ATM/ATR-Dependent DNA Double-Strand

ATM/ATR-Dependent DNA Double-Strand Break Repair Response Is Activated During Repair of High NaCl-Induced DNA Breaks. Common DNA damage repair responses include transient cell cycle arrest, during which the DNA repair occurs. We tested to see whether that happens during the disappearance of the DNA breaks after reduction of high NaCl (Fig. 2). Indeed, phosphorylation of checkpoint kinase 1 (Chk1), which contributes to all defined cell cycle checkpoints (21), occurs rapidly, and the phosphorylation is reduced by caffeine, which is an ATM/ATR inhibitor (22) (Fig. 2A). Similarly, G2/M cell cycle arrest activates rapidly when NaCl decreases, and this arrest is abrogated by caffeine (Fig. 2B). Repair of the breaks after NaCl is reduced is accompanied by formation of foci containing phosphorylated H2AX (γH2AX) (1, 5). This histone modification occurs around DNA double-strand breaks and contributes to their repair (13, 14). γH2AX is induced to a maximal level within 15 min after lowering NaCl, then gradually decreases (Fig. 2C) accompanying repair of the DSBs (Fig. 1C). The γH2AX induction is also sensitive to inhibition of ATM/ATR by caffeine (Fig. 2C). These results indicate that, when elevated NaCl is lowered, a classical ATM/ATR-dependent DNA damage response becomes activated, and they further confirm that DNA DSBs increase upon exposure to high NaCl.

Results (Thai) 1:

ตอบรับซ่อมแบ่งสองสแตรนด์ ATM/เอ ทีอาร์ขึ้นอยู่กับดีเอ็นเอถูกเรียกใช้ในระหว่างซ่อมแซมดีเอ็นเอเกิด NaCl สูงแบ่ง ตอบซ่อมความเสียหายของดีเอ็นเอทั่วไปรวมจับกุมชั่วคราวเซลล์รอบ ในระหว่างที่เกิดการซ่อมแซมดีเอ็นเอ เราทดสอบเพื่อดูว่าที่เกิดขึ้นในระหว่าง การสูญหายของดีเอ็นเอพักหลังจากลดของ NaCl สูง (Fig. 2) แน่นอน เกิด phosphorylation ของ kinase ด่าน 1 (Chk1), ซึ่งรวมจุดตรวจรอบเซลล์ที่กำหนดทั้งหมด (21), รวดเร็ว และ phosphorylation ที่ลดลง โดยคาเฟอีน ซึ่งเป็นสารยับยั้ง ATM/เอ ทีอาร์ (22) (Fig. 2A) ในทำนองเดียวกัน จับรอบเซลล์ G2/M เรียกใช้อย่างรวดเร็วเมื่อ NaCl ลดลง และการจับกุมนี้เป็น abrogated โดยคาเฟอีน (Fig. 2B) ซ่อมแซมแบ่งหลังจาก NaCl จะลดลงตามมา ด้วยการก่อตัวของ foci ประกอบด้วย phosphorylated H2AX (γH2AX) (1, 5) การแก้ไขนี้ฮิสโตนเกิดขึ้นรอบตัวแบ่งสาระคู่ดีเอ็นเอ และสนับสนุนการซ่อมแซม (13, 14) ΓH2AX เกิดจากระดับสูงสุดภายใน 15 นาทีหลังจากลด NaCl แล้วค่อย ๆ ลดลง (Fig. 2C) ซ่อมแซมมา DSBs (Fig. 1C) เหนี่ยวนำ γH2AX ยังมีความไวต่อการยับยั้งของ ATM/เอ ทีอาร์โดยคาเฟอีน (Fig. 2C) ผลลัพธ์เหล่านี้บ่งชี้ว่า เมื่อ NaCl สูงจะลดลง การตอบสนองความเสียหายของดีเอ็นเอเอ็ม/เอทีอาร์ขึ้นอยู่กับคลาสสิกจะเรียก และเพิ่มเติมยืนยันว่า ดีเอ็นเอ DSBs เพิ่มเมื่อสัมผัสกับ NaCl สูง

Results (Thai) 2:

