and found that the male germ cells

and found that the male germ cells did not enter meiosis at
PND 8.5. Abundant spermatocytes appear at PND 10.5 but not at
PND 8.5.
Here, we identified 104 differentially expressed proteins
(≥1.5 fold expression and P < 0.05). These proteins were then
annotated to specific cell processes based on the results of a
bioinformatic analysis. Of these 104 proteins, 48 were found to
be involved in cell proliferation, cell differentiation, apoptosis,
spermatogenesis, and meiosis. The expression levels of
several important proteins involved in meiosis, such as SCP3
[26,27], SYCE1 [28,29], and ATR [30], were increased in PND
10.5 testes. Stra8 is a known protein required for meiotic
initiation [13,14,31], and in our proteomic profile, this protein
was up regulated in PND 10.5 testes. Because Stra8 is known to
be regulated by RA, its identification in our study showed the
ability of proteomic technology to identify RA signaling
proteins during meiosis initiation in male mice.
We focused on the RA pathway via Pathway Studio
software analysis. Six proteins, including STRA8, were annotated
to RA stimulation. Of these, PDCD4 contributes to
RA-induced terminal granulocytic differentiation of human
myeloid leukemia cells [32]. Another study found that Camk1
is upregulated in an immediate early fashion during
RA-induced neutrophil maturation [33]. TFRC, also known as
CD71, was downregulated by ATRA in the human leukemic
cell line HT93 during differentiation into eosinophilic lineage
[34]. However, all these results were obtained for somatic
cells. It remains to be determined whether these proteins
respond to RA stimulation even during meiosis initiation in
male mice. Thus, we chose the abovementioned four proteins
and Scp3 for further exploration.
The expression patterns of these proteins were validated via
Western blot analysis, and the results were highly consistent
with the results of the TMT quantification. Then, RAREs were
searched upstream of the transcriptional start sites of the three
genes (Pdcd4, Camk1, and Tfrc), and the 2-kb region before the
transcriptional start site for each gene was analyzed for a
consensus RARE sequence (AGGTCAXXXXXAGGTCA) [35]. Of
these, only Tfrc was found to have one RARE element in the
putative 2-kb promoter region, indicating that it might be RA
responsive.
Transition from an undifferentiated to a differentiated state
in spermatogonia is regulated by activation of RA signaling and
involves the attainment of KIT receptor expression. Upon RA
stimulation, the undifferentiated spermatogonial population in
the SSC cell line transits into the differentiated state, and the
expression levels of several genes are increased [36,37]. To verify
whether the Tfrc gene was really RA responsive, we treated the
steady mouse SSC line established in our lab [23] with ATRA or
DMSO (vehicle control) with 24 h stimulation. The results
showed that Stra8, Scp3, and Tfrc were significantly up regulated,
while Camk1 and Pdcd4 were downregulated after RA induction.
Therefore, similar to Stra8, Tfrc is also a RA-responsive gene in
germ cells.
Transferrin receptor or Tfrc, also known as CD71, is required
for erythropoiesis and neurological development [38,39]. Skinner
and Griswold reported that rat Sertoli cells in vitro secreted
transferrin, although the importance of transferrin in spermatogenesis
remained to be fully elucidated [40]. Vannelli et al.
found that transferrin was mainly located in Sertoli cells in
human seminiferous tubules, while Tfrc was found only in
spermatocytes and early spermatids [41]. In the present study,
because of the poor quality of antibodies used in immunolocalization,
wewere unable to obtain cellular localization of TFRC in
seminiferous tubules. Together with previous reports, our
findings suggest that TFRC might play an important role during
meiosis initiation in male mice. However, further studies are
needed to elucidate its function.
Of the purchased antibodies, only PDCD4 could be used for
the immunolocalization test. We found that Pdcd4 was highly
expressed in the spermatogonia of both PND 8.5 and 10.5 testes.
More seminiferous tubules were found to have PDCD4 positive
spermatogonia at PND 10.5 compared with PND 8.5. And for
PDCD4 positive seminiferous tubules, we found that the ratio of
PDCD4 positive cells was also higher at PND 10.5. Although Pdcd4
was upregulated after RA stimulation in somatic cells [32], itwas
downregulated in SSCs. The results of our study revealed that
Pdcd4 might not be the direct target of RA in the initiation of
meiosis. Pdcd4 is a tumor suppressor that binds to the eukaryotic
translation initiation factor 4A1 and inhibits its function by
preventing RNA binding [42,43]. In 2012, Cash and Andrews [44]
reported the mutant phenotype of loss-of-function pdcd4,
Bam-dependent differentiation of female germline stem cells
may be delayed, leading to an accumulation of pre-cystoblasts in
Drosophila melanogaster. It is possible that Pdcd4 is necessary for
mouse spermatogonial differentiation, which involves the entry
of spermatogonia into meiotic prophase.

