Experimental designAfter in vitro m

Experimental design
After in vitro maturation and fertilization, presumptive zygotes (n = 1,692) were randomly assigned into two groups: Control – zygotes (n = 815) cultured in 500 μL CR2aa medium (modified from Rosenkrans Jr and First [28]) supplemented only with 10% FCS and 3 mg/mL BSA fraction V; or CLA – zygotes (n = 877) cultured in the same conditions of the control group, but with additional supplementation of the culture medium with 100 μmol/L trans–10, cis–12 CLA (Matreya, LLC,
Pleasant Gap, PA, USA) as described by Pereira et al. [17]. Unlike Pereira et al. [17], however, in the present study no additional antioxidants were used in the culture medium. On the 3rd day of culture (d 3) cleavage rate
was assessed. On d 5, samples of embryos at morula stage (n = 15/group) were fixed for analysis of lipids
content. On d 7, another sample of Grade I and II embryos at blastocyst stage (3 pools of 10 embryos/group)
were placed in Eppendorf tubes and stored at − 80°Cuntil RNA extraction. For both lipid content and gene
expression analysis, embryos were sampled from different batches, and the remaining d 7 and d 8 Grade I and II blastocysts from all batches underwent slow freezing for analysis of pos-thawing survival rate or were used as controls (93 and 49 from control group, and 103 and 44 from the CLA group, respectively). Blastocyst rate was assessed on d 8 considering all blastocysts produced in drops where embryos were not removed for lipids
quantification.

Results (Thai) 1:

ออกแบบการทดลองหลังจากพ่อแม่การเพาะเลี้ยง และการปฏิสนธิ presumptive zygotes (n = 1,692) ถูกกำหนดแบบสุ่มเป็น 2 กลุ่ม: ควบคุม – zygotes (n = 815) อ่างใน 500 μL CR2aa (การปรับเปลี่ยนจากเจอาร์ Rosenkrans และแรก [28]) เสริมเฉพาะกับ FCS 10% และ 3 mg/mL บีเอสเอเศษ V หรือ CLA – zygotes (n = 877) อ่างในเงื่อนไขเดียวกันกลุ่มควบคุม แต่แห้งเสริมเพิ่มเติมของสื่อวัฒนธรรมกับทรานส์ μmol/L 100-10, CLA cis – 12 (Matreya, LLCดีช่องว่าง PA สหรัฐอเมริกา) ตามที่อธิบายไว้โดย Pereira et al. [17] ต่างจาก Pereira et al. [17], อย่างไรก็ตาม ในการศึกษาปัจจุบัน ไม่มีสารต้านอนุมูลอิสระเพิ่มเติมใช้ในสื่อวัฒนธรรม ในวัน 3 ของปริวัฒนธรรม (d 3)ถูกประเมิน บน d 5 ตัวอย่างของโคลนที่ระยะ morula (n = 15/กลุ่ม) ได้นำการวิเคราะห์โครงการเนื้อหา บน d 7 เกรดอย่างอื่น ผมและโคลน II ในอดีตระยะ (3 กลุ่มกลุ่มละ 10 โคลน)วางใน Eppendorf หลอด และเก็บไว้ในอาร์เอ็นเอ Cuntil − 80 °สกัด สำหรับเนื้อหาของระดับไขมันในเลือดและยีนวิเคราะห์นิพจน์ โคลนได้ความจากชุดต่าง ๆ และเหลือ d 7 และ d เกรด 8 ฉันและ blastocysts II จากชุดงานทั้งหมดรับช้าแช่แข็งสำหรับการวิเคราะห์อัตราการอยู่รอด pos thawing หรือใช้เป็นตัวควบคุม (93 และ 49 จากควบคุม กลุ่ม และ 103 และ 44 จากกลุ่ม CLA ตามลำดับ) มีประเมินอัตราอดีตบน d 8 พิจารณา blastocysts ทั้งหมดผลิตในหยดที่โคลนไม่ออกสำหรับโครงการนับ

Results (Thai) 2:

