trijuga, Acacia catechu, A. arabica

trijuga, Acacia catechu, A. arabica, Zizyphus jujuba, Z.mauritiana, Grewia sp., etc. Albizzia
lebbeck, Schleicheia oleosa, S. trijuga, Accacia catechu, A. arabica, Zizyphus jujuba, Z. mauritiana,
Grewia sp., Ficus religiosa, Shorea talura, Butea monosperma, B. frondosa, etc.
Natural lac, procured by scrapping infected twigs, was melted, squeezed through a cloth
to obtain buttons. These was then dissolved in methanol and kept for 2 days. The thus obtained
clear solution was centrifuged at high speed for 20 min to allow settling of impurities,
if any. The clear supernatant was then poured into a porcelain evaporating dish and the
methanol was allowed to evaporate in open air for 2 days, whereby a crust of pure crystalline
lac was obtained on the evaporating dish. This was scrapped and used for the experiments.
Preparation of immobilized enzyme in reinforced lac
Purified lac (2.0 g) was dissolved in 5 ml of methanol. To this was added 1.0 g of urease
powder and the mixture was stirred continuously on a magnetic stirrer. Cloths squares (as
previously treated) were dipped into this mixture for 3–5 s and then allowed to dry and harden
for a day at room temperature. These films were then weighed to find the amount of trapped
enzyme. The enzyme in the washing was measured colorimetrically using the Lowry method22
to obtain the amount of bound enzyme using BSA as the standard.
Assay of native urease
For measurement of the urease activity, the ammonia liberated on incubating the enzyme
with urea for a fixed time was determined using Nessler’s reagent.19 One unit of urease activity
liberates 1.0 mol of ammonia per min from 0.10 M urea under standard assay conditions.
Assay of immobilized urease
The alginate beads (17 beads) with urease entrapped were taken in 1 ml phosphate buffer
(0.20 M, pH 7) solution and reacted with 1.0 ml of a 3 % urea solution for 15 min. The same
procedure was used to follow the reaction and the measurements were performed in the same
manner as for the native enzymes studies. Here the beads were removed before chilling the
solution and adding H2SO4 to stop the reaction.
One film of paraffin wax and lac were each taken in 1 ml phosphate buffer (0.20 M, pH
7) and reacted with 1.0 ml of a 3 % urea solution for 30 min. The same procedure was used to
follow the reaction and the measurements were performed as in the above-described experiment.
The films were taken out from the reaction mixture to stop the reaction. The experiments
were conducted in triplicate to confirm the reproducibility of the results.
Storage stability
For storage stability studies, the immobilized enzyme was kept at room temperature. The
activity was measured for a month. Fresh preparations of immobilized enzymes were taken as
controls for each assay. The enzyme immobilized on paraffin wax films was preserved in buffer,
distilled water and under dry condition while the enzyme entrapped in beads was preserved
in CaCl2 solution because wet beads gave better result than dry beads.
Thermal stability
To determine the optimal temperature up to which the immobilized enzyme can
withstand thermal stress, free and immobilized enzyme were suspended in phosphate buffer
(0.20 M, pH 7) and incubated at different temperatures (30 to 80 °C) for 30 min before the
activity was measured.
2010 Copyright (CC) SCS
Available

Results (Thai) 1:

trijuga, Acacia สีเสียด, อาราบิก้า, zi​​zyphus Jujuba, z.mauritiana, grewia sp. ฯลฯ Albizzia
lebbeck, schleicheia oleosa, s trijuga, accacia สีเสียด, อาราบิก้า, zi​​zyphus Jujuba, z mauritiana
grewia sp. ไทร religiosa, Shorea talura, Butea monosperma, b frondosa ฯลฯ
ธรรมชาติครั่งจัดหาโดยทิ้งกิ่งไม้ที่ติดเชื้อถูกละลายบีบผ่าน
ผ้าที่จะได้รับปุ่มเหล่านี้ก็เลือนหายไปแล้วในเมทานอลและเก็บไว้เป็นเวลา 2 วัน จึงได้แก้ปัญหาที่ชัดเจน
ถูกหมุนเหวี่ยงที่ความเร็วสูงนาน 20 นาทีเพื่อให้ตกตะกอนของสิ่งสกปรก
ถ้ามี สารละลายที่ชัดเจนถูกแล้วเทลงจานระเหยเมทานอลและพอร์ซเลน
ได้รับอนุญาตให้จางหายไปในที่โล่งเป็นเวลา 2 วันโดยเปลือกของผลึกบริสุทธิ์
ครั่งที่ได้รับบนจานระเหยนี้ถูกยกเลิกและใช้สำหรับการทดลอง. เตรียม
ของเอนไซม์ตรึงในเสริมครั่ง
บริสุทธิ์ครั่ง (2.0 กรัม) ถูกละลายใน 5 มล. ของเมทานอล นี้ถูกเพิ่มเข้ามา 1.0 กรัมของยูรีเอส
ผงและส่วนผสมที่ถูกกวนอย่างต่อเนื่องในเครื่องกวนแม่เหล็ก สี่เหลี่ยมผ้า (ตามที่ได้รับการรักษาก่อนหน้านี้
) ถูกจุ่มลงในส่วนผสมสำหรับ 3-5 นี้แล้วปล่อยให้แห้งและแข็ง
สำหรับวันที่อุณหภูมิห้อง ภาพยนตร์เหล่านี้ได้รับการชั่งน้ำหนักแล้วจะหาปริมาณของเอนไซม์
ติดกับดัก เอนไซม์ในการล้างวัด colorimetrically ใช้ The Lowry method22
ที่จะได้รับปริมาณของเอนไซม์ จำกัด การใช้ BSA เป็นมาตรฐาน. ทดสอบ
จากยูรีเอส
พื้นเมืองสำหรับการตรวจวัดของกิจกรรม urease แอมโมเนียมีอิสรเสรีเมื่อบ่มเอนไซม์
กับยูเรียสำหรับเวลาที่กำหนดถูกกำหนดโดยใช้ Nessler ของ reagent.19 หน่วยหนึ่งของกิจกรรมยูรีเอส
ปล่อยโมเลกุลของแอมโมเนีย 1.0 ต่อนาทีจากยูเรีย 0.10 เมตรภายใต้เงื่อนไขการทดสอบมาตรฐาน. ทดสอบ
จากยูรีเอสตรึง
เม็ดอัลจิเนต (17 เม็ด) กับยูรีเอส กักถูกพรากไปใน 1 มล. ฟอสเฟตบัฟเฟอร์
(0.20 เมตร, pH 7) การแก้ปัญหาและตอบสนองด้วย 1.0 มล. ของการแก้ปัญหาปุ๋ยยูเรีย 3% เป็นเวลา 15 นาที
เดียวกันขั้นตอนที่ถูกใช้ในการติดตามการเกิดปฏิกิริยาและการวัดที่ได้รับการดำเนินการในลักษณะ
เหมือนเช่นเดียวกับการศึกษาเอนไซม์พื้นเมือง ที่นี่ลูกปัดถูกถอดออกก่อนที่จะหนาว
โซลูชั่นและการเพิ่ม H2SO4 เพื่อหยุดปฏิกิริยา.
ภาพยนตร์ของพาราฟินและครั่งแต่ละคนดำเนินการใน 1 ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ มล. (0.20 ม. , ph
7) และปฏิกิริยากับ 1.0 ml ของ 3 โซลูชั่น% ยูเรียเป็นเวลา 30 นาทีขั้นตอนเดียวกันถูกใช้ในการปฏิบัติตาม
ปฏิกิริยาและการวัดได้ดำเนินการตามในการทดลองข้างต้นอธิบาย.
ภาพยนตร์ถูกนำออกมาจากส่วนผสมปฏิกิริยาที่จะหยุดการเกิดปฏิกิริยา
ทดลองดำเนินการในเพิ่มขึ้นสามเท่าเพื่อยืนยันความแม่นยำของผล.

เสถียรภาพการจัดเก็บข้อมูลสำหรับการศึกษาการเก็บรักษา, เอนไซม์ตรึงเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง
กิจกรรมที่วัดเป็นเวลาหนึ่งเดือน เตรียมสดของเอนไซม์ตรึงถูกนำมาเป็นตัวควบคุม
สำหรับทดสอบแต่ละ เอนไซม์ตรึงบนแผ่นฟิล์มพาราฟินถูกเก็บรักษาไว้ในบัฟเฟอร์น้ำกลั่น
และภายใต้เงื่อนไขที่แห้งในขณะที่เอนไซม์ที่เก็บกักในลูกปัดที่ได้รับการเก็บรักษาไว้
CaCl2 ในการแก้ปัญหาเพราะลูกปัดเปียก แต่ให้ผลที่ดีกว่าเม็ดแห้ง.