5. Conclusions
We carried out comparative proteomic analysis of mouse
testes during the first wave of spermatogenesis, and characterized
the proteomic profile involving meiotic initiation. Our
results indicate that RA might be important for the meiotic
initiation of germ cells in the postnatal testes. The findings of
our study can be a rich resource for further elucidation of the
mechanism of male meiosis initiation.
Supplementary data to this article can be found online at
http://dx.doi.org/10.1016/j.jprot.2015.02.015.

Conflict of interest
The authors declare no competing financial interest.

Transparency document
The Transparency document associated with this article can
be found, in the online version.

Acknowledgments
This work was supported by grants from the National Basic
Research Program of China (2011CB944301, 2013CB911400),
the Chinese Natural Science Funds (31271537, 81222006), and
Qing Lan Project.

Results (Thai) 1:

และพบว่า เซลล์ที่จมูกชายไม่ใส่ไมโอซิสที่ภงด. 8.5 Spermatocytes อุดมสมบูรณ์ปรากฏ ที่ 10.5 ภงด. แต่ไม่ได้อยู่ที่ภงด. 8.5ที่นี่ เราระบุโปรตีนแสดง differentially 104(P และนิพจน์พับ ≥1.5 < 0.05) โปรตีนเหล่านี้ได้แล้วใส่คำอธิบายประกอบเพื่อยึดตามผลลัพธ์ของกระบวนการเฉพาะการวิเคราะห์ผลเชิงวิวัฒนาการ ของโปรตีนเหล่านี้ 104, 48 พบการมีส่วนร่วมในการแพร่หลายของเซลล์ เซลล์สร้างความแตกต่าง apoptosisการสร้างสเปิร์ม และไมโอซิส ระดับของนิพจน์โปรตีนที่สำคัญต่าง ๆ ที่เกี่ยวข้องในไมโอซิส เช่น SCP3[26,27], SYCE1 [28,29], และเอทีอาร์ [30], เพิ่มอีกในภงดลิ้ม 10.5 Stra8 เป็นโปรตีนรู้จักกันที่จำเป็นสำหรับ meioticเริ่มต้น [13,14,31], และ ใน โปรไฟล์ของเรา proteomic โปรตีนนี้ค่าถูกควบคุมในภงด. 10.5 ลิ้ม เนื่องจาก Stra8 เป็นที่รู้จักกันถูกควบคุม โดย RA รหัสนั้นในการศึกษาของเราพบว่าการความสามารถของเทคโนโลยี proteomic เพื่อระบุสัญญาณ RAโปรตีนระหว่างหนูเพศครบครันไมโอซิสเราเน้นทางเดิน RA ผ่านสตูดิโอทางเดินวิเคราะห์ซอฟแวร์ โปรตีน 6, STRA8 รวมทั้งได้ใส่คำอธิบายประกอบการกระตุ้น RA เหล่านี้ PDCD4 รวมRA เกิดจากเทอร์มินัล granulocytic สร้างความแตกต่างของบุคคลเซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิดไมอิลอยด์ [32] ศึกษาอื่นพบว่า Camk1มี upregulated ในการแฟชั่นช่วงทันทีในระหว่างการเกิดจาก RA neutrophil พ่อแม่ [33] TFRC เรียกอีก อย่างว่าCD71 ถูก downregulated โดย ATRA ในมนุษย์ leukemicรายการเซลล์ HT93 ระหว่างดันลินเนจ eosinophilic[34] . อย่างไรก็ตาม ผลลัพธ์เหล่านี้ได้รับมาสำหรับ somaticเซลล์ ยังคงต้องกำหนดว่าโปรตีนเหล่านี้ตอบสนองต่อการกระตุ้น RA แม้ระหว่างครบครันไมโอซิสหนูชาย ดังนั้น เราเลือกดังกล่าวข้างต้นโปรตีน 4และ Scp3 สำหรับการสำรวจเพิ่มเติมรูปแบบนิพจน์ของโปรตีนเหล่านี้ถูกตรวจสอบผ่านวิเคราะห์ตะวันตกคืนในตา และผลลัพธ์สอดคล้องกันสูงมีผลนับ TMT แล้ว RAREs ได้ค้นหาต้นน้ำของอเมริกาเริ่มต้น transcriptional สามยีน (Pdcd4, Camk1 และ Tfrc), และภูมิภาค 2 kb ก่อนไซต์ transcriptional เริ่มต้นสำหรับแต่ละยีนมีวิเคราะห์ความเป็นช่วยหายากลำดับ (AGGTCAXXXXXAGGTCA) [35] ของเหล่านี้ เฉพาะ Tfrc พบได้ยากองค์หนึ่งในการโปรโมเตอร์ 2 kb putative ภูมิภาค บ่งชี้ว่า อาจเป็น RAตอบสนองเปลี่ยนจากการ undifferentiated