Seven-week-old Arabidopsis plants i

Seven-week-old Arabidopsis plants in which
all seeds and flowers, except buds, were removed
(Fig. 2A) and were used for Agrobacteriummediated
transformation according to the vacuum
infiltration method (Fig. 2B); [33]. The pot
containing Arabidopsis plants was put upsidedown
in 600 mL of the Agrobacterium solution
containing 1.32 g MS medium, 30 g sucrose, and
200 L silwet, and vacuum was applied for 5 min
to facilitate infection (Fig. 2C). After infiltration,
the plants were grown in normal growth room to
harvest the seeds (Fig. 2D). The seeds were sown
on MS medium containing kanamycin, and the
transformants were selected; the seedlings of
non-transformants turned yellow and showed
abnormal growth compared with the transgenic
lines (Fig. 2E). This transgenic lines are called T1
plants. The surviving T1 lines were grown in soil,
the seeds were harvested, and the seeds were
sown again on MS medium containing
kanamycin. The seedlings should have a 3
survival: 1 un-survival ratio (Fig. 2F). These transgenic lines are called T2 plants. The
surviving T2 lines were grown in soil, and the
seeds were harvested. All seeds survived on MS
medium containing kanamycin (Fig. 2G), which
is now called homogeneous T3 plants. The T3
homo lines were grown to amplify the seeds for
functional assay (Fig. 2H). To confirm whether
the ERD4 gene was successfully introduced into
the T3 lines, RT-PCR was carried out with the
primers specific to ERD4 gene. The result
showed that strong bands corresponding to ERD4
gene were observed in all transgenic lines (Fig.
2I), confirming that coffee ERD4 gene was
successfully introduced into Arabidopsis plants.
These transgenic lines could be used for further
functional analysis.

Results (Vietnamese) 1:

7 tuần tuổi Arabidopsis nhà máy trong đóTất cả các hạt giống và Hoa, ngoại trừ các chồi, đã được gỡ bỏ(Hình 2A) và đã được sử dụng cho Agrobacteriummediatedbiến đổi theo chân khôngphương pháp xâm nhập (hình 2B); [33]. nồicó chứa Arabidopsis nhà máy được đặt upsidedowntrong 600 mL dung dịch Agrobacteriumcó chứa 1,32 g MS trung bình, 30 g sucrose, và200 L silwet, và chân không đã được áp dụng trong 5 phútđể tạo điều kiện nhiễm (hình 2 c). Sau khi xâm nhập,Các cây được trồng trong phòng bình thường tăng trưởng đểthu hoạch hạt giống (hình 2D). Các hạt giống được gieovề MS trung bình có chứa kanamycin, và cáctransformants đã được lựa chọn; cây giống củatransformants không bật màu vàng và cho thấysự tăng trưởng bất thường so với các biến đổi gendây chuyền (hình 2E). Này dòng biến đổi gen được gọi là T1nhà máy. Đường T1 còn sống sót được trồng trong đất,Các hạt giống đã được thu hoạch, và những hạt giốnggieo một lần nữa trên MS trung bình chứaKanamycin. Các cây giống nên có một 3sự sống còn: 1 tỉ lệ sống sót Liên Hiệp Quốc (hình 2F). Những dòng này biến đổi gen được gọi là nhà máy T2. Cáccòn sống sót T2 dòng được trồng trong đất, và cáchạt giống đã được thu hoạch. Tất cả các hạt sống sót trên MSphương tiện có chứa kanamycin (hình 2 g), màbây giờ được gọi là đồng nhất T3 thực vật. T3Homo dòng được trồng để khuyếch đại những hạt giống chochức năng khảo nghiệm (hình 2 H). Để xác nhận cho dùERD4 gen đã được giới thiệu thành công thànhđường T3, RT-PCR được thực hiện với cácchất nền, mồi đặc trưng cho ERD4 gen. Kết quảcho thấy thế mạnh ban nhạc tương ứng với ERD4gen đã được quan sát thấy ở tất cả các dòng biến đổi gen (Fig.2i), xác nhận rằng cà phê ERD4 gen làthành công, đưa vào nhà máy Arabidopsis.Những dòng này biến đổi gen có thể được sử dụng để tiếp tụcgiải tích hàm.

Results (Vietnamese) 2:

Cây Arabidopsis Bảy tuần tuổi, trong đó
tất cả các hạt giống và hoa, ngoại trừ nụ, đã được gỡ bỏ
(Hình 2A.) Và được sử dụng cho Agrobacteriummediated
chuyển đổi theo chân
phương pháp xâm nhập (Hình 2B.); [33]. Các nồi
chứa cây Arabidopsis được đưa upsidedown
trong 600 ml dung dịch Agrobacterium
chứa 1,32 g môi trường MS, 30 g sucrose, và
200 L silwet, và chân không được áp dụng cho 5 phút
để tạo thuận lợi cho nhiễm trùng (Hình. 2C). Sau khi xâm nhập,
các cây được trồng trong phòng tăng trưởng bình thường để
thu hoạch những hạt giống (Hình. 2D). Các hạt giống đã được gieo
trên môi trường MS có chứa kanamycin, và
biến nạp đã được lựa chọn; cây con của
không thể biến chuyển sang màu vàng và cho thấy
sự tăng trưởng bất thường so với các biến đổi gen
dòng (Hình. 2E). Đây dòng biến đổi gen được gọi là T1
thực vật. Các dòng T1 còn sống sót đã được trồng trên đất,
những hạt giống được thu hoạch, và những hạt giống đã được
gieo lại trên môi trường MS có chứa
kanamycin. Các cây giống nên có 3
sự sống: 1 tỷ lệ bỏ sót (Hình 2F.). Những dòng biến đổi gen được gọi là cây T2. Các
dòng T2 còn sống sót đã được trồng trên đất, và các
hạt được thu hoạch. Tất cả các giống sống sót trên MS
môi trường có chứa kanamycin (Hình. 2G), mà
bây giờ được gọi là cây T3 đồng nhất. T3
dòng homo được trồng để khuếch đại các hạt giống để
khảo nghiệm chức năng (Hình. 2H). Để khẳng định
gen ERD4 đã giới thiệu thành công vào
các đường T3, RT-PCR được thực hiện với các
cặp mồi đặc hiệu cho gen ERD4. Kết quả
cho thấy rằng ban nhạc mạnh tương ứng với ERD4
gen đã được quan sát thấy trong tất cả các dòng biến đổi gen (Hình.
2I), xác nhận rằng gen cà phê ERD4 đã
giới thiệu thành công vào cây Arabidopsis.
Những dòng biến đổi gen có thể được sử dụng để tiếp tục
phân tích chức năng.