MATERIALS AND METHODSPREPARATION OF

MATERIALS AND METHODS
PREPARATION OF FRUIT EXTRACTION
The fruits of Rhodomyrtus tomentosa were collected from
Kuala Rompin, Pahang. It was cleaned and dried at room
temperature for two days. The dried fruits were grinded
to powder form and extracted with 300 mL of petroleum
ether, chloroform, methanol and water consecutively. The
extraction mixtures were incubated in water bath at 40oC
for 2 h. The mixture was filtered and the filtrate evaporated
to dryness using vacuum rotary evaporator at 40oC. The
dried crude extracts were kept in air tight sample bottles
until further used.
SEPARATION AND IDENTIFICATION OF PLANT
CHEMICAL COMPOUNDS
The chemical compounds presence in the Rhodomyrtus
tomentosa extract was separated using thin layer
chromatography. The presence of phenols, terpenoids
and alkaloids were detected by using folin-calticeau,
vannilin-H2SO4 and Dragendorf reagent, respectively.
The identification chemical compounds were identified
using high pressure liquid chromatography (HPLC) and
gas chromatography mass spectroscopy (GCMS) with
referenced to known standard compounds.
DETERMINATION OF ANTIOXIDANT ACTIVITY
1,1-DIPHENYL-2-PICRYLHYDRAZYL (DPPH)
RADICAL SCAVENGING ASSAY
The DPPH test was adopted from Yen and Hsieh (1998).
DPPH of 8 mg/mL was prepared by adding 0.04 g of DPPH
in 5 mL of methanol. A stock solution of ascorbic acid in
methanol was prepared at the concentration of 400 μg/
mL and kept in flask wrapped in aluminium foil. The
reaction mixtures consist of ascorbic acid, DPPH and
fruit extracts were incubated at room temperature for 30
min. The DPPH radical was used without ascorbic acid as
control. The quenching of free radicals by ascorbic acid is
measured spectrophotometrically at 517 nm. The degree
of discoloration indicates the free radical scavenging
efficiency of ascorbic acid. The percentage of inhibition
of DPPH was determined using the formula:
% of DPPH Inhibition = [(OD control – OD sample)
/ OD control] × 100,
where ODcontrol is the absorbance value of control and
ODsample is the absorbance value of sample or crude extract.
A graph of percentage of DPPH inhibitions against
concentration was plotted to determine the LC50 value
which was defined as the concentration at which 50% of
DPPH radicals is inhibited

Results (Indonesian) 1:

BAHAN DAN METODEPENYUSUNAN BUAH EKSTRAKSIBuah-buah Rhodomyrtus tomentosa dikumpulkan dariKuala Rompin, Pahang. Itu dibersihkan dan kering di kamarsuhu selama dua hari. Buah-buahan kering yang digilinguntuk bentuk bubuk dan diekstraksi dengan 300 mL minyaketer, kloroform, metanol dan air berturut-turut. Theekstraksi campuran yang diinkubasi dalam penangas air pada 40oCuntuk 2 h. Campuran disaring dan menguap Filtratkekeringan menggunakan rotary evaporator vakum di 40oC. Theekstrak kering kasar disimpan dalam botol sampel udara ketatsampai selanjutnya digunakan.PEMISAHAN DAN IDENTIFIKASI TANAMANSENYAWA KIMIAKehadiran senyawa kimia dalam Rhodomyrtusekstrak tomentosa terpisah menggunakan lapisan tipiskromatografi. Kehadiran fenol, terpenoidsdan alkaloid terdeteksi dengan menggunakan folin-calticeau,vannilin-H2SO4 dan reagen Dragendorf, masing-masing.Identifikasi senyawa kimia yang diidentifikasimenggunakan tinggi tekanan kromatografi cair (HPLC) dankromatografi gas massa spektroskopi (GCMS) dengandireferensikan senyawa standar dikenal.PENENTUAN AKTIVITAS ANTIOKSIDAN1,1-DIFENIL-2-PICRYLHYDRAZYL (DPPH)RADIKAL PEMULUNGAN ASSAYTes DPPH diadopsi dari Yen dan Hsieh (1998).DPPH 8 mg/mL disiapkan oleh menambahkan 0,04 g DPPHdalam 5 mL metanol. Larutan asam askorbat dalam sahammetanol disiapkan konsentrasi 400 μg /mL dan disimpan dalam labu dibungkus dalam aluminium foil. Thecampuran reaksi terdiri dari asam askorbat, DPPH danekstrak buah-buahan yang diinkubasi pada suhu kamar selama 30min. DPPH radikal digunakan tanpa asam askorbat sebagaikontrol. Kemasukan semula radikal oleh asam askorbat adalahdiukur spectrophotometrically pada 517 nm. Tingkatperubahan warna menunjukkan pemulungan radikal bebasefisiensi asam askorbat. Persentase inhibisidari DPPH ditentukan menggunakan rumus:% DPPH inhibisi = [(OD control-OD sampel)/ OD kontrol] × 100,mana ODcontrol adalah nilai absorbansi kontrol danODsample adalah nilai absorbansi sampel atau mentah ekstrak.Grafik persentase DPPH hambatan terhadapkonsentrasi diplot untuk menentukan nilai LC50yang didefinisikan sebagai konsentrasi di mana 50% dariRadikal DPPH dihambat