รัฐต่าง ๆใน spermatogonia กำหนดเปิดใช้งานตามปกติ RA และเกี่ยวข้องโดยชุดตัวรับนิพจน์ เมื่อ RAกระตุ้น ประชากร spermatogonial undifferentiated ในรายการเซลล์ SSC transits ในรัฐต่าง ๆ และนิพจน์ระดับของยีนต่าง ๆ เพิ่มขึ้น [36,37] การตรวจสอบว่ายีน Tfrc ถูกจริง ๆ ตอบสนอง RA เราถือว่าการคงบรรทัด SSC เมาส์ที่ก่อตั้งขึ้นในแล็บของเรา [23] มี ATRA หรือDMSO (รถควบคุม) กับกระตุ้น 24 ชม ผลลัพธ์พบว่า Stra8, Scp3 และ Tfrc ก็มากขึ้นควบคุมในขณะที่ Camk1 และ Pdcd4 downregulated หลังจากเหนี่ยวนำ RAดังนั้น เช่นเดียวกับ Stra8, Tfrc ก็ยีน RA ตอบสนองในจมูกมีเซลล์ตัวรับ transferrin หรือ Tfrc เรียกอีกอย่างว่า CD71erythropoiesis และพัฒนาระบบประสาท [38,39] สกินเนอร์และ Griswold รายงานว่า การเพาะเลี้ยงเซลล์ Sertoli ราษฎร์ secretedtransferrin แม้ว่าความสำคัญของ transferrin ในการสร้างสเปิร์มยังคงจะ เต็ม elucidated [40] Vannelli et alพบ transferrin ที่ส่วนใหญ่ตั้งอยู่ในเซลล์ Sertoliมนุษย์ seminiferous tubules ขณะ Tfrc พบเฉพาะในspermatocytes และต้น spermatids [41] ในการศึกษาปัจจุบันเนื่องจากคุณภาพที่ไม่ดีของใช้ใน immunolocalization แอนตี้ไม่สามารถรับโทรศัพท์มือถือแปลของ TFRC ใน wewereseminiferous tubules พร้อมกับรายงานก่อนหน้านี้ เราผลการวิจัยแนะนำว่า TFRC อาจมีบทบาทสำคัญในระหว่างการเริ่มต้นไมโอซิสในหนูเพศชาย อย่างไรก็ตาม เพิ่มเติมศึกษาได้ต้อง elucidate ของฟังก์ชันของแอนตี้ซื้อ PDCD4 เท่านั้นสามารถใช้การทดสอบ immunolocalization เราพบว่า Pdcd4 มีสูงแสดงใน spermatogonia ภงด. 8.5 และลิ้ม 10.5พบมาก seminiferous tubules จะบวก PDCD4spermatogonia ที่เปรียบเทียบกับภงด. 8.5 10.5 ภงด และสำหรับPDCD4 บวก seminiferous tubules เราพบว่าอัตราส่วนของPDCD4 บวกเซลล์ยังสูงที่ 10.5 ภงด แม้ว่า Pdcd4มี upregulated หลังจากกระตุ้น RA ในมาติกเซลล์ [32], มันเป็นdownregulated ใน SSCs เปิดเผยผลการศึกษาของเราที่Pdcd4 อาจเป็นเป้าหมายโดยตรงของ RA ในการเริ่มต้นของไมโอซิส Pdcd4 เป็นตัวป้องกันไฟเกินมีเนื้องอกที่ binds ไปใน eukaryoticเริ่มต้นแปลปัจจัย 4A1 และยับยั้งหน้าที่โดยป้องกันการผูกอาร์เอ็นเอ [42,43] ใน 2012 เงินสดและแอนดรูวส์ [44]รายงาน phenotype การกลายพันธุ์ของสูญเสียฟังก์ชัน pdcd4สร้างความแตกต่างขึ้นอยู่กับการอำนวยการมูลนิธิหญิง germline สเต็มเซลล์อาจจะล่าช้า นำไปสู่การสะสมของ cystoblasts ก่อนในแมลงวันทอง เป็นไปได้ว่า Pdcd4 จำเป็นสำหรับเมาส์ spermatogonial สร้างความแตกต่าง ซึ่งเกี่ยวข้องกับรายการของ spermatogonia ใน meiotic prophase5. บทสรุปเราดำเนินการวิเคราะห์เปรียบเทียบ proteomic ของเมาส์ลิ้มลองช่วงคลื่นแรกของการสร้างสเปิร์ม และลักษณะโพรไฟล์ proteomic ที่เกี่ยวข้องกับการเริ่มต้น meiotic ของเราผลลัพธ์บ่งชี้ว่า RA อาจสำคัญสำหรับแบบ meioticเริ่มต้นของเซลล์จมูกลิ้ม postnatal ผลการวิจัยของเราสามารถรวยทรัพยากรสำหรับ elucidation เพิ่มเติมของการกลไกของการเริ่มต้นชายไมโอซิสข้อมูลเสริมบทความนี้สามารถพบออนไลน์ที่http://dx.doi.org/10.1016/j.jprot.2015.02.015ความขัดแย้งทางผลประโยชน์ผู้เขียนประกาศดอกเบี้ยเงินไม่แข่งขันเอกสารความโปร่งใสเกี่ยวข้องกับบทความนี้เอกสารความโปร่งใสสามารถพบ ในเวอร์ชันออนไลน์ตอบงานนี้ได้รับการสนับสนุน โดยเงินช่วยเหลือจากชาติพื้นฐานโปรแกรมวิจัยของจีน (2011CB944301, 2013CB911400),เงินจีนธรรมชาติวิทยาศาสตร์ (31271537, 81222006), และโครงการลานชิง

