SSF was performed in a 12 L rotatin

SSF was performed in a 12 L rotating drum type bioreactor,
Terrafor (Infors HT, Switzerland). Approximately, 3 kg of rehy-drated AP (moisture 75%, v/w) was sterilized in autoclave at
121 ± 1
◦
C for 30 min and was transferred into the sterilized biore-actor under aseptic condition. After transferring the substrate into
the bioreactor, the sterilization was done again to ensure com-plete decontamination. The 3 different set of experiments were
performed as follows: (1) control without any inducer and; (2)
supplemented with 3% (v/w) of inducer, ethanol (EtOH) and; (3)
supplemented with 3% (v/w) of methanol (MeOH) as an inducer.
The initial pH (3.5 ± 0.1) was taken as such without any adjust-ment. The inoculation was carried out using the spore suspension
having 1 × 10
7
spores/g AP. For final moisture content of 75% (v/w),
the volume of inducers and spore suspension was also taken into
account. The fermentation was carried out in a controlled environ-ment at 30 ± 1
◦
C with intermittent agitation rate of 2 rpm (for 1 h
after every 12 h) and aeration rate of 1 vvm. The fermentation was
carried out till 144 h, and under aseptic conditions samples were
harvested every 24 h for CA and total spore count analysis. CA was
extracted from 1 g of a fermented sample macerated with 15 mL
of distilled water and shaken at 200 rpm for 20 min in an incu-bator shaker at 25 ± 1
◦
C. Supernatant was filtered through glass
wool and 100 L sample was taken in Eppendorf tubes for viability
(total spore count) assay using haemocytometer and the remaining
sample was again centrifuged (Sorvall RC 5C plus by Equi-Lab Inc.,
Québec, Canada) at 9000 × g for 20 min and the clear supernatant
was analyzed for CA concentration.

Results (Thai) 1:

ทำใน L 12 ที่หมุนกลองชนิด bioreactor, SSFTerrafor (Infors เอชที สวิตเซอร์แลนด์) Rehy drated AP ประมาณ 3 กิโลกรัม (ความชื้น 75%, v/w) คือ sterilized ในด้วยที่121 ± 1◦C ใน 30 นาที และมีการโอนย้ายเป็น biore-นัก sterilized ภายใต้เงื่อนไขที่เข้มข้นขึ้น หลังจากถ่ายโอนพื้นผิวเป็นbioreactor ฆ่าเชื้อในครั้งหลังอีกให้ decontamination com plete มี 3 ชุดที่แตกต่างของการทดลองปฏิบัติดังนี้: (1) ควบคุม โดย inducer ใด ๆ และ (2)เสริม ด้วย 3% (v/w) ของ inducer เอทานอล (EtOH) และ (3)เสริม ด้วย 3% (v/w) ของเมทานอ) เป็น inducer ที่PH เริ่มต้น (3.5 ± 0.1) ถูกนำเช่นไม่ มีการปรับติดขัด ทำ inoculation ที่ออกใช้ระงับสปอร์มี 1 × 107เพาะ เฟิร์น/g AP ความชื้นสุดท้ายเนื้อหาของ 75% (v/w),ปริมาณ inducers และระงับสปอร์ยังถูกนำไปบัญชี หมักได้ดำเนินการในการควบคุม environ-ติดขัดที่ 30 ± 1◦C ด้วยอัตราอาการกังวลต่อการขาดตอนของ 2 รอบต่อนาที (สำหรับ 1 hหลังจากทุก h 12) และ aeration 1 vvm อัตรา หมักได้ดำเนินการจน ถึง 144 h และภาย ใต้เงื่อนไขที่เข้มข้นตัวอย่างดีเก็บเกี่ยวทุก 24 ชมสำหรับ CA และสปอร์รวมนับวิเคราะห์ มี CAสกัดจาก g 1 ของตัวอย่างร้า macerated มี 15 mLของน้ำกลั่น และเขย่าที่ 200 รอบต่อนาทีสำหรับ 20 นาทีในการเชคเกอร์ incu-อูลานบาตอร์ที่ 25 ± 1◦C. Supernatant ถูกกรองผ่านแก้วตัวอย่างผ้าขนสัตว์และ 100 L ถ่ายหลอด Eppendorf สำหรับชีวิตวิเคราะห์ (สปอร์รวมจำนวน) ใช้ haemocytometer และเหลือตัวอย่างมีอีก centrifuged (Sorvall RC 5C บวก โดยแล็บ Equi Inc.Québec แคนาดา) ที่ 9000 × g 20 นาทีและ supernatant ชัดเจนมีวิเคราะห์ความเข้มข้นของ CA

Results (Thai) 2:

