Fat extraction and fatty acid profi

Fat extraction and fatty acid profile: Lipid extraction followed the methodology proposed by Latimer (2012). Approximately 5 mL of milk was dissolved in 2 mL of ethanol, 4 mL of ultrapure water and 2 mL of NH4OH. This mixture went through shaking water bath at 75°C for 10 min. The extracted fat residue was dissolved in 50 mL diethyl ether:petroleum ether (1:1, v/v). Then, the solution was evaporated to dryness in a 40°C water bath under nitrogen stream. The fat residue was dissolved in 5 mL chloroform:diethyl ether (1:1, v/v) and the solvent was evaporated under nitrogen stream. The residue was added 2 mL 7% BF3 and 1 mL toluene and heated in a 100°C oven for 45 min. After added 5 mL ultrapure water, 1 mL hexane and 0.2 g Na2SO4, the solution was vortex-stirred for 1 min, followed by centrifugation at 5000 rpm for 2 min. The organic upper phase was recovered and analyzed by Gas Chromatography (GC). Fatty Acid Methyl Esters (FAME) were analyzed on an Agilent GC unit (model G890N, Palo Alto, CA, USA) equipped with a flame ionization detector. Fatty acids were separated using a DB-23 fused-silica capillary column (30×0.32 mm ID×0.25 μm film thickness, Agilent, USA). Identification of peaks was accomplished by comparison of sample peak retention times with those of FAME standard mixture acquired from Supelco Inc. (Bellefonte, PA, USA). Quantification of the FAME in milk lipids was done using undecanoic acid (11:0) as an internal standard. Helium was used as the carrier gas and the injector split ratio was 1:50. After injection (1 μL), the initial column temperature of 70°C was held for 0.5 min, increased to 170°C (9°C min–1). Then, it was increased to 200°C (1°C min–1) and finally increased to 230°C (10°C min–1) and sustained for 2 min. The FAME was expressed as g/100 g of total fatty acid content, assuming a direct relationship between peak area and FAME weight. The analysis was realized in triplicate.

Results (Thai) 1:

ไขมันสกัดและกรดไขมัน: ดูดไขมันตามวิธีที่เสนอ โดย Latimer (2012) ประมาณ 5 มล.นมที่ละลายใน 2 มล.ของเอทานอล 4 mL ของน้ำบริสุทธิ์พิเศษ และ 2 mL ของ NH4OH ส่วนผสมนี้ไปผ่านสั่นอ่างน้ำที่ 75° C 10 นาที สารตกค้างไขมันสกัดที่ละลายในอีเทอร์อีเทอร์: ปิโตรเลียม diethyl 50 mL (1:1, v/v) แล้ว การแก้ปัญหาถูกระเหยให้แห้งในห้องอาบน้ำ 40° C ภายใต้กระแสไนโตรเจน กากไขมันที่ละลายในอีเทอร์คลอโรฟอร์ม: diethyl 5 มล. (1:1, v/v) และมีระเหยตัวทำละลายภายใต้กระแสไนโตรเจน สารตกค้างเพิ่ม 2 mL 7% BF3 และโทลูอีน 1 มล. และอุ่นในเตาอบ 100° C สำหรับ 45 นาที หลังจากที่น้ำบริสุทธิ์พิเศษเพิ่ม 5 mL, 1 mL เฮกเซน และ 0.2 g Na2SO4 การแก้ปัญหาก็วนกวน 1 นาที ตาม ด้วยหมุนเหวี่ยงที่ 5000 rpm สำหรับ 2 นาที ขั้นตอนด้านบนอินทรีย์ถูกกู้คืน และวิเคราะห์โดยก๊าซ Chromatography (GC) กรดไขมัน Methyl Esters (ชื่อเสียง) ได้วิเคราะห์ในหน่วย Agilent GC (รุ่น G890N พาโลอัลโต CA, USA) พร้อมกับเครื่องตรวจจับเปลวไฟไอออไนซ์ กรดไขมันถูกแยกออกโดยใช้คอลัมน์ฝอยซิ fused DB-23 (30 × 0. × 32 มม. ID 0.25 ไมครอนความหนาฟิล์ม Agilent สหรัฐอเมริกา) การระบุของยอดสามารถทำได้ โดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาตัวอย่างสูงสุดกับผู้ผสมมาตรฐานชื่อเสียงมาจาก Supelco อิงค์ (Bellefonte, PA สหรัฐอเมริกา) นับจำนวนชื่อเสียงในไขมันนมเสร็จใช้กรด undecanoic (11:0) เป็นมาตรฐานภายใน ใช้ฮีเลียมเป็นก๊าซผู้ขนส่ง และหัวฉีดแบ่งอัตราส่วนคือ 1:50 หลังจากฉีด (1 μL), 70° C อุณหภูมิเริ่มต้นคอลัมน์ถูกจัดขึ้น 0.5 นาที เพิ่มขึ้นเป็น 170° C (9° C นาที – 1) แล้ว มันเพิ่มขึ้นถึง 200° C (1° C นาที – 1) และในที่สุดเพิ่มขึ้นเป็น 230° C (10° C นาที – 1) และยั่งยืนสำหรับ 2 นาที ชื่อเสียงถูกแสดงเป็น g/100 กรัมของกรดไขมันที่รวมเนื้อหา สมมติว่าความสัมพันธ์ระหว่างพื้นที่สูงและชื่อเสียงน้ำหนักโดยตรง การวิเคราะห์ได้ตระหนักลข้อ