Results (Thai) 2:

และพบว่าเซลล์สืบพันธุ์เพศชายไม่ได้เข้าเซลล์ชนิดหนึ่งที่
PND 8.5 spermatocytes มากมายปรากฏที่ PND 10.5 แต่ไม่ได้
PND 8.5.
ที่นี่เราระบุโปรตีน 104 แสดงออกแตกต่างกัน
(≥1.5พับแสดงออกและ P <0.05) โปรตีนเหล่านี้ถูกแล้ว
ข้อเขียนกระบวนการเซลล์ที่เฉพาะเจาะจงขึ้นอยู่กับผลของ
การวิเคราะห์ทางชีววิทยา ของเหล่านี้ 104 โปรตีน 48 พบว่า
มีส่วนร่วมในการเพิ่มจำนวนเซลล์แตกต่างเซลล์ apoptosis,
ต่อตัวและไมโอซิส ระดับการแสดงออกของ
โปรตีนที่สำคัญหลายส่วนร่วมในการแบ่งเซลล์ชนิดหนึ่งเช่น SCP3
[26,27] SYCE1 [28,29] และเอทีอาร์ [30] เพิ่มขึ้นใน PND
10.5 อัณฑะ Stra8 เป็นโปรตีนที่เป็นที่รู้จักกันที่จำเป็นสำหรับการ meiotic
ริเริ่ม [13,14,31] และในรายละเอียดของเราโปรตีนโปรตีนนี้
ถูกควบคุมใน PND 10.5 อัณฑะ เพราะ Stra8 เป็นที่รู้จักกัน
ได้รับการควบคุมโดย RA ​​บัตรประจำตัวในการศึกษาของเราแสดงให้เห็น
ความสามารถของเทคโนโลยี proteomic เพื่อระบุ RA สัญญาณ
โปรตีนไมโอซิสในช่วงเริ่มต้นในหนูเพศชาย.
เรามุ่งเน้นไปที่ทางเดิน RA ผ่าน Pathway สตูดิโอ
การวิเคราะห์ซอฟแวร์ หกโปรตีนรวมทั้ง STRA8 ถูกข้อเขียน
การกระตุ้น RA เหล่านี้ก่อให้เกิดการ PDCD4
ขั้ว RA-induced แตกต่าง granulocytic ของมนุษย์
เซลล์มะเร็งเม็ดเลือดขาวชนิด [32] การศึกษาอื่นพบว่า Camk1
เป็น upregulated ในแฟชั่นต้นได้ทันทีในระหว่าง
การเจริญเติบโต neutrophil RA-induced [33] TFRC ยังเป็นที่รู้จัก
CD71 ถูก downregulated โดย ATRA ในมนุษย์โรคมะเร็งเม็ดเลือดขาว
เซลล์ HT93 ระหว่างความแตกต่างเป็นเชื้อสาย eosinophilic
[34] อย่างไรก็ตามผลทั้งหมดเหล่านี้ได้รับสำหรับร่างกาย
เซลล์ มันยังคงที่จะได้รับการพิจารณาว่าโปรตีนเหล่านี้
ตอบสนองต่อการกระตุ้น RA แม้ในช่วงเริ่มต้นที่เซลล์ชนิดหนึ่งใน
หนูเพศชาย ดังนั้นเราจึงเลือกที่ดังกล่าวข้างต้นสี่โปรตีน
และ Scp3 สำหรับการสำรวจต่อไป.
รูปแบบการแสดงออกของโปรตีนเหล่านี้ได้ผ่านการตรวจสอบผ่าน
การวิเคราะห์ดวงตะวัน, และผลลัพธ์ที่ได้สูงที่สอดคล้อง
กับผลของปริมาณ TMT จากนั้น Rares ถูก
ค้นหาต้นน้ำของเว็บไซต์เริ่มต้นการถอดรหัสของทั้งสาม
