a b s t r a c tAcute hepatopancreat

a b s t r a c t
Acute hepatopancreatic necrosis disease (AHPND), also called early mortality syndrome (EMS), is a
recently emergent shrimp bacterial disease that has resulted in substantial economic losses since 2009.
AHPND is known to be caused by strains of Vibrio parahaemolyticus that contain a unique virulence
plasmid, but the pathology of the disease is still unclear. In this study, we show that AHPND-causing
strains of V. parahaemolyticus secrete the plasmideencoded binary toxin PirABvp into the culture medium.
We further determined that, after shrimp were challenged with AHPND-causing bacteria, the
bacteria initially colonized the stomach, where they started to produce PirABvp toxin. At the same early
time point (6 hpi), PirBvp toxin, but not PirAvp toxin, was detected in the hepatopancreas, and the
characteristic histopathological signs of AHPND, including sloughing of the epithelial cells of the hepatopancreatic
tubules, were also seen. Although some previous studies have found that both components
of the binary PirABvp toxin are necessary to induce a toxic effect, our present results are consistent with
other studies which have suggested that PirBvp alone may be sufficient to cause cellular damage. At later
time points, the bacteria and PirAvp and PirBvp toxins were all detected in the hepatopancreas. We also
show that Raman spectroscopy “Whole organism fingerprints” were unable to distinguish between
AHPND-causing and non-AHPND causing strains. Lastly, by using minimum inhibitory concentrations,
we found that both virulent and non-virulent V. parahaemolyticus strains were resistant to several antibiotics,
suggesting that the use of antibiotics in shrimp culture should be more strictly regulated

Results (Thai) 2:

นามธรรมเฉียบพลันโรคเนื้อร้าย Hepatopancreatic (AHPND) หรือที่เรียกว่ากลุ่มอาการของโรคการตายของต้น (EMS) เป็นโรคกุ้งโผล่ออกมาเมื่อเร็วๆ นี้ของเชื้อแบคทีเรียที่มีผลในการสูญเสียทางเศรษฐกิจอย่างมีนัยสำคัญตั้งแต่ 2009 AHPND เป็นที่รู้จักกันที่จะเกิดจากสายพันธุ์ของเชื้อ Vibrio parahaemolyticus ที่มีที่ไม่ซ้ำกัน ความรุนแรงพลาสมิดแต่พยาธิสภาพของโรคที่ยังไม่ชัดเจน ในการศึกษานี้แสดงให้เห็นว่าเรา AHPND ที่ก่อให้เกิดสายพันธุ์ของV. parahaemolyticus หลั่งสารพิษไบนารี plasmideencoded PirABvp ลงในอาหารเลี้ยง. เรากำหนดต่อไปว่าหลังจากที่กุ้งถูกท้าทายด้วย AHPND แบคทีเรียที่ทำให้เกิดการแบคทีเรียขั้นต้นอาณานิคมกระเพาะอาหารที่พวกเขาเริ่มผลิตสารพิษ PirABvp ในต้นเดียวกันเวลาจุด (6 HPI) สารพิษ PirBvp แต่ไม่สารพิษ PirAvp ถูกตรวจพบในตับและสัญญาณทางจุลพยาธิวิทยาลักษณะของAHPND รวมทั้งลอกของเซลล์เยื่อบุผิวของ Hepatopancreatic ท่อได้เห็น ถึงแม้ว่าการศึกษาก่อนหน้านี้พบว่าทั้งสองส่วนประกอบของสารพิษไบนารี PirABvp เป็นสิ่งจำเป็นที่จะทำให้เกิดผลกระทบที่เป็นพิษผลในปัจจุบันของเรามีความสอดคล้องกับการศึกษาอื่นๆ ซึ่งได้แนะนำว่า PirBvp เพียงอย่างเดียวอาจจะเพียงพอที่จะทำให้เกิดความเสียหายของเซลล์ ต่อมาที่จุดเวลาที่เชื้อแบคทีเรียและ PirAvp และสารพิษที่ตรวจพบทั้งหมด PirBvp ถูกในตับ นอกจากนี้เรายังแสดงให้เห็นว่าสเปคโทรรามัน "ลายนิ้วมือทั้งชีวิต" ไม่สามารถที่จะแยกแยะความแตกต่างระหว่าง AHPND ที่ก่อให้เกิดและไม่ก่อให้เกิดสายพันธุ์ AHPND สุดท้ายโดยใช้ความเข้มข้นของการยับยั้งขั้นต่ำที่เราพบว่าทั้งสองโวลต์ความรุนแรงและไม่รุนแรง parahaemolyticus สายพันธุ์ที่มีความดื้อต่อยาปฏิชีวนะหลายชี้ให้เห็นว่าการใช้ยาปฏิชีวนะในการเลี้ยงกุ้งควรได้รับการควบคุมอย่างเคร่งครัดมากขึ้น