Results (Thai) 2:

การสกัดไขมันและกรดไขมันที่สกัดไขมันตามวิธีการที่เสนอโดย Latimer (2012) ประมาณ 5 มิลลิลิตรของนมถูกละลายใน 2 มิลลิลิตรของเอทานอล 4 มิลลิลิตรของน้ำบริสุทธิ์และ 2 มล NH4OH ส่วนผสมนี้เดินผ่านอ่างน้ำเขย่าที่ 75 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาที กากไขมันที่สกัดถูกละลายใน 50 มลอีเทอร์: ปิโตรเลียมอีเทอร์ (1: 1, v / v) แล้ววิธีการแก้ปัญหาที่ถูกระเหยความแห้งกร้านใน 40 ° C อ่างน้ำภายใต้กระแสไนโตรเจน กากไขมันถูกละลายใน 5 mL คลอโรฟอร์ม: อีเทอร์ (1: 1, v / v) และตัวทำละลายระเหยภายใต้กระแสไนโตรเจน ที่เหลือถูกเพิ่มเข้ามา 2 มล BF3 7% และ 1 มลโทลูอีนและให้ความร้อนในเตาอบ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 45 นาที หลังจากเพิ่มขนาด 5 ml น้ำบริสุทธิ์ 1 เฮกเซนมิลลิลิตรและ 0.2 กรัม Na2SO4 วิธีการแก้ปัญหาที่ถูกกระแสน้ำวนกวนเป็นเวลา 1 นาทีตามด้วยการหมุนเหวี่ยงที่ 5000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 นาที บนเฟสอินทรีย์ถูกกู้คืนและวิเคราะห์โดย Gas Chromatography (GC) กรดไขมันเมทิลเอสเตอร์ (FAME) ถูกนำมาวิเคราะห์ใน Agilent GC หน่วย (โมเดล G890N พาโลอัลโต, แคลิฟอร์เนีย, สหรัฐอเมริกา) พร้อมกับเปลวไฟเครื่องตรวจจับไอออนไนซ์ กรดไขมันที่ถูกแยกออกโดยใช้ DB-23 ผสมซิลิกาคอลัมน์เส้นเลือดฝอย (30 × 0.32 มิลลิเมตร ID × 0.25 ไมโครเมตรความหนาของฟิล์ม, Agilent, สหรัฐอเมริกา) บัตรประจำตัวของยอดเขาก็ประสบความสำเร็จโดยการเปรียบเทียบเวลาการเก็บรักษาตัวอย่างสูงสุดกับบรรดาส่วนผสมมาตรฐาน FAME ได้มาจากการ Supelco อิงค์ (เบลลาฟอน, PA, สหรัฐอเมริกา) ปริมาณเกียรติยศในไขมันนมที่ได้กระทำโดยใช้กรด undecanoic (11: 0) เป็นมาตรฐานภายใน ฮีเลียมถูกใช้เป็นก๊าซและอัตราการใช้หัวฉีดแยกเป็น 01:50 หลังจากการฉีด (1 ไมโครลิตร) อุณหภูมิคอลัมน์เริ่มต้นของ 70 ° C ถูกจัดขึ้นเป็นเวลา 0.5 นาทีเพิ่มขึ้นถึง 170 ° C (9 ° C นาที 1) จากนั้นมันก็เพิ่มขึ้นถึง 200 องศาเซลเซียส (° C 1 นาที-1) และในที่สุดก็เพิ่มขึ้นถึง 230 ° C (10 ° C นาที-1) และยั่งยืนเป็นเวลา 2 นาที ชื่อเสียงได้รับการแสดงเป็นกรัม / 100 กรัมของปริมาณกรดไขมันทั้งหมดสมมติความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างพื้นที่สูงสุดและน้ำหนัก FAME การวิเคราะห์ก็ตระหนักในเพิ่มขึ้นสามเท่า