ทนความร้อนเพื่อกำหนดอุณหภูมิที่เหมาะสมซึ่งขึ้นอยู่กับเอนไซม์ตรึง
สามารถทนต่อความเครียดความร้อนฟรีและตรึงเอนไซม์ถูกแขวนในฟอสเฟตบัฟเฟอร์
(0.20 ม. , ph 7) และบ่มที่อุณหภูมิแตกต่างกัน (30 ถึง 80 ° C) เป็นเวลา 30 นาทีก่อนที่ กิจกรรม
วัด.
2010 SCS กระบอกสูบ (ซีซี)
ลิขสิทธิ์ใช้ได้

Results (Thai) 2:

trijuga สงเซีย อาราบิก้า A., Zizyphus jujuba, Z.mauritiana, Grewia sp. เป็นต้น Albizzia
lebbeck, Schleicheia oleosa, S. trijuga สง Accacia อ.อาราบิก้า Zizyphus jujuba, z. อินเดีย,
Grewia sp. ฟิคัส religiosa, talura ต้น Butea monosperma, frondosa เกิด ฯลฯ
ธรรมชาติลัค ค้นหาตามกิ่งไม้ติดไวรัส scrapping ถูกหลอม คั้นผ่านผ้า
รับปุ่ม เหล่านี้คือละลายในเมทานอล และเก็บไว้ 2 วัน ได้รับดังนั้น
ชัดเจนมี centrifuged โซลูชันที่ความเร็วสูงสำหรับ 20 นาทีเพื่อให้ตกตะกอนของสิ่งสกปรก,
ถ้ามีการ Supernatant ชัดเจนถูก poured แล้วเข้าไปในเครื่องเคลือบดินเผาระเหยจานและ
เมทานอลได้รับอนุญาตให้ระเหยในอากาศเปิด 2 วัน โดยเปลือกของบริสุทธิ์ผลึก
ลัคกล่าวบนจาน evaporating นี้เป็นเศษซาก และใช้สำหรับทดลอง
เตรียมเอนไซม์เอนไซม์ใน lac เสริม
Purified ลัค (2.0 g) ได้ละลายใน 5 ml ของเมทานอล นี้ถูกเพิ่ม 1.0 g ของยู
ผงและส่วนผสมที่กวนอย่างต่อเนื่องบนช้อนคนเป็นแม่เหล็ก เสื้อผ้าช่องสี่เหลี่ยม (เป็น
ก่อนหน้านี้ รักษา) จุ่มลงในส่วนผสมนี้สำหรับ 3–5 s และอนุญาตแล้ว จะแห้ง และเริ่ม
ในวันที่อุณหภูมิห้อง ภาพยนตร์เหล่านี้ได้ชั่งน้ำหนักแล้วหาจำนวนติด
เอนไซม์ เอนไซม์ในเครื่องซักผ้ามีวัด colorimetrically ใช้ Lowry method22
รับจำนวนผูกเอนไซม์ใช้บีเอสเอเป็นมาตรฐาน
วิเคราะห์ของเจ้ายู
สำหรับวัดกิจกรรมยู แอมโมเนียที่ liberated บน incubating เอนไซม์นี้
มียูเรียในเวลากำหนดโดยใช้ Nessler ของ reagent.19 หนึ่งหน่วยกิจกรรมยู
liberates 1.0 โมลของแอมโมเนียต่อนาทีจากยูเรีย 0.10 M ภายใต้เงื่อนไขการทดสอบมาตรฐานการ
วิเคราะห์ของเอนไซม์ยู
เม็ดแอลจิเนต (17 เม็ด) กับยูเก็บกักได้รับบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 1 ml
(0.20 M, pH 7) โซลูชั่น และปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นกับ 1.0 ml ของโซลูชั่นยูเรีย 3% สำหรับ 15 นาที เดียวกัน
ใช้ขั้นตอนตามปฏิกิริยา และดำเนินการประเมินเดียว
ลักษณะสำหรับศึกษาเอนไซม์ดั้งเดิม นี่ปัดออกก่อนหนาว
โซลูชันและกำมะถันเพื่อหยุดปฏิกิริยาการเพิ่ม
ฟิล์มหนึ่งของพาราฟินและลัคได้ละรับบัฟเฟอร์ฟอสเฟต 1 ml (0.20 M, pH
7) และปฏิกิริยาที่เกิดขึ้นกับ 1.0 ml ของโซลูชันยูเรีย 3% ใน 30 นาที กระบวนการเดียวกันถูกใช้
ตามปฏิกิริยา และดำเนินการประเมินในการอธิบายข้างต้นทดลอง
ภาพยนตร์ถูกนำออกมาจากส่วนผสมของปฏิกิริยาเพื่อหยุดปฏิกิริยาการ การทดลอง
ได้ดำเนินการใน triplicate เพื่อยืนยัน reproducibility ของผลลัพธ์
เสถียรภาพเก็บ
เก็บความมั่นคงศึกษา เอนไซม์เอนไซม์ถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง ใน
กิจกรรมที่วัดในเดือน เตรียมสดเอนไซม์เอนไซม์ที่ถ่ายเป็น
วิเคราะห์แต่ละการควบคุม เอนไซม์ที่ตรึงบนขี้ผึ้งพาราฟินฟิล์มถูกเก็บรักษาไว้ในบัฟเฟอร์,
กลั่นน้ำ และภายใต้เงื่อนไขแห้งในขณะที่เอนไซม์ที่เก็บกักในลูกปัดถูกรักษา
ใน CaCl2 โซลูชันเนื่องจากเม็ดฝนให้ดีทำกว่าลูกปัดแห้ง.
เสถียรภาพความร้อน
การกำหนดอุณหภูมิเหมาะสมขึ้นซึ่งเอนไซม์เอนไซม์สามารถ
ทนต่อความร้อนความเครียด ฟรี และเอนไซม์เอนไซม์ถูกหยุดชั่วคราวในฟอสเฟตบัฟเฟอร์
(0.20 M, pH 7) และ incubated ที่อุณหภูมิแตกต่างกัน (30-80 ° C) สำหรับ 30 นาทีก่อน
กิจกรรมที่วัด
2010 ลิขสิทธิ์ (CC) อันคุ้มค่า
มี