ATM / ATR ขึ้นกับดีเอ็นเอดับเบิล Strand ตอบสนองซ่อมหยุดใช้งานได้ในระหว่างการซ่อมแซมของโซเดียมคลอไรด์สูง-Induced แบ่งดีเอ็นเอ การตอบสนองต่อความเสียหายซ่อมแซมดีเอ็นเอที่พบบ่อย ได้แก่ การจับกุมวงจรมือถือชั่วคราวในระหว่างที่ซ่อมแซมดีเอ็นเอเกิดขึ้น เราได้ทดสอบเพื่อดูว่าสิ่งที่เกิดขึ้นในระหว่างการหยุดพักการหายตัวไปของดีเอ็นเอหลังจากที่ลดลงสูงโซเดียมคลอไรด์ (รูปที่ 2). แท้จริงของฟอสโฟไคเนสด่านที่ 1 (Chk1) ซึ่งก่อให้เกิดการกำหนดจุดตรวจทั้งหมดวงจรมือถือ (21) เกิดขึ้นอย่างรวดเร็วและ phosphorylation จะลดลงคาเฟอีนซึ่งเป็นสารยับยั้ง ATM / ATR (22) (รูป. 2A) ในทำนองเดียวกัน G2 / M วงจรมือถือจับกุมเปิดใช้งานอย่างรวดเร็วเมื่อโซเดียมคลอไรด์ลดลงและการจับกุมนี้จะถูกยกเลิกโดยคาเฟอีน (รูป. 2B) ซ่อมแบ่งหลังจากโซเดียมคลอไรด์จะลดลงจะมาพร้อมกับการก่อตัวของจุดคงมี phosphorylated H2AX (γH2AX) (1, 5) การปรับเปลี่ยนสโตนนี้เกิดขึ้นรอบดีเอ็นเอแบ่งสองกลุ่มสาระและก่อให้เกิดการซ่อมแซมของพวกเขา (13, 14) γH2AXจะถูกเหนี่ยวนำให้อยู่ในระดับสูงสุดภายใน 15 นาทีหลังจากที่ลดโซเดียมคลอไรด์แล้วค่อยๆลดลง (รูป. 2C) ที่มาพร้อมกับการซ่อมแซมของ DSBs (รูป. 1C) เหนี่ยวนำγH2AXยังมีความไวต่อการยับยั้งการ ATM / ATR โดยคาเฟอีน (รูป. 2C) ผลการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าเมื่อยกระดับโซเดียมคลอไรด์จะลดลง, คลาสสิก ATM / ATR ขึ้นอยู่กับการตอบสนองต่อความเสียหายดีเอ็นเอกลายเป็นเปิดใช้งานและพวกเขาต่อไปยืนยันว่าการเพิ่มขึ้นดีเอ็นเอ DSBs เมื่อสัมผัสกับโซเดียมคลอไรด์สูง

Results (Thai) 3:

ATM / ATR ขึ้นอยู่กับ DNA คู่เกลียวแบ่งการใช้งานระหว่างซ่อม ซ่อมของ NaCl สูงกระตุ้น DNA แบ่ง พบดีเอ็นเอซ่อมแซมความเสียหายของการตอบสนองรวมถึงวงจรการจับกุมชั่วคราวในระหว่างที่มีการซ่อมแซมดีเอ็นเอเกิดขึ้น เราทำการทดสอบเพื่อดูว่าเกิดอะไรขึ้นระหว่างการหายตัวไปของดีเอ็นเอแตกหลังจากการลดเกลือโซเดียมสูง ( รูปที่ 2 ) แน่นอนปฏิกิริยาฟอสโฟรีเลชันของไคเนส 1 ( ด่าน chk1 ) ซึ่งมีส่วนช่วยให้กำหนดวงจรมือถือด่าน ( 21 ) เกิดขึ้นอย่างรวดเร็วและลดคาเฟอีน กรุงเทพมหานคร ซึ่งเป็นตู้ ATM / ATR inhibitor ( 22 ) ( รูปที่ 2A ) เหมือนกับ , G2 / M รอบจับกระตุ้นเซลล์อย่างรวดเร็วเมื่อเกลือลดลง และการจับกุมนี้เป็น abrogated โดยคาเฟอีน ( รูปที่ 2B )ซ่อมเบรคหลังจากที่เกลือจะลดลง จะมาพร้อมกับการบันทึกที่มีฟอสฟอรีเลเตต h2ax ( γ h2ax ) ( 1 , 5 ) นี้การปรับเปลี่ยนเกิดขึ้นรอบเกลียว DNA คู่ช่วยแบ่งและจัดสรรเพื่อซ่อมแซม ( 13 , 14 ) γ h2ax คือกระตุ้นให้ระดับสูงสุดภายใน 15 นาทีหลังจากการลดเกลือ จากนั้นค่อยๆ ลดลง ( รูปที่ 2 ) กับการซ่อมของ dsbs ( ภาพที่ 1c )การγ h2ax เหนี่ยวยังไวต่อการยับยั้ง ATM / ATR โดยคาเฟอีน ( รูปที่ 2 ) ผลลัพธ์เหล่านี้แสดงให้เห็นว่า เมื่อยกระดับพีเอชลดลงเป็น ATM / คลาสสิก ATR ขึ้นอยู่กับความเสียหายของดีเอ็นเอการตอบสนองจะกลายเป็นเปิดใช้งานและพวกเขายังยืนยันว่าดีเอ็นเอ dsbs เพิ่มเมื่อแสง NaCl สูง