Peroxisomes import their luminal pr

Peroxisomes import their luminal proteins from the cytosol. Most substrates contain a C-terminal Ser-Lys-Leu (SKL) sequence that is recognized by the receptor Pex5. Pex5 binds to peroxisomes via a docking complex containing Pex14, and recycles back into the cytosol following its mono-ubiquitination at a conserved Cys residue. The mechanism of peroxisome protein import remains incompletely understood. Here, we developed an in vitro import system based on Xenopus egg extracts. Import is dependent on the SKL motif in the substrate and on the presence of Pex5 and Pex14, and is sustained by ATP hydrolysis. A protein lacking an SKL sequence can be coimported, providing strong evidence for import of a folded protein. The conserved cysteine in Pex5 is not essential for import or to clear import sites for subsequent rounds of translocation. This new in vitro assay will be useful for further dissecting the mechanism of peroxisome protein import.

Results (Thai) 1:

peroxisomes นำเข้าโปรตีน luminal ของพวกเขาจากเซลล์ พื้นผิวส่วนใหญ่มีลำดับขั้ว c-Ser-Lys-Leu (SKL) ที่เป็นที่ยอมรับโดย Pex5 ตัวรับ ผูก Pex5 เพื่อ peroxisomes ผ่านทางเชื่อมต่อซับซ้อนที่มี Pex14 และรีไซเคิลกลับเข้าไปในเซลล์ต่อไปนี้ของโมโน ubiquitination ที่อนุรักษ์ Cys ตกค้าง กลไกของซากนำเข้าโปรตีน peroxisome เข้าใจไม่สมบูรณ์ ที่นี่เราพัฒนาในหลอดทดลองนำเข้าระบบขึ้นอยู่กับสารสกัดจากไข่ Xenopus นำเข้าจะขึ้นอยู่กับบรรทัดฐาน SKL ในพื้นผิวและการปรากฏตัวของ Pex5 และ Pex14 และยั่งยืนโดยเอทีพีจองจำ โปรตีนขาดลำดับ SKL สามารถ coimported มีหลักฐานที่แข็งแกร่งสำหรับการนำเข้าของโปรตีนพับ cysteine ​​ป่าสงวนใน Pex5 ไม่จำเป็นสำหรับการนำเข้าหรือนำเข้าเว็บไซต์ที่ชัดเจนสำหรับรอบที่ตามมาของการโยกย้าย

Results (Thai) 2:

Peroxisomes นำเข้าโปรตีนของพวกเขาจาก cytosol พื้นผิวส่วนใหญ่ประกอบด้วยลำดับ C-ขั้ว Ser-Lys-Leu (SKL) ที่รับรู้โดย Pex5 รับ Pex5 ผูกกับ peroxisomes ผ่านการเชื่อมต่อที่มีความซับซ้อนที่มี Pex14 และรีไซเคิลกลับเข้าไปในไซโตซอลหลังจากที่ตกค้างในที่ที่มีการทำงานของ cys กลไกของการนำเข้าโปรตีน peroxisome ยังคงเข้าใจอย่างสมบูรณ์. ที่นี่, เราได้พัฒนาระบบนำเข้าหลอดทดลองขึ้นอยู่กับสารสกัดจากไข่ Xenopus. นำเข้าขึ้นอยู่กับลาย SKL ในพื้นผิวและในการปรากฏตัวของ Pex5 และ Pex14, และได้รับการสนับสนุนโดยการย่อย ATP. โปรตีนขาดลำดับ SKL สามารถนำเข้า, ให้หลักฐานที่แข็งแกร่งสำหรับการนำเข้าโปรตีนพับ. ความไม่จำเป็นสำหรับการนำเข้าหรือล้างเว็บไซต์นำเข้าสำหรับรอบที่ตามมาของ translocation ที่ได้รับการสงวนไว้ใน Pex5 ใหม่นี้ในการทดสอบหลอดทดลองจะเป็นประโยชน์สำหรับ dissecting เพิ่มเติมกลไกของการนำเข้าโปรตีน peroxisome.

Results (Thai) 3:

เปอร์ออกไซด์วัตถุประสงค์เพื่อแนะนำโปรตีนจากเซลล์โซล พื้นผิวส่วนใหญ่ประกอบด้วยลำดับของ Ser Lys-Lea ที่ระบุโดยตัวรับ Pex5 pex5 ผูกพันกับก้นที่ซับซ้อนที่มี pex14 และรีไซเคิลไซโตปลาสซึมที่อนุรักษ์นิยม CYS ตกค้าง กลไกของการใช้โปรตีน peroxidase ยังไม่ชัดเจน ที่นี่เราได้พัฒนาระบบการใช้สารสกัดจากไข่ของคางคก การนำเข้าขึ้นอยู่กับการปรากฏตัวของ SKL ฐานลำดับและ pex5 pex14 ในพื้นผิวและรักษาโดย ATP การย่อยสลาย โปรตีนที่ขาด SKL ลำดับสามารถนำเข้าร่วมกันให้หลักฐานที่แข็งแกร่งสำหรับการนำเข้าโปรตีนพับ อนุรักษ์นิยมซิสเตอีนใน Pex5 ไม่ได้สำคัญในการนำเข้าหรือลบเว็บไซต์นำเข้าสำหรับการติดตาม การทดลองใหม่นี้จะเป็นประโยชน์สำหรับการวิเคราะห์เพิ่มเติมเกี่ยวกับกลไกของการใช้โปรตีนเปอร์ออกไซด์