Results (Thai) 3:

trijuga ยางสีเสียดอราบิก้า A . zizyphus ไหน Z . mauritiana เป็นป่าไม้สักไม้ไผ่รวก sp .ฯลฯจามะรี
lebbeck schleicheia ตะกวดพังพอน. S . S . trijuga accacia สีเสียดอราบิก้า A . zizyphus ไหน Z . mauritiana
เป็นป่าไม้สักไม้ไผ่รวก sp .ไกรโดยเต็ง talura จอมทอง monosperma B . frondosa เป็นต้น
ทางธรรมชาติจ.ต.จัดหาโดยสัดส่วนกิ่งไม้ที่ติดเชื้อก็ละลายบีบผ่านผ้า
ซึ่งจะช่วยในการขอรับปุ่มเหล่านี้ก็คือเลิกในโรงงานเมธานอลและได้รับการดูแลรักษาให้อยู่ใน 2 วันแล้ว
ซึ่งจะช่วยทำให้ได้รับโซลูชันที่ชัดเจนเป็น centrifuged ที่ความเร็วสูงสำหรับผู้ใช้บริการ 20 นาทีเพื่ออนุญาตให้ทิ้งสิ่งสกปรก
ถ้ามี supernatant ใสที่เป็นเทลงในเครื่องลายครามที่ระเหยจานและ
โรงงานเมธานอลที่ได้รับอนุญาตให้ระเหยในแบบเปิดโล่งสำหรับ 2 วันซึ่งเปลือกที่บริสุทธิ์คริสตัลส
Lac ได้มาในจานระเหยแล้วโรงแรมแห่งนี้คือยกเลิกและใช้สำหรับการทดลองที่.
การเตรียมการของเอนไซม์อยู่จ.ต.
ซึ่งจะช่วยเสริมความแข็งแรงบริสุทธิ์จ.ต.( 2.0 G )เป็นละลายได้ใน 5 มล.ของโรงงานเมธานอล ในการนี้ถูกเพิ่ม 1.0 G ของผง urease
และส่วนผสมที่รุนแรงขึ้นอย่างต่อเนื่องบนเครื่องคนแม่เหล็ก จัตุรัสผ้า(ตาม
ก่อนหน้านี้ได้รับการปฏิบัติ)เป็นจุ่มลงในส่วนผสมนี้สำหรับ 3-5 3-5 3-5 S แล้วได้รับอนุญาตให้แห้งและสร้างความแข็งแกร่งให้
สำหรับวันที่ที่ อุณหภูมิ ห้อง ภาพยนตร์ เหล่านี้ก็ต้องชั่งน้ำหนักในการค้นหาจำนวนเงินที่ของทำให้ติดกับ
เอนไซม์แล้ว เอนไซม์ที่ล้างทำความสะอาดวัดได้ colorimetrically โดยใช้วิธีการที่ Lowry ' s 22
เพื่อขอรับเงินของเอนไซม์ผูกพันโดยใช้ BSA เป็นมาตรฐาน.
สอบของ urease พื้นเมือง
ซึ่งจะช่วยในการวัดของกิจกรรม urease ที่แอมโมเนียที่หลุดพ้นบนศูนย์บ่มเพาะเอนไซม์ที่
พร้อมด้วยยูเรียและปุ๋ยชนิดสำหรับกำหนดเวลาการใช้ nessler ของ reagent. 19 หนึ่งชุดของ urease กิจกรรม
liberates 1.0 Website : www . mol แอมโมเนียต่อนาทีจาก 0.10 ม.ยูเรียและปุ๋ยชนิดตามมาตรฐานสอบเงื่อนไข.
สอบของศักตรู urease alginate
ซึ่งจะช่วยให้ลูกปัด( 17 ลูกปัด)พร้อมด้วย urease entrapped มาใน 1 มล.ฟอสเฟตบัฟเฟอร์
( 0.20 ม., pH 7 )โซลูชันและปฏิกิริยากับ 1.0 มล. 3% ยูเรียและปุ๋ยชนิดโซลูชันสำหรับ 15 นาทีที่เดียวกัน
ตามขั้นตอนก็ใช้ในการทำตามการตอบสนองและการวัดที่ได้ดำเนินการในลักษณะเดียวกันกับ
ซึ่งจะช่วยให้การเรียนด้วยเอนไซม์ที่ได้ ลูกปัดที่นี่ได้ถูกลบออกก่อน)
และโซลูชันการเพิ่มชั่วโมง 2 ดังนั้น 4 เพื่อหยุดปฏิกิริยา.
หนึ่ง ภาพยนตร์ ของน้ำมันก๊าดและหุ่นขี้ผึ้งจ.ต.แต่ละคนใน 1 มล.ฟอสเฟต Buffer ( 0.20 ม., pH
7 )และปฏิกิริยากับ 1.0 มล. 3% ยูเรียและปุ๋ยชนิดโซลูชันสำหรับ 30 นาทีตามขั้นตอนเดียวกันนี้มีใช้
ซึ่งจะช่วยในการทำตามการตอบสนองและการวัดที่ได้ดำเนินการในการทดลองดังกล่าวข้างต้นที่อธิบาย.
ภาพยนตร์ ที่ถูกนำออกไปจากการผสมผสานกันระหว่างปฏิกริยาที่เพื่อหยุดการตอบสนอง การทดลองที่
ซึ่งจะช่วยได้ทำในเป็นสามเพื่อยืนยันผลิตซ้ำผลการ.ความมั่นคง