ยีน (Pdcd4, Camk1 และ TFRC) และภูมิภาค 2 กิโลก่อนที่จะ
เริ่มต้นของการถอดรหัสยีนแต่ละคนถูกวิเคราะห์หา
ฉันทามติลำดับหายาก (AGGTCAXXXXXAGGTCA) [35 ] ของ
เหล่านี้เพียง TFRC พบว่ามีองค์ประกอบหนึ่งของหายากใน
ภูมิภาคก่อการ 2 กิโลสมมุติแสดงให้เห็นว่ามันอาจจะเป็น RA
ตอบสนอง.
เปลี่ยนจากความแตกต่างไปยังรัฐที่มีความแตกต่าง
ใน spermatogonia ถูกควบคุมโดยการเปิดใช้งานการส่งสัญญาณ RA และ
เกี่ยวข้องกับความสำเร็จ ของชุดการแสดงออกของตัวรับ เมื่อ RA
กระตุ้นประชากร spermatogonial ความแตกต่างใน
เซลล์ SSC transits เข้าสู่สถานะที่แตกต่างกันและ
ระดับการแสดงออกของยีนหลายจะเพิ่มขึ้น [36,37] เมื่อต้องการตรวจสอบ
ว่ายีน TFRC เป็น RA ตอบสนองจริงๆที่เราได้รับการรักษา
เส้น SSC เมาส์มั่นคงขึ้นในห้องปฏิบัติการของเรา [23] ด้วย ATRA หรือ
DMSO (การควบคุมรถ) กับการกระตุ้น 24 ชั่วโมง ผล
การศึกษาพบว่า Stra8, Scp3 และ TFRC อย่างมีนัยสำคัญขึ้นควบคุม
ในขณะที่ Camk1 และ Pdcd4 ถูก downregulated หลังจากเหนี่ยวนำ RA.
ดังนั้นคล้ายกับ Stra8, TFRC นี้ยังมียีน RA-ตอบสนองใน
เซลล์สืบพันธุ์.
รับ Transferrin หรือ TFRC ยังเป็นที่รู้จัก เป็น CD71 เป็นสิ่งจำเป็น
สำหรับการสร้างเม็ดเลือดแดงและการพัฒนาระบบประสาท [38,39] สกินเนอร์
และ Griswold รายงานว่าหนู Sertoli เซลล์ในหลอดทดลองหลั่ง
transferrin แม้ว่าความสำคัญของการสร้างอสุจิใน transferrin
ยังคงได้รับการอธิบายอย่างเต็มที่ [40] Vannelli et al.
พบว่า transferrin ถูกส่วนใหญ่ตั้งอยู่ในเซลล์ Sertoli ใน
หลอดสร้างอสุจิของมนุษย์ในขณะที่ TFRC พบเฉพาะใน
spermatocytes และ spermatids ต้น [41] ในการศึกษาครั้งนี้
เป็นเพราะคุณภาพของแอนติบอดีที่ใช้ในการ immunolocalization,
wewere ไม่สามารถที่จะได้รับการแปลของเซลล์ TFRC ใน
หลอดสร้างอสุจิ ประกอบกับรายงานก่อนหน้านี้ของเรา
ผลการวิจัยชี้ให้เห็นว่า TFRC อาจมีบทบาทสำคัญใน
การริเริ่มเซลล์ชนิดหนึ่งในหนูเพศชาย อย่างไรก็ตามการศึกษาต่อไปจะ
จำเป็นในการอธิบายการทำงานของ.
ของแอนติบอดีซื้อเพียง PDCD4 สามารถนำมาใช้สำหรับ
การทดสอบ immunolocalization เราพบว่า Pdcd4 สูงได้รับการ