การออกแบบการทดลอง
ในหลอดทดลองหลังจากการเจริญเติบโตและการให้ปุ๋ย, zygotes สันนิษฐาน (n = 1,692) ถูกสุ่มออกเป็นสองกลุ่มคือกลุ่มควบคุม - zygotes (n = 815) ที่เลี้ยงในกลาง 500 ไมโครลิตร CR2aa (แก้ไขจาก Rosenkrans จูเนียร์และเป็นครั้งแรก [28]) เสริมเท่านั้น กับ FCS 10% และ 3 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร BSA ส่วน V; หรือ CLA - zygotes (n = 877) ที่เลี้ยงในสภาพเดียวกันของกลุ่มควบคุม แต่มีการเสริมเพิ่มเติมในอาหารเลี้ยงเชื้อที่มี 100 ไมโครโมล / ลิตรทรานส์ 10, ​​CIS-12 CLA (Matreya, LLC
น่า Gap, PA, สหรัฐอเมริกา) ตามที่อธิบายไว้โดย Pereira และคณะ [17] ซึ่งแตกต่างจากราและคณะ [17] อย่างไรก็ตามในการศึกษาครั้งนี้ไม่มีสารต้านอนุมูลอิสระที่เพิ่มขึ้นถูกนำมาใช้ในอาหารเลี้ยงเชื้อ ในวันที่ 3 ของวัฒนธรรม (ง 3) อัตราความแตกแยก
ได้รับการประเมิน ในวันที่ 5 ตัวอย่างของตัวอ่อนในระยะมอรูล่า (n = 15 / กลุ่ม) ได้รับการแก้ไขในการวิเคราะห์ของไขมัน
เนื้อหา ในวันที่ 7 ตัวอย่างอื่นเกรด I และ II ตัวอ่อนในระยะตัวอ่อน (3 สระ 10 ตัวอ่อน / กลุ่ม)
ถูกวางไว้ในหลอด Eppendorf และเก็บไว้ที่ - 80 ° Cuntil สกัดอาร์เอ็นเอ ทั้งไขมันและยีน
วิเคราะห์การแสดงออกของตัวอ่อนได้รับตัวอย่างจากกระบวนการที่แตกต่างกันและ D 7 ที่เหลือและ D 8 เกรด I และ II blastocysts จากกระบวนการทั้งหมดที่ได้รับการแช่แข็งช้าสำหรับการวิเคราะห์อัตราการรอดตาย pos-ละลายหรือถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุม (93 และ 49 จากกลุ่มควบคุมและ 103 และ 44 จากกลุ่ม CLA ตามลำดับ) อัตรา Blastocyst ได้รับการประเมินในวันที่ 8 พิจารณาตัวอ่อนทั้งหมดที่ผลิตในหยดที่ตัวอ่อนที่ไม่ได้ลบออกไขมันใน
ปริมาณ

Results (Thai) 3:

การทดลองในหลอดทดลอง และสุก
หลังจากการปฏิสนธิ ให้ผล zygotes ( n = 1692 ) กลุ่มควบคุม ( zygotes ( n = 815 ) เพาะเลี้ยง 500 μผม cr2aa ขนาดกลาง ( ดัดแปลงจาก rosenkrans JR และก่อน [ 28 ] ) เสริมเพียง 10% FCS และ 3 มก. / มล. ส่วนเอวี หรือ CLA – zygotes ( n = พวกที่เพาะเลี้ยงในสภาพเดียวกัน ของกลุ่มควบคุมแต่ด้วยการเสริมเพิ่มเติมของวัฒนธรรมอาหาร 100 μ mol / l ทรานส์– 10 – 12 ( matreya CIS , CLA , LLC ,
ถูกใจ ช่องว่าง , PA , USA ) ตามที่อธิบายไว้โดย Pereira et al . [ 17 ] ซึ่งแตกต่างจาก Pereira et al . [ 17 ] อย่างไรก็ตาม ในการศึกษาไม่เพิ่มเติมสารต้านอนุมูลอิสระที่ใช้ในวัฒนธรรมสื่อ ในวันที่สามของวัฒนธรรม ( D
3 ) ประเมินอัตราการ . ใน D 5ตัวอย่างของเอ็มบริโอระยะมอรูล่า ( N = 15 / กลุ่ม ) ได้รับการแก้ไขสำหรับการวิเคราะห์ลิปิด
เนื้อหา ใน D 7 , อีกตัวอย่างของระดับ I และ II ตัวที่ระยะบลาสโตซิส ( 3 สระ 10 ตัว / กลุ่ม )
อยู่ในเพนดอร์ฟหลอดและเก็บไว้ที่− 80 องศา cuntil RNA ในการสกัด ทั้งไขมันและการวิเคราะห์การแสดงออกของยีน
, เอ็มบริโอ สุ่ม ตัวอย่างจากกลุ่มที่แตกต่างกันและที่เหลืออีก 7 และ 8 เกรด D D I และ II ขึ้นมาจากทุกชุดได้รับการแช่แข็งช้าสำหรับการวิเคราะห์ของ POS ละลายอัตราการอยู่รอดหรือใช้เป็นตัวควบคุม ( 93 และ 49 จากกลุ่มควบคุม และ 103 และ 44 จากกลุ่ม ซีไอเอ ตามลำดับ ) บลาสโตซิสที่ได้รับในอัตรา d 8 พิจารณาทั้งหมดที่ผลิตในหยดโตที่ตัวไม่ได้เอาออกสำหรับปริมาณลิปิด
.