ซึ่งจะช่วยให้การจัดเก็บเพื่อการศึกษาการจัดเก็บข้อมูล เสถียรภาพ เอนไซม์ศักตรูที่มีอยู่ที่ อุณหภูมิ ห้อง ที่
ตามมาตรฐานการทำงานของวัดได้เป็นเดือน การเตรียมตัวสดใหม่ของเอ็นไซม์ศักตรูมาเป็น
ซึ่งจะช่วยการควบคุมสำหรับสอบแต่ละครั้ง ที่ศักตรูเอนไซม์ในน้ำมันก๊าดหุ่นขี้ผึ้ง ภาพยนตร์ เป็นการสงวนรักษาอย่างดีเยี่ยมในบัฟเฟอร์,
น้ำกลั่นและอยู่ ภายใต้ สภาพ แห้งในขณะที่เอนไซม์ entrapped ในลูกปัดเป็นได้รับการสงวนรักษาอย่างดีเยี่ยม
ใน cacl 2 โซลูชันเนื่องจากเปียกน้ำลูกปัดให้ดีขึ้นส่งผลให้แห้งกว่าลูกปัด.

ระบายความร้อนความมั่นคงในการตรวจสอบที่ได้ผลดีที่สุด อุณหภูมิ สูงสุดที่ศักตรูเอนไซม์สามารถทนต่อความร้อน
ซึ่งจะช่วยผ่อนคลายความตึงเครียด,แบบไม่เสียค่าบริการและศักตรูเอนไซม์ได้ถูกระงับชั่วคราวในฟอสเฟตบัฟเฟอร์
( 0.20 ม., pH 7 )และ incubated อุณหภูมิ ที่แตกต่างกัน( 30 ถึง 80 ° C )สำหรับ 30 นาทีก่อนที่
ซึ่งจะช่วยการทำงานของวัดได้.
2010 ลิขสิทธิ์(สำเนาถึง) Keio University , Tokyo , Japan
ซึ่งจะช่วยจัดให้บริการ