Reverse blot hybridisation assayREB

Reverse blot hybridisation assay

REBA Myco-ID was used according to the manufacturer’s instructions to detect M. tuberculosis and NTM in tissue samples from patients with granulomatous lymphadenitis.

This assay can differentiate 18 mycobacterial species, including M. tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, M. scrofulaceum, M. szulgai, M. terrae, M. chelonae, M. abscessus, M. gordonae, M. kansasii, M. celatum, M. fortuitum, M. ulcerans/marinum,M. genavense/simiae, M. aubagnense and M. mucogenicum, using specific probes for the rpoB gene region.

Briefl y, the rpoB gene region was amplified with biotin-labelled primers and the PCR products were hybridised to a membrane with 19 immobilised probes.
the membrane was incubated with streptoavidin-conjugated alkaline phosphatase and visualised with nitro blue tetrazolium chloride and 5-bromo-4-chloro-3-indolyl phosphate.
The data were interpreted using the REBA Myco-ID data sheet provided by the manufacturer.

Mycobacterial drug resistance was determined using a REBA MTB-MDR kit, which detects rifampicin (RMP) and isoniazid (INH) resistance using 13 probes for rpoB, the oxyR-ahpC intergenic region, katG, and the inhA promoter region from M. tuberculosis.

Results (Thai) 1:

กลับคืนในตา hybridisation ทดสอบREBA Myco ID ถูกใช้ตามคำแนะนำของผู้ผลิตเพื่อตรวจหาวัณโรคและ NTM ในตัวอย่างเนื้อเยื่อจากผู้ป่วยที่มี granulomatous lymphadenitis วิเคราะห์นี้สามารถแบ่งแยกชนิด mycobacterial 18 วัณโรค M. avium, M. intracellulare, M. scrofulaceum, M. szulgai, M. terrae, M. chelonae, M. abscessus, M. gordonae, M. kansasii, M. celatum, M. fortuitum, M. ulcerans/marinum, M. genavense/simiae, M. aubagnense และ M. mucogenicum ใช้คลิปปากตะเข้เฉพาะสำหรับภูมิภาคยีน rpoB Y Briefl ภูมิภาคยีน rpoB ถูกขยาย ด้วยไพรเมอร์ไบโอตินมัน และผลิตภัณฑ์ PCR ได้ hybridised กับเมมเบรนที่ มีคลิปปากตะเข้ immobilised 19 เมมเบรนมี incubated กับ streptoavidin กลวงอัลคาไลน์ฟอสฟาเตส และ visualised คลอไรด์ tetrazolium บลูไนโตรและฟอสเฟต 5-bromo-4-chloro-3-indolyl ข้อมูลถูกตีความโดยใช้แผ่นงาน REBA Myco ID โดยผู้ผลิตยา mycobacterial ได้กำหนดใช้ชุด REBA MTB MDR ซึ่งตรวจพบ rifampicin (RMP) และความต้านทานต่อ isoniazid (INH) ใช้คลิปปากตะเข้ 13 rpoB ภูมิภาค intergenic oxyR ahpC, katG และภูมิภาคโปรโมเตอร์ inhA จากวัณโรค

Results (Thai) 2:

hybridisation blot ย้อนกลับทดสอบREBA Myco-ID ถูกนำมาใช้ตามคำแนะนำของผู้ผลิตในการตรวจสอบเชื้อวัณโรค NTM และในตัวอย่างเนื้อเยื่อจากผู้ป่วยที่มีต่อมน้ำเหลือง granulomatous. การทดสอบนี้สามารถแยกความแตกต่าง 18 ชนิดแบคทีเรียรวมถึงเชื้อวัณโรค, M. avium, M. intracellulare, M. scrofulaceum, M. szulgai, M. แผ่นดิน, M. chelonae, M. abscessus, M. gordonae, M. kansasii, M. celatum, M. fortuitum, M. ulcerans / Marinum, M genavense / simiae, M. aubagnense และเอ็ม mucogenicum โดยใช้ยานสำรวจที่เฉพาะเจาะจงสำหรับภูมิภาคยีน rpoB. Briefl y, ภูมิภาคยีน rpoB ถูกขยายกับไพรไบโอตินที่ติดฉลากและผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ถูก hybridised จะเมมเบรนกับ 19 probes ตรึง. เมมเบรนถูกบ่มกับ phosphatase streptoavidin-ผันอัลคาไลน์และมองเห็นด้วยคลอไรด์ tetrazolium สีฟ้าไนโตรและ 5-Bromo-4-chloro-3-indolyl ฟอสเฟต. ข้อมูลที่ถูกตีความโดยใช้ REBA Myco-ID แผ่นข้อมูลจาก บริษัท ผู้ผลิต. โคแบคทีเรียดื้อยา ถูกกำหนดโดยใช้ชุด REBA MTB-MDR ซึ่งตรวจพบ rifampicin (RMP) และ isoniazid (INH) โดยใช้ความต้านทาน 13 probes สำหรับ rpoB, oxyR-AHPC ภูมิภาค intergenic, katG และภูมิภาคก่อการ Inha จากเชื้อวัณโรค

Results (Thai) 3:

กลับเปรอะเปื้อน ไฮบริไดเซชัน (

myco 1 ID ใช้ตามคำแนะนำของผู้ผลิตเพื่อตรวจหาวัณโรค และ ntm ในตัวอย่างเนื้อเยื่อจากผู้ป่วยพบกิโลแคลอรี่ .

วิธีนี้สามารถแยกเวลา 18 ชนิด ได้แก่ วัณโรคเอ็ม avium ) โดย M scrofulaceum M szulgai ม. โลก เอ็ม ระดับ ม. abscessus M gordonae Mcelatum เชื้อ M . M fortuitum M ulcerans / marinum M genavense / simiae ม. และ ม. aubagnense mucogenicum ใช้เฉพาะฟิวส์สำหรับ rpob ยีนเขต

ย่อ Y , rpob ยีนภูมิภาคของไบโอตินที่มีชนิดที่เพิ่มปริมาณ hybridised เพื่อเยื่อ 19 ตรึง ) .
เยื่อแผ่นแยก streptoavidin conjugated ระโยงระยางมองเห็นกับไนโตรสีน้ำเงิน tetrazolium และคลอไรด์และ 5-bromo-4-chloro-3-indolyl ฟอสเฟต
ข้อมูลถูกตีความการรีบา myco ID แผ่นข้อมูลที่ให้โดยผู้ผลิต

เวลายาถูกกำหนดโดยใช้ mtb-mdr 1 ชุดซึ่งตรวจจับ rifampicin ( rmp ) และเชื้อวัณโรค ( แห่ง ) ความต้านทานการติดตาม rpob 13 , oxyr ahpc ส่าภูมิภาค katg และ inha ผดุงเขตจากวัณโรค .