Results (Thai) 3:

การสกัดไขมันและกรดไขมัน : การสกัดไขมันตามวิธีการที่เสนอโดยลาติเมอร์ ( 2012 ) ประมาณ 5 มิลลิลิตร ละลายในนม 2 มิลลิลิตรเอทานอล , 4 ml ของน้ำบริสุทธิ์มาก 2 มิลลิลิตร nh4oh . ส่วนผสมนี้ไปเขย่าน้ำร้อนอุณหภูมิ 75 องศา C นาน 10 นาที นำกากไขมันละลายใน 50 ml อีเทอร์ : ปิโตรเลียมอีเทอร์ ( 1 : 1 v / v ) แล้วสารละลายที่ระเหยแห้งใน 40 ° C น้ำร้อนภายใต้กระแสไนโตรเจน กากไขมันที่ถูกละลายในคลอโรฟอร์มอีเทอร์ ( 5 ml : 1 : 1 v / v ) และตัวทำละลายระเหยภายใต้กระแสเป็นไนโตรเจน ตกค้าง BF3 เพิ่ม 7 % และโทลูอีน 2 มิลลิลิตร 1 ขวด และอุ่นใน 100 องศา C อบ 45 นาที หลังจากเพิ่ม 5 น้ำบริสุทธิ์มากโดยใช้เฮกเซน 1 ml และ na2so4 0.2 กรัมสารละลาย Vortex คนเป็นเวลา 1 นาที ตามด้วยการเหวี่ยงแยกที่ 5 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 2 นาทีขั้นตอนด้านบนและอินทรีย์ถูกกู้คืน วิเคราะห์โดยแก๊สโครมาโทกราฟี ( GC ) กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ ( ชื่อเสียง ) มาวิเคราะห์ในหน่วย Agilent GC ( แบบ g890n , พาโลอัลโต , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา ) พร้อมกับเฟลมไอออไนเซชันตรวจจับ เป็นกรดไขมันที่ถูกแยกจากกันโดยใช้ db-23 คอลัมน์ซิลิกาหลอดเลือดฝอย ( 30 × 0.32 มม. ID × 0.25 μเมตร ความหนาฟิล์ม Agilent , USA ) ระบุยอดได้ โดยการเปรียบเทียบตัวอย่างสูงสุดเวลากักที่มีชื่อเสียงมาตรฐานส่วนผสมที่ได้มาจาก supelco Inc . ( bellefonte , PA , USA ) ปริมาณของชื่อเสียงในนมไขมัน โดยใช้ undecanoic acid ( 11:0 ) เป็นมาตรฐานภายใน ฮีเลียมถูกใช้เป็นแก๊สตัวพา และหัวฉีดแยกอัตราส่วนคือ 1 : 50 หลังจากการฉีด ( 1 μ L ) , เริ่มต้นที่อุณหภูมิ 70 องศา C คอลัมน์ถูกจัดขึ้นสำหรับ 0.5 นาที เพิ่มขึ้นถึง 170 องศา C ( 9 ° C มิน ( 1 ) งั้นก็เพิ่มเป็น 200 ° C ( 1 ° C ( 1 นาที ) และในที่สุดเพิ่มขึ้นถึง 230 องศา C ( 10 ° C ( 1 นาที ) และยั่งยืน 2 นาที ชื่อเสียงจะแสดงเป็นกรัม / 100 กรัมของทั้งหมดกรดไขมัน , สมมติว่ามีความสัมพันธ์โดยตรงระหว่างพื้นที่พีคน้ำหนักและชื่อเสียง วิเคราะห์ได้ว่า ทั้งสามใบ