Ploidy determinationPloidy analysis

Ploidy determination

Ploidy analysis of yeast cells was performed using a flow cytometer. The yeast cells were grown to the logarithmic phase in YEPD medium and fixed with 70% (v/v) ethanol by the immersion fixation method for 1 h at room temperature. The cells were washed and resuspended in 50 mM sodium citrate buffer (pH 7.4) containing 1 mg/ml RNase for 1 h. Finally, the DNA was stained with propidium iodide (20 μg/ml) in 50 mM sodium citrate buffer at 4°C for 14 h. The fluorescence intensity was measured using a FACS Verse instrument (Becton Dickinson).

Results (Thai) 1:

พล็อยดีมุ่งมั่นพล็อยดีวิเคราะห์เซลล์ยีสต์ถูกดำเนินการโดยใช้ cytometer การไหล เซลล์ยีสต์ได้ปลูกระยะลอการิทึมใน YEPD และแก้ไขกับเอทานอล 70% (v/v) โดยวิธีตรึงแช่สำหรับ 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง ล้าง และ resuspended ใน 50 มม.โซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ (pH 7.4) เซลล์ที่ประกอบด้วย 1 mg/ml RNase สำหรับ 1 h ในที่สุด ดีเอ็นเอที่ถูกย้อม ด้วยไอโอไดด์ propidium (20 μ ml) ในบัฟเฟอร์โซเดียมซิเตรต 50 มม.ที่ 4° C สำหรับ 14 h ความเข้มเรืองแสงถูกวัดโดยใช้เครื่องมือข้อ FACS (Becton สัน)

Results (Thai) 2:

ความมุ่งมั่น ploidy

วิเคราะห์ ploidy ของเซลล์ยีสต์ถูกดำเนินการโดยใช้การไหล cytometer เซลล์ยีสต์ปลูกถึงช่วงลอการิทึมในสื่อ YEPD และคงมี 70% (v / v) เอทานอลโดยวิธีการแช่ตรึงเวลา 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง เซลล์ถูกล้างและ resuspended ในขนาด 50 มมบัฟเฟอร์โซเดียมซิเตรต (pH 7.4) ที่มี 1 mg / ml RNase เป็นเวลา 1 ชั่วโมง สุดท้าย DNA ถูกย้อมด้วยสี propidium ไอโอไดด์ (20 ไมโครกรัม / มล.) ในขนาด 50 มมบัฟเฟอร์โซเดียมซิเตรตที่ 4 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 14 ชั่วโมง ความเข้มของการเรืองแสงได้รับการวัดโดยใช้เครื่องมือมาซึ่ง Verse (Becton Dickinson)

Results (Thai) 3:

การกำหนดการวิเคราะห์การใช้เซลล์ยีสต์แสดงการใช้โมโน . เซลล์ยีสต์เติบโตขึ้นถึงระยะปานกลาง และ ลอการิทึมสุขถาวร 70 % ( v / v ) เอทานอล โดยการตรึงด้วยวิธีแช่ 1 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง เซลล์ที่ถูกล้างและ resuspended 50 มิลลิเมตรโซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ pH 7.4 ) ที่มีเลส 1 mg / ml เป็นเวลา 1 ชั่วโมงสุดท้าย ดีเอ็นเอ เปื้อน propidium ไอโอไดด์ ( 20 μ g / ml ) ใน 50 มิลลิเมตรโซเดียมซิเตรตบัฟเฟอร์ที่ 4 ° C เป็นเวลา 14 ชั่วโมง การใช้เครื่องมือวัดความเข้ม facs . ( เบคตอน Dickinson )