digestion followed by chloroform/ph

digestion followed by chloroform/phenol extraction. Four micrograms of DNA was digested with micrococcal nuclease and spleenphosphodiesterase. Adducted nucleotides were enriched by butanol extraction as previously described (Nielsen and Autrup, 1994) but with minor modification. The digested DNA was dried and resuspended in T4 polynucleotide kinase mixture containing -32P. Labeled samples were spot- ted and developed onpolyethyleneimine-cellulose thin layer chromatography plates. Spots were quantified using a Phos- phorImager (PI; Molecular Dynamics, Sunnyvale, CA). A B[a]P-diolepoxideDNA adduct standard was prepared from calf thymus DNA treated with B[a]P-diolepoxide and included in the analysis to correct for assay variability. Reported adduct levels are the average of at least two completely inde- pendent determinations and expressed as adducts per 108 nucleotides.

Results (Thai) 1:

การย่อยอาหารตามสกัดคลอโรฟอร์ม/วาง Micrograms สี่เอ็นถูกเจ่า micrococcal nuclease และ spleenphosphodiesterase นิวคลีโอไทด์ adducted อุดมไป ด้วยบิวทานอสกัดเป็นก่อนหน้านี้ อธิบาย (นีลและ Autrup, 1994) แต่ modification เล็กน้อย ดีเอ็นเอ digested แห้ง และ resuspended ส่วนผสม kinase polynucleotide T4 ประกอบด้วย-32 P ตัวอย่างป้ายแผ่น chromatography ชั้นบางจุดเท็ด และพัฒนา onpolyethyleneimine-เซลลูโลสได้ จุดใช้เป็น Phos-phorImager (PI; quantified โมเลกุล Dynamics, Sunnyvale, CA) B diolepoxideDNA P [a] adduct มาตรฐานถูกเตรียมจากต่อมไทมัสลูก DNA B รับ diolepoxide P [a] และรวมอยู่ในการวิเคราะห์ต้องวิเคราะห์ความแปรผัน รายงาน adduct ระดับเป็นค่าเฉลี่ยของ determinations น้อยสองสมบูรณ์ inde แขวน และแสดงเป็น adducts ต่อนิวคลีโอไทด์ 108

Results (Thai) 2:

การย่อยอาหารตามด้วยคลอโรฟอร์ม / สกัดฟีนอล สี่ไมโครกรัมของดีเอ็นเอถูกย่อยด้วยนิ micrococcal และ spleenphosphodiesterase นิวคลีโอ Adducted ถูกอุดมไปด้วยการสกัดบิวทานอตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (นีลเซ่นและ Autrup, 1994) แต่ด้วยไอออนบวก Modi ไฟเล็กน้อย ดีเอ็นเอย่อยแห้งและ resuspended ในส่วนผสมไคเนส Polynucleotide T4 มี -32P ติดป้ายตัวอย่างเป็นจ่ายเงินและส่งเท็ดและพัฒนา onpolyethyleneimine เซลลูโลสแผ่นโครมาชั้นบาง ๆ สปอตเป็นเอ็ด Fi quanti ใช้ Phos- phorImager (PI; Dynamics โมเลกุลซันนีเวล, แคลิฟอร์เนีย) AB [] P-diolepoxideDNA มาตรฐานดึงเข้าหากันที่เตรียมจากดีเอ็นเอไธมัสลูกวัวรับการรักษาด้วย B [] P-diolepoxide และรวมอยู่ในการวิเคราะห์ที่ถูกต้องสำหรับการทดสอบความแปรปรวน ระดับดึงเข้าหารายงานมีค่าเฉลี่ยอย่างน้อยสองหาความจี้ inde- อย่างสมบูรณ์และแสดงเป็น adducts ต่อ 108 นิวคลีโอ

Results (Thai) 3:

ย่อยตามด้วยคลอโรฟอร์ม / ฟีนอลในการสกัด 4 ไมโครกรัมของ DNA จะถูกย่อยด้วย micrococcal นิวเคลียส และ spleenphosphodiesterase . adducted นิวคลีโอไทด์เป็นอุดมด้วยสกัดบิวทานอลตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( Nielsen ) และ autrup , 1994 ) แต่กับผู้เยาว์ Modi จึงไอออนบวก การตัดดีเอ็นเอแห้งและ resuspended ผสมที่ประกอบด้วยพอลินิวคลีโอไทด์ใน T4 ไคเนส - 32p .ระบุว่าจำนวนจุด - เท็ด และพัฒนา onpolyethyleneimine เซลลูโลสชั้นบางเครื่องจาน จุดคือ การไฟฟ้าจึงเอ็ดใช้ phos - phorimager ( ปี่ พลวัตโมเลกุล , Sunnyvale , CA ) [ B ] p-diolepoxidedna มาตรฐานปุ่มตัวเลือกถูกเตรียมจากน่องต่อมไทมัสดีเอ็นเอรักษาด้วย B [ ] p-diolepoxide และรวมอยู่ในการวิเคราะห์ที่ถูกต้องสำหรับการทดสอบความแปรปรวนรายงานปุ่มตัวเลือกระดับเฉลี่ยอย่างน้อยสองอย่างยัง - จี้ใช้และแสดงเป็น adducts ต่อ 108 ขนาด .