Results (Indonesian) 2:

BAHAN DAN METODE
PERSIAPAN BUAH EKSTRAKSI
Buah dari kemunting dikumpulkan dari
Kuala Rompin, Pahang. Itu dibersihkan dan dikeringkan pada ruang
suhu selama dua hari. Buah-buahan kering yang digiling
ke bentuk bubuk dan diekstraksi dengan 300 ml petroleum
eter, kloroform, metanol dan air berturut-turut. The
campuran ekstraksi diinkubasi di bak air pada suhu 40oC
selama 2 jam. Campuran disaring dan filtrat diuapkan
sampai kering dengan menggunakan vacuum evaporator rotary pada suhu 40oC. The
ekstrak mentah kering disimpan di udara botol sampel ketat
sampai lanjut digunakan.
PEMISAHAN DAN IDENTIFIKASI TANAMAN
KIMIA SENYAWA
Senyawa kimia kehadiran di Rhodomyrtus
ekstrak tomentosa dipisahkan menggunakan lapisan tipis
kromatografi. Kehadiran fenol, terpenoid
dan alkaloid yang terdeteksi dengan menggunakan Folin-calticeau,
vannilin-H2SO4 dan Dragendorf reagen, masing-masing.
Senyawa-senyawa kimia identifikasi diidentifikasi
menggunakan kromatografi cair tekanan tinggi (HPLC) dan
spektroskopi massa kromatografi gas (GCMS) dengan
dirujuk ke dikenal senyawa standar.
PENENTUAN aNTIOKSIDAN KEGIATAN
1,1-Diphenyl-2-pikrilhidrazil (DPPH)
RADICAL pemulungan ASSAY
tes DPPH diadopsi dari Yen dan Hsieh (1998).
DPPH dari 8 mg / mL dibuat dengan menambahkan 0,04 g DPPH
dalam 5 ml metanol. Sebuah larutan stok asam askorbat dalam
metanol disiapkan pada konsentrasi 400 mg /
mL dan disimpan dalam termos dibungkus aluminium foil. The
campuran reaksi terdiri dari asam askorbat, DPPH dan
buah ekstrak diinkubasi pada suhu kamar selama 30
menit. DPPH radikal digunakan tanpa asam askorbat sebagai
kontrol. Pendinginan radikal bebas oleh asam askorbat
diukur spektrofotometri pada 517 nm. Tingkat
perubahan warna menunjukkan radikal bebas
efisiensi asam askorbat. Persentase penghambatan
DPPH ditentukan dengan rumus:
% dari DPPH Penghambatan = [(kontrol OD - OD sampel)
/ control OD] × 100,
di mana ODcontrol adalah nilai absorbansi kontrol dan
ODsample adalah nilai absorbansi sampel atau crude ekstrak.
grafik persentase hambatan DPPH terhadap
konsentrasi diplot untuk menentukan nilai LC50
yang didefinisikan sebagai konsentrasi di mana 50% dari
radikal DPPH terhambat