2. Methods2.1. Isolation and select

2. Methods
2.1. Isolation and selection of thermotolerant yeast strains
Yeasts were isolated from soil and water samples from
sugar cane plantations and sugar factories in four provinces,
namely Phra Nakhon Si Ayutthaya, Ratchaburi,
Suphanburi and Uthaithani, Thailand. Isolation was carried
out at 35 C by an enrichment technique using sugar
juice media containing sugar cane juice (5% or 8% total
sugars), 0.05% (NH4)2SO4 and 4% (v/v) ethanol and with
(pH 4.5) and without pH adjustment (pH 3.8). After inoculation,
cultures were incubated for 3 days in a rotary shaker
(Gallenkamp Orbital Incubator, Leicester, UK) at a
predetermined temperature with shaking speed of
170 rpm. Enriched cultures were then streaked on agar
plates containing the same medium and inoculated at
35 C. Purified yeast cultures were kept on YPD agar slants
(1% yeast extract, 2% peptone, 2% glucose and 2% agar)
and stored at 8 C.
Thermotolerant yeast strains were selected based on
their growth performances at 40 and 45 C in sugar cane
juice broth containing 8% total sugars and 0.05%
(NH4)2SO4 and supplemented with 4% (v/v) ethanol. Successful
cultures were collected and screened further for
their ethanol production efficiency at elevated temperature.

Results (Thai) 1:

2. วิธี2.1. การแยกและการเลือกสายพันธุ์ยีสต์ thermotolerantยีสต์ที่แยกได้จากตัวอย่างดินและน้ำจากไร่อ้อยและโรงงานน้ำตาลในจังหวัดคือจังหวัดพระนครศรีอยุธยา ราชบุรีสุพรรณบุรีและอุทัยธานี ประเทศไทย ดำเนินการแยกออกที่ 35 C โดยเทคนิคการเพิ่มคุณค่าการใช้น้ำตาลสื่อน้ำผลไม้ประกอบด้วยน้ำอ้อย (5% หรือ 8% รวมน้ำตาล), 0.05% (NH4) 2SO4 และเอทานอล 4% (v/v) และมี(pH 4.5) และไม่ มีการปรับค่า pH (pH 3.8) หลังจากกักบริเวณวัฒนธรรมที่ได้รับการกก 3 วันในการหมุนปั่น(ตู้อบ Gallenkamp ออร์บิทัล เลสเตอร์ สหราชอาณาจักร) ที่มีอุณหภูมิที่กำหนดกับความเร็วของการสั่น170 รอบต่อนาที อุดมด้วยวัฒนธรรมแล้วมีลายบนวุ้นแผ่นที่ประกอบด้วยตรงกลาง และ inoculated ที่วัฒนธรรมยีสต์บริสุทธิ์ 35 C. ถูกเก็บไว้บน YPD วุ้น slants(สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% peptone กลูโคส 2% และ 2% วุ้น)และเก็บไว้ที่ c 8คัดเลือกสายพันธุ์ยีสต์ Thermotolerant อิงแสดงการเจริญเติบโตของพวกเขาที่ 40 และ 45 C ในอ้อยน้ำซุปน้ำผลไม้ที่ประกอบด้วยน้ำตาลรวม 8% และ 0.05%(NH4) 2SO4 และเสริม ด้วยเอทานอล 4% (v/v) ประสบความสำเร็จรวบรวม และคัดกรองวัฒนธรรมเพิ่มประสิทธิภาพของการผลิตเอทานอลที่อุณหภูมิสูง

Results (Thai) 2:

2. วิธีการ
2.1 การแยกและการเลือกของยีสต์ทนร้อนสายพันธุ์
ยีสต์ที่แยกได้จากตัวอย่างดินและน้ำจาก
พื้นที่เพาะปลูกอ้อยและโรงงานน้ำตาลในสี่จังหวัด
คือจังหวัดพระนครศรีอยุธยาราชบุรี
สุพรรณบุรีและอุทัยธานี, ไทย แยกได้ดำเนินการ
ออกมาที่ 35 องศาเซลเซียสโดยใช้เทคนิคการเพิ่มปริมาณการใช้น้ำตาล
สื่อน้ำผลไม้ที่มีน้ำอ้อย (5% หรือ 8% รวม
น้ำตาล), 0.05% (NH4) 2SO4 และ 4% (v / v) เอทานอลและ
(pH 4.5 ) และโดยไม่ต้องปรับค่าพีเอช (pH 3.8) หลังจากฉีดวัคซีน
วัฒนธรรมถูกบ่มเป็นเวลา 3 วันในเครื่องปั่นแบบหมุน
(Gallenkamp วง Incubator, เลสเตอร์, สหราชอาณาจักร) ที่
อุณหภูมิที่กำหนดไว้ด้วยความเร็วสั่นของ
170 รอบต่อนาที วัฒนธรรมที่อุดมไปถูกเส้นจากนั้นในวุ้น
แผ่นที่มีขนาดกลางเดียวกันและเชื้อที่
35 องศาเซลเซียส วัฒนธรรมยีสต์บริสุทธิ์ถูกเก็บไว้ใน slants YPD วุ้น
(สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% เปปโตนกลูโคส 2% และ 2% วุ้น)
และเก็บไว้ที่ 8 องศาเซลเซียส.
ยีสต์ทนร้อนได้รับการคัดเลือกขึ้นอยู่กับ
การเจริญเติบโตของพวกเขาที่ 40 และ 45 องศาเซลเซียส ในน้ำตาลอ้อย
น้ำซุปน้ำผลไม้ที่มีน้ำตาลทั้งหมด 8% และ 0.05%
(NH4) 2SO4 และเสริมด้วย 4% (v / v) เอทานอล ที่ประสบความสำเร็จ
วัฒนธรรมถูกเก็บรวบรวมและคัดเลือกต่อไปสำหรับ
ประสิทธิภาพการผลิตเอทานอลของพวกเขาที่อุณหภูมิสูง

Results (Thai) 3:

2 . วิธีการ2.1 . การแยกและคัดเลือกสายพันธุ์ยีสต์ทนยีสต์ที่แยกได้จากตัวอย่างดินและน้ำจากสวนตาลอ้อยและโรงงานน้ำตาลใน 4 จังหวัดได้แก่ พระนครศรีอยุธยา ราชบุรีสุพรรณบุรีและอุทัยธานี , ไทย การแยกที่ 35 องศาเซลเซียส โดยมีการเสริมเทคนิคการใช้น้ำตาลน้ำผลไม้สื่อที่มีน้ำอ้อย ( 5% หรือ 8% รวมน้ำตาล ) , 0.05 % ( NH4 ) 2so4 และ 4 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) และเอทานอลด้วย( pH ) และไม่มีการปรับ pH ( pH 3.8 ) หลังจากที่ได้รับวัฒนธรรมที่ถูกบ่มเป็นเวลา 3 วันในเครื่องปั่น โรตารี่( gallenkamp โคจรฟักไข่ เลสเตอร์ , อังกฤษ ) ที่กำหนดความเร็วของอุณหภูมิกับสั่น170 รอบต่อนาที ผสานวัฒนธรรม แล้วลายบนอาหารวุ้นจานที่มีตัวกลางเดียวกันและหัวเชื้อที่35 . แยกยีสต์วัฒนธรรมไว้ใน ypd slants วุ้น( glucose 2% สารสกัดจากยีสต์ 1 % 2 % ตามลำดับ และ 2 % Agar )ที่เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 8 องศาเซลเซียสยีสต์สายพันธุ์ทนถูกเลือกบนพื้นฐานของการเจริญเติบโตของการแสดงที่ 40 และ 45 องศาเซลเซียส ในอ้อยน้ำผลไม้อาหารที่มี 8 % total sugars และ 0.05 %และ ( NH4 ) 2so4 อาหาร 4 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) เอทานอล ที่ประสบความสำเร็จวัฒนธรรมที่ถูกรวบรวมและคัดกรองเพิ่มเติมสำหรับประสิทธิภาพของการผลิตเอทานอลที่อุณหภูมิสูง