์ l14734 ซึ่ง h15557-cyb ( 823 / BP ) และ cytb-f /
thr-r ( 521 bp ) หลังจากการจัดเรียงลำดับและกับ
ว่าปลาซิวใบไผ่ rerio ( ขนาด ID : nc002333 ) ลำดับที่ cytb
สมบูรณ์ ( 806 คู่เบส ) ของ 10 วงศ์ปลาตะเพียนปลาที่ได้จาก
ที่ทับซ้อนกันทั้งหมดนี้คือ cytb ลำดับต่อมา
ส่งขนาดฐานข้อมูล รวมทั้ง อ. paradoxus
( hq443699 ) , C . auratus auratus ( hq443698 ) , แคลิฟอร์เนีย barbatus
( jn673555 ) , ไซ Carpio Carpio ( hq443697 ) กะรัต idella ( jn673555 )
H . สกุลลาเบโอ ( hq443702 ) , V . barbatulus ( hq443700 ) และ pachycephalus
Z ( hq443701 ) ในงานวิจัยที่ตีพิมพ์ ( Chen et al . ,
2012 ) ; นอกจากนี้ หน้า parva ( jx472459 ) และ อาร์ocellatus ocellatus
( jx472460 ) ถูกเพิ่มในการศึกษา .
ในการศึกษานี้ ลำดับการเปลี่ยนแปลงเหล่านี้ 10 ปลาจะแสดงใน
รูปที่ 1 และมีช่วง 6 % e19 % ความแตกต่างระหว่าง 10 Cyprinidae
ปลาชนิด ( ตารางที่ 1 ) ส่วนว่ารุ่นก่อตั้ง
ระบบ CE qiaxcel อัตโนมัติ ( เพิ่ม ) ใช้พวก BP -
b ส่วนขยายตาม cypbl / cypbh ชุด
ไพรเมอร์จาก 10 วงศ์ปลาตะเพียนปลา ( รูปที่ 2A ) ที่เพิ่มปริมาณแล้ว codigested
2 ( nlaiii สงบเงียบ และ msei ) หลังจากนั้น ผลิตภัณฑ์
ว่าระบบวิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้วิธี qiaxcel
am420 ( รูปที่ 2B ) เวลาแยก 12 ตัวอย่างได้เพียงประมาณ 10 นาทีที่คล้ายกัน

หาก็รายงานโดย Wang et al . ( 2009 ) แสดงว่า CE แยกเวลา 12
ตัวอย่างน้อยกว่า 12 นาที และเร็วกว่า ,
โพลีอะคริลาไมด์เจลวิเคราะห์ข้อมูล ทำนายและสังเกตว่าส่วน
ขนาดของโปรไฟล์จะแสดงในรูปที่ 2B และตารางที่ 2
ผลลัพธ์แสดงการเปลี่ยนแปลงน้อยกว่า 8.3 BP ระหว่างพยากรณ์