แสดงใน spermatogonia ทั้ง PND 8.5 และ 10.5 อัณฑะ.
tubules เพิ่มเติมอสุจิที่พบว่ามี PDCD4 บวก
spermatogonia ที่ PND 10.5 เมื่อเทียบกับ PND 8.5 และสำหรับ
หลอดสร้างอสุจิ PDCD4 บวกเราพบว่าอัตราส่วนของ
PDCD4 เซลล์บวกก็ยังสูงกว่าที่ PND 10.5 แม้ว่า Pdcd4
ถูก upregulated หลังจากการกระตุ้น RA ในเซลล์ร่างกาย [32] เป็นการกำหนดข้อสัญญา
downregulated ใน SSCs ผลการวิจัยของเราแสดงให้เห็นว่า
Pdcd4 อาจจะไม่ได้เป็นเป้าหมายโดยตรงของ RA ในการเริ่มต้นของ
เซลล์ชนิดหนึ่ง Pdcd4 เป็นต้านมะเร็งที่ผูกกับยูคาริโอ
เริ่มต้นการแปลปัจจัย 4A1 และยับยั้งการทำงานของมันโดย
การป้องกันไม่ให้มีผลผูกพันอาร์เอ็นเอ [42,43] ในปี 2012 เงินสดและแอนดรู [44]
รายงานฟีโนไทป์กลายพันธุ์ของ pdcd4 การสูญเสียของฟังก์ชั่น
ปังขึ้นอยู่กับความแตกต่างของเซลล์ต้นกำเนิด germline หญิง
อาจมีความล่าช้าที่นำไปสู่การสะสมของ cystoblasts ก่อนใน
แมลงวันทอง เป็นไปได้ว่า Pdcd4 เป็นสิ่งจำเป็นสำหรับ
ความแตกต่างของเมาส์ spermatogonial ซึ่งเกี่ยวข้องกับรายการ
ของ spermatogonia เข้าไปแวะ meiotic. 5 สรุปเราดำเนินการวิเคราะห์โปรตีนเปรียบเทียบเมาส์อัณฑะในช่วงคลื่นลูกแรกของการสร้างอสุจิและลักษณะรายละเอียดโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการเริ่มต้น meiotic ของเราแสดงให้เห็นว่าผล RA อาจจะเป็นสิ่งสำคัญสำหรับ meiotic การเริ่มต้นของเซลล์สืบพันธุ์ในอัณฑะหลังคลอด ผลการศึกษาของเราสามารถเป็นทรัพยากรที่อุดมไปด้วยสำหรับการชี้แจงต่อไปของกลไกของการเริ่มต้นเซลล์ชนิดหนึ่งชาย. ข้อมูลเพิ่มเติมไปยังบทความนี้สามารถพบได้ทั่วไปที่http://dx.doi.org/10.1016/j.jprot.2015.02.015 . ขัดแย้งทางผลประโยชน์ผู้เขียนประกาศไม่มีผลประโยชน์ทางการเงินการแข่งขัน. เอกสารโปร่งใสโปร่งใสเอกสารที่เกี่ยวข้องกับบทความนี้สามารถพบได้ในเวอร์ชั่นออนไลน์. กิตติกรรมประกาศงานนี้ได้รับการสนับสนุนโดยทุนอุดหนุนจากแห่งชาติขั้นพื้นฐานโครงการวิจัยของประเทศจีน (2011CB944301, 2013CB911400) , จีนวิทยาศาสตร์ธรรมชาติกองทุน (31271537, 81222006) และชิงโครงการลาน