SSF ได้รับการดำเนินการใน 12 L หมุนกลองชนิดเครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ,
Terrafor (Infors HT, วิตเซอร์แลนด์) ประมาณ 3 กิโลกรัม rehy-drated AP (ความชื้น 75%, v / w) ได้รับการฆ่าเชื้อในหม้อนึ่งความดันที่
121 ± 1
◦
C เป็นเวลา 30 นาทีและถูกย้ายไปฆ่าเชื้อ biore นักแสดงภายใต้สภาพปลอดเชื้อ หลังจากการถ่ายโอนสารตั้งต้นเป็น
เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ, การฆ่าเชื้อได้ทำอีกครั้งเพื่อให้แน่ใจว่าการปนเปื้อน com-เสร็จ ชุดที่แตกต่างกัน 3 ของการทดลองได้รับการ
ดำเนินการดังต่อไปนี้ (1) การควบคุมโดยไม่ต้องชักนำและใด ๆ (2)
เสริมด้วย 3% (V / w) ของชักนำเอทานอล (เอทานอล) และ; (3)
เสริมด้วย 3% (V / w) ของเมทานอล (เมธานอล) เป็นสารชักนำ.
pH เริ่มต้น (3.5 ± 0.1) ถูกนำมาเป็นเช่นนี้โดยไม่ต้องมีการปรับ-ment การฉีดวัคซีนได้รับการดำเนินการโดยใช้สปอร์แขวนลอย
มี 1 × 10
7
สปอร์ / กรัม AP สำหรับความชื้นสุดท้าย 75% (v / W),
ปริมาณของปฏิกิริยาและสปอร์แขวนลอยถูกนำเข้าไปใน
บัญชี หมักได้ดำเนินการในสภาพแวดล้อม-ment ควบคุมวันที่ 30 ± 1
◦
C ที่มีอัตราการกวนต่อเนื่อง 2 รอบต่อนาที (เวลา 1 ชั่วโมง
หลังจากที่ทุก ๆ 12 ชั่วโมง) และอัตราการให้อากาศ 1 Vvm หมักได้รับการ
ดำเนินการจนถึง 144 ชั่วโมงและภายใต้เงื่อนไขที่ปลอดเชื้อตัวอย่างถูก
เก็บเกี่ยวทุก 24 ชั่วโมงสำหรับ CA และการวิเคราะห์นับสปอร์ทั้งหมด CA ถูก
สกัดจาก 1 กรัมตัวอย่างหมักหมักกับ 15 มิลลิลิตร
ของน้ำกลั่นและเขย่าที่ 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีในเครื่องปั่น incu อูลานบาตอร์ที่ 25 ± 1
◦
C. ใสถูกกรองผ่านกระจก
ขนสัตว์และ 100 ตัวอย่าง L ถูกนำหลอด Eppendorf สำหรับการมีชีวิต
(นับรวมสปอร์) ในการตรวจโดยใช้สไลด์นับเม็ดเลือดและที่เหลืออีก
ตัวอย่างปั่นอีกครั้ง (Sorvall RC 5C บวกโดย Equi-Lab อิงค์
ควิเบก, แคนาดา) ที่ 9000 ×กรัมเป็นเวลา 20 นาทีและใสชัดเจน
ถูกวิเคราะห์ความเข้มข้นของ CA

Results (Thai) 3:

SSF แสดงใน 12 ลิตรกลองหมุนชนิด (
, terrafor ( infors HT , สวิตเซอร์แลนด์ ) ประมาณ 3 กิโลกรัม rehy drated AP ( ความชื้น 75% v / W ) ฆ่าเชื้อในหม้อฆ่าเชื้อที่ 121 ±
1
◦
C นาน 30 นาที และถูกโอนย้ายเข้าไปฆ่าเชื้อบีโอเรนักแสดงภายใต้สภาพปลอดเชื้อ หลังจากที่ย้ายเข้าไปในเครื่อง (
,การทำอีกครั้งเพื่อให้แน่ใจว่า Com plete สารพิษ . ชุดการทดลองที่แตกต่างกัน 3
ดำเนินการดังนี้ ( 1 ) ควบคุมโดยปราศจากเอนไซม์ และ ( 2 ) เสริมด้วย
3 % ( v / w ) ของเอนไซม์ เอทานอล ( แอลกอฮอล์ ) และ ( 3 ) เสริมด้วย
3 % ( v / w ) ของเมทานอล ( เมทิลแอลกอฮอล์ ) เป็นเอนไซม์ .
pH เริ่มต้น ( 3.5 ± 0.1 ) ถ่าย เช่น โดยไม่ต้องปรับ mentวัคซีนมีการใช้สปอร์แขวนลอยมี 1 × 10


7 G สปอร์ / AP ความชื้นสุดท้ายของ 75 % ( v / w )
ปริมาณการใช้และช่วงล่างสปอร์ถูกลง
บัญชี การหมักได้ดําเนินการในการควบคุม environ ment ที่ 30 ± 1

◦องศาเซลเซียสอัตราการกวนต่อเนื่อง 2 รอบ ( 1 H
หลังจากที่ทุก 12 ชั่วโมง ) และการให้อากาศ อัตรา 1 . การหมักคือ
ดำเนินการจนถึง 144 ชั่วโมง และภายใต้สภาพปลอดเชื้อจำนวน
เก็บเกี่ยวทุก 24 ชั่วโมงสำหรับ CA และการวิเคราะห์นับสปอร์ทั้งหมด CA เป็น
สกัดจาก 1 กรัม หมักกับตัวอย่าง macerated 15 ml
ของน้ำกลั่นและเขย่าที่ความเร็วรอบ 200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 20 นาทีใน incu bator shaker ที่ 25 ± 1

C ◦สูงถูกกรองผ่านใยแก้ว
และ 100  l ตัวอย่างเกิดขึ้นในท่อเพื่อความมีชีวิต
เพนดอร์ฟ( นับรวมการทดสอบ และการสร้างสปอร์ ) haemocytometer ตัวอย่างที่เหลือ
อีกครั้ง ( sorvall RC ไฟฟ้า 5C Plus โดย equi แล็บอิงค์
คูจาก BEC , แคนาดา ) ที่ 9 × G สำหรับ 20 นาทีและล้าง
น่านใช้ CA ความเข้มข้น