Three weeks after BDA injection (4

Three weeks after BDA injection (4 weeks after
stroke), the animals were anesthetized with ketamine
and perfused transcardially with saline, followed by
4% paraformaldehyde. The entire brain was removed
and immersed in 4% paraformaldehyde overnight.
The brain tissues were processed to produce adjacent
40-
m-thick coronal sections using a cryostat. Five
sections including the red nucleus (RN) and cerebral
peduncle (CP) (–4.52 to –6.04 mm at AP) and five sections
including the pyramid (Py) (–8.72 to –11.60 mm
at AP) were used to detect BDA labeling. Briefly, free-
floating sections were incubated with 0.3% H2O2 in
0.1 M phosphate-buffered saline (PBS, pH 7.4) for
20 min, washed with 0.1 M PBS, then incubated in
0.1 M PBS containing 5% normal horse serum and
0.3% Triton X-100 for 1 h. The sections were incubated
with avidin–biotin–peroxidase complex (Vector Laboratories,
Burlingame, CA, USA) in PBS/Triton X-100
at 4°C for 3 days and BDA labeling was achieved with
0.05% 3,3
-diaminobenzidine and 0.003% H2O2 (Vector
Laboratories) before light microscopy examination.

Results (Thai) 1:

สามสัปดาห์หลังจากฉีด BDA (4 สัปดาห์หลังจากโรคหลอดเลือดสมอง), สัตว์ถูกด้วยกับคีตามีนเนื้อ transcardially กับน้ำเกลือ ตามด้วย4% paraformaldehyde สมองทั้งหมดถูกลบออกและแช่ใน paraformaldehyde 4% ข้ามคืนเนื้อเยื่อสมองประมวลผลผลิตติด40 - ใช้เครื่อง cryostat ส่วนโคโรนาเมตรหนา ห้าส่วนได้แก่นิวเคลียสสีแดง (RN) และสมองพาดอก (CP) (–4.52 –6.04 มม.ที่ AP) และห้าส่วนรวมทั้งพีระมิด (Py) (–8.72 ถึง –11.60 มม.ที่ AP) ถูกใช้เพื่อตรวจหาการติดฉลาก BDA ฟรีสั้น ๆ -ส่วนที่ลอยน้ำได้รับการกกกับ 0.3% H2O2 ใน0.1 M ฟอสเฟตบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS, pH 7.4) สำหรับล้าง ด้วย PBS 0.1 M ได้รับการกกแล้ว ใน 20 นาที0.1 PBS M ที่ประกอบด้วยซีรั่มม้าปกติ 5% และ0.3% Triton X-100 สำหรับ 1 h ส่วนได้รับการกกกับ avidin – ไบโอติน – ฮอสคอมเพล็กซ์ (ห้องปฏิบัติการเวกเตอร์เบอร์ลินเกม CA, USA) ใน PBS/Triton X-100ที่ 4° C เวลา 3 วันและ BDA ฉลากสำเร็จด้วย0.05% 3, 3-diaminobenzidine และ 0.003% H2O2 (เวกเตอร์ห้องปฏิบัติการ) ก่อนสอบกล้องจุลทรรศน์แสง

Results (Thai) 2:

สามสัปดาห์หลังจากฉีด BDA (4 สัปดาห์หลังจาก
จังหวะ) สัตว์ที่ถูกอสัญญีกับคีตา
และ perfused transcardially ด้วยน้ำเกลือตามด้วย
4% paraformaldehyde สมองทั้งหมดถูกลบออก
และแช่ใน 4 paraformaldehyde% ในชั่วข้ามคืน.
เนื้อเยื่อสมองที่ถูกประมวลผลในการผลิตที่อยู่ติดกัน
40? ม. หนาส่วนเวียนใช้ cryostat ห้า
ส่วนรวมทั้งนิวเคลียสสีแดง (RN) และสมอง
คอด (CP) (-4.52 -6.04 มมไปที่ AP) และห้าส่วน
รวมทั้งปิรามิด (หนอง) (-8.72 -11.60 เพื่อมิลลิเมตร
ที่ AP) ถูกนำมาใช้ในการตรวจสอบการติดฉลาก BDA . สั้น ๆ , เวอร์
ส่วนลอยถูกบ่มกับ 0.3% H2O2 ใน
0.1 M น้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอสพีเอช 7.4) สำหรับ
20 นาทีล้างด้วย 0.1 M พีบีเอสบ่มแล้วใน
0.1 M พีบีเอสซีรั่มที่มีม้า 5% ปกติและ
0.3% Triton X-100 เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ส่วนที่ถูกบ่ม
กับ avidin-ไบโอติน-peroxidase คอมเพล็กซ์ (เวกเตอร์ห้องปฏิบัติการ,
เบอร์ลิน, CA, USA) ในพีบีเอส / Triton X-100
ที่ 4 ° C เป็นเวลา 3 วันและการติดฉลาก BDA ก็ประสบความสำเร็จกับ
0.05% 3,3
-diaminobenzidine และ 0.003 % H2O2 (เวกเตอร์
ห้องปฏิบัติการ) ก่อนที่จะตรวจสอบกล้องจุลทรรศน์