Results (Thai) 3:

และพบว่าเซลล์สืบพันธุ์เพศชายไม่ได้ระบุไมโอซิสที่
PND 8.5 . เจริญมากมายปรากฏใน PND 10.5 แต่ไม่ได้
PND 8.5
ที่นี่ เราระบุ 104 แสดงออกแตกต่างกันโปรตีน
( การแสดงออก≥ 1.5 เท่าและ P < 0.05 ) โปรตีนเหล่านี้แล้ว
บันทึกย่อไปยังเซลล์เฉพาะกระบวนการขึ้นอยู่กับผลลัพธ์ของการวิเคราะห์ไบโอ นฟ ์เมติก
. เหล่านี้โปรตีน 104 , 48 พบ

มีส่วนร่วมในเซลล์ proliferation การเปลี่ยนสภาพของเซลล์ (
การสร้างสเปิร์ม และไมโอซีส . ระดับการแสดงออกของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับเหม่ง
สำคัญหลายประการ เช่น scp3
[ 26,27 ] , syce1 [ 28,29 ] และ ATR [ 30 ] , เพิ่มขึ้นใน PND
10.5 ลูกอัณฑะ stra8 เป็นโปรตีนที่จำเป็นสำหรับเซลล์ที่รู้จักการ 13,14,31
[ ] , และโปรตีนในโปรไฟล์ของเรานี้โปรตีน
ขึ้นเป็นระเบียบใน PND 105 ตัว . เพราะ stra8 เป็นที่รู้จักกัน

ถูกควบคุมโดยรา ระบุในการศึกษาของเรามีความสามารถในการระบุเทคโนโลยีส์

รา การส่งสัญญาณโปรตีนระหว่างไมโอซิสริเริ่มในหนูเพศผู้
เราเน้น รา เส้นทางผ่านทางสตูดิโอ
ซอฟต์แวร์การวิเคราะห์ 6 โปรตีน รวมทั้ง stra8 , บันทึกย่อ
การรา ของเหล่านี้ pdcd4 ก่อ

และความแตกต่างของมนุษย์ granulocytic รานัล
ลูคีเมียชนิดเซลล์ [ 32 ] การศึกษาอื่นพบว่า camk1
เป็น upregulated ในแฟชั่นก่อนทันที ในระหว่างการสุก
ราทรราช [ 33 ] นอกจากนี้ ยังเป็นที่รู้จัก
cd71 , downregulated โดยภัทรในมนุษย์และสายเซลล์ในการ ht93

[ 34 ] พบในสายเลือด . อย่างไรก็ตามผลทั้งหมดเหล่านี้ได้สำหรับโซมา
เซลล์ มันยังคงที่จะตัดสินใจว่าโปรตีนเหล่านี้ตอบสนองต่อการกระตุ้น รา แม้ในระหว่าง

หนูเหม่งเริ่มต้นในเพศชาย ดังนั้นเราจึงเลือกเน้นโปรตีนและ 4
scp3 สำหรับการสำรวจเพิ่มเติม
การแสดงออกรูปแบบของโปรตีนเหล่านี้ถูกตรวจสอบผ่าน
การวิเคราะห์ Western blot และผลลัพธ์ที่สอดคล้องสูง
กับผลลัพธ์ของ TMT ปริมาณ . แล้ว rares ถูก
ค้นหาต้นน้ำของ particle เว็บไซต์เริ่มต้นของสาม
ยีน ( pdcd4 camk1 , และ , บาท ) , และ 2-kb เขตก่อน
เว็บไซต์เริ่มต้นลองวิเคราะห์แต่ละยีนสำหรับ
เอกฉันท์ยากลำดับ ( aggtcaxxxxxaggtca ) [ 35 ] ของ
เหล่านี้เท่านั้น หากพบว่ามีธาตุหายากในการ 2-kb
นอกจากนี้ ภูมิภาคแสดงให้เห็นว่ามันอาจจะมีการเปลี่ยนแปลงจากรา
.
ไม่เสดงให้เห็นความแตกต่างกับแตกต่างรัฐ
ในอัณฑะที่ถูกควบคุมโดยการกระตุ้นสัญญาณรา
เกี่ยวข้องกับการแสดงออกของตัวรับที่สำเร็จ Kit เมื่อกระตุ้นรา
, ประชากรไม่แตกต่างกันใน spermatogonial
SSC ไพรที transits ในแตกต่างรัฐและ
ระดับการแสดงออกของยีนหลายเพิ่มขึ้น [ 36,37 ] เพื่อตรวจสอบว่าหากยีนจริงๆ

รา ตอบ เราถือว่ามั่นคงเมาส์ SSC สายก่อตั้งขึ้นใน [ 23 ] กับภัทรแล็บหรือ
DMSO ( การควบคุมยานพาหนะ ) กับสิ่งเร้า 24 H . ผลการวิจัยพบว่า stra8 scp3
, , และตัวเลขสถิติขึ้นการควบคุม
ในขณะที่ camk1 pdcd4 ) และหลังการ downregulated
ดังนั้น ราคล้ายกับ stra8 หากยังเป็นยีนที่ตอบสนองต่อช่วงรา

