Protease enzyme from Bacillus megat

Protease enzyme from Bacillus megaterium was successively purified by ammonium sulfate
precipitation, ion exchange chromatography on DEAE-cellulose and gel filtration chromatography
on Sephadex G-200. The purification steps of protease resulted in the production of two
protease fractions namely protease P1 and P2 with specific activities of 561.27 and 317.23 U mg1
of protein, respectively. The molecular weights of B. megaterium P1 and P2 were 28 and 25 KDa,
respectively. The purified fractions P1 and P2 were rich in aspartic acid and serine. Relatively higher
amounts of alanine, leucine, glycine, valine, thereonine valine and glutamic acid were also present.
The maximum protease activities for both enzyme fractions were attained at 50 C, pH 7.5, 1% of
gelatine concentration and 0.5 enzyme concentrations. P1 and P2 fractions were more stable over
pH 7.0–8.5 and able to prolong their thermal stability up to 80 C. The effect of different inhibitors
on the protease activity of both enzyme fractions was also studied. The enzyme was found to be
serine active as it had been affected by lower concentrations of phenylmethylsulfonyl fluoride
(PMSF). Complete dehairing of the enzyme-treated skin was achieved in 12 h, at room temperature.
ª 2013 Production and hosting by Elsevier B.V. on behalf of Academy of Scientific Research &
Technology

Results (Thai) 1:

รติเอสเอนไซม์จาก megaterium คัดถูกติด ๆ กันบริสุทธิ์ โดยแอมโมเนียซัลเฟตฝน chromatography แลกเปลี่ยนไอออนบน DEAE-เซลลูโลส และเจลอาบน้ำ chromatographyบน Sephadex G-200 ขั้นตอนฟอกรติเอสส่งผลให้การผลิตของทั้งสองรติเอสเศษรติเอสคือ P1 และ p 2 กับกิจกรรมเฉพาะของ 561.27 และ 317.23 U มิลลิกรัม 1โปรตีน ตามลำดับ น้ำหนักโมเลกุลของ megaterium เกิด P1 และ p 2 ได้ 28 และ 25 KDaตามลำดับ เศษส่วนบริสุทธิ์ P1 และ p 2 กรด aspartic และแถได้ ค่อนข้างสูงอะลานีน leucine, glycine วาลีน วาลีน thereonine และเมตก็ยังอยู่กิจกรรมรติเอสสูงสุดสำหรับเศษส่วนเอนไซม์ทั้งสองได้บรรลุที่ 50 C, pH 7.5, 1% ของgelatine ความเข้มข้นและความเข้มข้นเอนไซม์ 0.5 ส่วน P1 และ p 2 ได้มั่นคงกว่าpH 7.0 – 8.5 และสามารถขยายเวลาของความมั่นคงความร้อนได้ 80 ซี ผลของ inhibitors ที่แตกต่างกันบนรติเอสการ ของเศษส่วนทั้งสองเอนไซม์ถูกยังเรียน เอนไซม์ที่พบสามารถงานที่ได้รับผลกระทบจากความเข้มข้นต่ำของฟลูออไรด์ phenylmethylsulfonyl แถ(PMSF) Dehairing สมบูรณ์ผิวเอนไซม์ถือว่าสำเร็จใน h 12 ที่อุณหภูมิห้องชื่อ 2013 ผลิตและโฮสติ้ง โดย Elsevier B.V. ในนามของสถาบันการวิจัยทางวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี

Results (Thai) 2:

เอนไซม์โปรติเอสจาก Bacillus megaterium บริสุทธิ์อย่างต่อเนื่องโดยแอมโมเนียมซัลเฟต
ตกตะกอนโครมาแลกเปลี่ยนไอออนบน DEAE-เซลลูโลสและโคกรองเจล
ในเอนไซม์ G-200 ขั้นตอนการทำให้บริสุทธิ์ของโปรติเอสส่งผลให้การผลิตของสอง
เศษส่วนโปรติเอสคือ P1 และ P2 โปรติเอสกับกิจกรรมที่เฉพาะเจาะจงของ 561.27 และ 317.23 mg U 1
ของโปรตีนตามลำดับ น้ำหนักโมเลกุลของ B. megaterium P1 และ P2 เป็น 28 และ 25 กิโลดาลตัน
ตามลำดับ เศษส่วนบริสุทธิ์ P1 และ P2 มีอุดมไปด้วยกรด aspartic และซีรีน ค่อนข้างสูงกว่า
ปริมาณของอะลานีน, Leucine, Glycine, valine, valine thereonine และกรดกลูตามิกยังเป็นปัจจุบัน.
กิจกรรมโปรติเอสสูงสุดสำหรับทั้งเศษส่วนเอนไซม์ถูกบรรลุที่ 50 องศาเซลเซียสพีเอช 7.5, 1% ของ
ความเข้มข้นของเจลาตินและ 0.5 ความเข้มข้นของเอนไซม์ P1 และ P2 เศษส่วนมีเสถียรภาพมากขึ้นกว่า
ค่าพีเอช 7.0-8.5 และสามารถที่จะยืดเสถียรภาพทางความร้อนของพวกเขาขึ้นถึง 80 องศาเซลเซียส ผลของการยับยั้งที่แตกต่างกัน
เกี่ยวกับกิจกรรมโปรติเอสของทั้งสองเศษส่วนเอนไซม์ยังได้ศึกษา เอนไซม์ที่ถูกพบว่าเป็น
ซีรีนที่ใช้งานในขณะที่มันได้รับผลกระทบจากความเข้มข้นต่ำของฟลูออไร phenylmethylsulfonyl
(PMSF) dehairing สมบูรณ์ของผิวเอนไซม์ที่ได้รับก็ประสบความสำเร็จใน 12 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง.
ช 2013 การผลิตและโฮสติ้งโดยเอลส์เวียร์ในนามของสถาบันการวิจัยทางวิทยาศาสตร์และ
เทคโนโลยี

Results (Thai) 3:

เอนไซม์โปรติเอสจาก Bacillus megaterium มาสบริสุทธิ์ โดยการตกตะกอนแอมโมเนียมซัลเฟต
, การแลกเปลี่ยนไอออนโครมาโทกราฟีบน DEAE เซลลูโลส และ gel filtration chromatography
บน Sephadex G-200 . ทำให้ขั้นตอนในการผลิตโปรติเอส ( protease ) 2
( P1 P2 i และกิจกรรมเฉพาะของ 561.27 317.23 U และ  1
มิลลิกรัมโปรตีนตามลำดับน้ำหนักโมเลกุลของ B . megaterium P1 P2 ) และ 28 และ 25 kDa
ตามลำดับ บริสุทธิ์และเศษส่วน P1 P2 เป็นมั่งมีในกรด aspartic และ เซริน . ปริมาณค่อนข้างสูง
ของอะลานีน ลูซีน , ไกลซีน , กรดกลูตามิค thereonine วาลีนวาลีน , และยัง ปัจจุบัน
สูงสุดทั้งเอนไซม์มีกิจกรรมเอนไซม์โปรติเอส ( บรรลุ 50  C , pH 7.5 %
1ความเข้มข้นวุ้นและ 0.5 เอนไซม์เข้มข้น P1 P2 ) และมีเสถียรภาพมากขึ้นกว่า
pH 7.0 และ 8.5 และสามารถรักษาเสถียรภาพทางความร้อนได้ถึง 80  C ผลแตกต่างยับยั้ง
บน protease activity ของเอนไซม์ และยังศึกษา เอนไซม์คือเอนไซม์ที่ใช้งาน
ตามที่ได้รับผลกระทบ โดยลดความเข้มข้นของฟลูออไรด์ phenylmethylsulfonyl
( PMSF )dehairing สมบูรณ์ของเอนไซม์ที่ผิวหนังรักษาสําเร็จใน 12 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิห้อง
ª 2013 การผลิตและโฮสติ้งที่สามารถนำเสนอในนามของสถาบันเทคโนโลยี&
การวิจัยทางวิทยาศาสตร์