ทรานสเฟอรินในเซลล์สืบพันธุ์ ตัวรับ หรือหากยังเป็นที่รู้จัก cd71 จำเป็นต้องมี
สำหรับราชวงศ์โจวและการพัฒนา ( ระบบประสาท 38,39 ] และสกินเนอร์
Griswold รายงานว่าหนูเซอโตไลเซลล์ในหลอดทดลองหลั่ง
ได้รับแม้ว่าความสำคัญของทรานสเฟอรินในการสร้างสเปิร์ม
ยังคงเป็นอย่างมาก [ 40 ] vannelli et al .
พบว่าส่วนใหญ่ได้รับอยู่ในเซอโตไลเซลล์ในหลอด
มนุษย์ ในขณะที่ ศูนย์วิจัยกสิกรไทย พบเฉพาะในวัยเด็กและเส้นใย
primary [ 41 ] ในการศึกษา
เพราะคุณภาพของแอนติบอดีที่ใช้ใน immunolocalization
, พวกเราไม่สามารถที่จะได้รับการแปลโดยในมือถือของ
หลอด . ด้วยกันกับรายงานก่อนหน้านี้ของเรา
ผลการวิจัยชี้ให้เห็นว่าสหรัฐอาจมีบทบาทสำคัญในการริเริ่ม
เหม่งในหนูเพศผู้ อย่างไรก็ตาม มีการศึกษาเพิ่มเติม

ต้องอธิบายหน้าที่ของมัน ของที่ซื้อ pdcd4 แอนติบอดีเท่านั้นสามารถใช้
immunolocalization ทดสอบ เราพบว่า pdcd4 สูง
แสดงในอัณฑะของทั้ง PND 8.5 และ 10.5
ลูกอัณฑะท่ออัณฑะมากขึ้น พบว่ามี pdcd4 อัณฑะบวก
ที่ PND 10.5 เทียบกับ PND 8.5 . และสำหรับ
pdcd4 บวกหลอด เราจะพบว่า อัตราส่วนของ
เซลล์บวก pdcd4 ยังสูงกว่าที่ PND 10.5 แม้ว่า pdcd4
คือ upregulated หลังจากรากระตุ้นเทียนอบ [ 32 ] ,
downregulated ทั้งในสิงคโปร์ . ผลการศึกษาของเราพบว่า
pdcd4 อาจจะไม่ตรงเป้าหมายของราในการเริ่มต้นของ
เหม่ง . pdcd4 เป็นเนื้องอกเครื่องห้ามที่ผูกกับ eukaryotic
แปลเริ่มต้นปัจจัย 4a1 และยับยั้งการทำงานของมันโดย
ป้องกัน RNA ผูกพัน [ 42,43 ] ใน 2012 , เงินสดและแอนดรู [ 44 ]
รายงานการกลายพันธุ์ของการสูญเสียการทำงานของ pdcd4
แบม , ขึ้นอยู่กับความแตกต่างของหญิงเยอร์มไลน์สเต็มเซลล์
อาจจะล่าช้าที่นำไปสู่การสะสมของ cystoblasts ก่อนใน
แมลงวันทอง . เป็นไปได้ว่า pdcd4 ที่จําเป็นสําหรับ
เมาส์ spermatogonial ความแตกต่างที่เกี่ยวข้องกับรายการของอัณฑะในเซลล์โปรเฟส


5 สรุป
เราดำเนินการวิเคราะห์เปรียบเทียบโปรตีนอัณฑะเมาส์
ระหว่างคลื่นลูกแรกของการสร้างสเปิร์ม และลักษณะ
ส่วนรายละเอียดที่เกี่ยวข้องกับโปรตีนเซลล์เริ่มต้น ผลของเรา
แสดงว่าราอาจจะสำคัญสำหรับเซลล์
เริ่มต้นของ เซลล์สืบพันธุ์ในอัณฑะหลังคลอด . ผล
การศึกษาของเราสามารถเป็นทรัพยากรที่อุดมไปด้วยสำหรับคำชี้แจงเพิ่มเติมของกลไกของการชายเหม่ง
.
ข้อมูลเพิ่มเติมบทความนี้สามารถพบออนไลน์ที่
http : / / DX ดอย . org / 10.1016 / j.jprot 2015.02.015

. .ความขัดแย้งของผลประโยชน์
ผู้เขียนประกาศไม่แข่งขันด้านดอกเบี้ย


ความโปร่งใสเอกสาร เอกสารที่เกี่ยวข้องกับบทความนี้สามารถ
จะพบในรุ่นออนไลน์

ขอบคุณ
งานนี้ได้รับการสนับสนุนโดยการอนุญาตจากพื้นฐานการวิจัย โครงการวิจัยแห่งชาติของจีน ( 2011cb944301
,
2013cb911400 ) กองทุนวิทยาศาสตร์ ธรรมชาติ จีน ( 31271537 81222006 , ) , และ

ชิงโครงการแลน