Molecular beacons are specialprobes

Molecular beacons are special
probes that form stem-and-loop (hairpin) structures in solution, where both ends of each probe
are labeled with a “quencher” chromphore and a
“reporter” fluorochrome. In the absence of the target amplicons, the hairpin structure of the probes
brings the quencher chromophore and reporter
fluorochrome in close proximity, resulting in the
quenching of the fluorescence of the reporter fluorochrome. In the presence of the target amplicon,
the probe binds to its complementary sequence
on the amplicon, separating the quencher and
reporter and causing the restoration of the reporter’s
fluorescence, which is then measured to quantify
the amount of target amplicons in the sample.
A similar concept is applied in the hydrolysis
probes method, where the probes contain a reporter fluorochrome at their 5 ′end whose
fluorescence is quenched by a quencher chromophore at their 3 ′end. The probe hybridizes to its
target sequence in the annealing step of RT-PCR,
and then during the elongation step a special
DNA polymerase hydrolyzes and displaces the
probe, separating the quencher from the reporter.
This leads to the restoration of the fluorescence
of the reporter fluorochrome and the detection
of the target amplicons [7 ,25 ]. A schematic representation of detection using hybridization
probes and hydrolysis (Taqman® ) probes is
depicted in Fig.5.2

Results (Vietnamese) 1:

Đèn hiệu phân tử đang đặc biệtđầu dò mẫu thân cây-và-vòng lặp (mũ) cấu trúc trong dung dịch, nơi cả hai kết thúc của mỗi tàu thăm dòđược gắn nhãn với một chromphore "quencher" và một"phóng viên" fluorochrome. Trong sự vắng mặt của amplicons mục tiêu, cấu trúc mũ của các đầu dòmang đến cho quencher đôi và phóng viênfluorochrome gần, kết quả là cácmôi của huỳnh quang phóng viên fluorochrome. Sự hiện diện của amplicon mục tiêu,thăm dò liên kết với trình tự bổ sungNgày amplicon, tách quencher vàphóng viên và gây ra sự phục hồi của các phóng viênhuỳnh quang, mà sau đó được đo để định lượngsố lượng mục tiêu amplicons trong mẫu.Một khái niệm tương tự được áp dụng trong thủy phânCác đầu dò dạng phương pháp, nơi các đầu dò có chứa một phóng viên, tại của họ ′end 5 fluorochrome màhuỳnh quang quenched bởi đôi quencher tại của họ ′end 3. Các thăm dò hybridizes đến của nómục tiêu thứ tự trong bước tôi của RT-PCR,và sau đó, trong thời gian kéo dài bước đặc biệtDNA polymerase hydrolyzes và displaces cácthăm dò, tách quencher từ các phóng viên.Điều này dẫn đến sự phục hồi của huỳnh quangphóng viên fluorochrome và phát hiệncủa các amplicons mục tiêu [7, 25]. Một đại diện sơ phát hiện bằng cách sử dụng lai ghépđầu dò và thủy phân (Taqman®) đầu dò làđược mô tả trong Fig.5.2

Results (Vietnamese) 2:

Đèn hiệu phân tử đặc biệt là
máy dò có hình gốc và vòng lặp (kẹp tóc) cấu trúc trong giải pháp, nơi cả hai đầu của mỗi đầu dò
được dán nhãn với một "đồ uống" chromphore và một
"phóng viên" fluorochrome. Trong sự vắng mặt của các amplicon mục tiêu, cấu trúc kẹp tóc của các tàu thăm dò
mang mang màu đồ uống và phóng
fluorochrome gần, dẫn đến
dập tắt huỳnh quang của fluorochrome phóng viên. Trong sự hiện diện của các amplicon mục tiêu,
các đầu dò gắn với trình tự bổ trợ của nó
trên amplicon, tách đồ uống và
phóng viên và gây ra sự phục hồi của phóng viên
huỳnh quang, sau đó được đo để định lượng
số lượng amplicon mục tiêu trong mẫu.
Một tương tự khái niệm này được áp dụng trong quá trình thủy phân
phương pháp thăm dò, nơi các đầu dò có chứa một fluorochrome phóng viên tại mình 5 'cuối mà
huỳnh quang được dập tắt bởi một nhóm mang màu đồ uống tại 3 của họ kết thúc. Các thăm dò hybridizes để nó
tự đích trong bước ủ của RT-PCR,
và sau đó trong thời gian kéo dài bước một đặc biệt
DNA polymerase thủy phân và chiếm chỗ của các
đầu dò, tách đồ uống từ các phóng viên.
Điều này dẫn đến sự phục hồi của sự phát huỳnh quang
của các phóng viên fluorochrome và phát hiện
các mục tiêu amplicon [7, 25]. Một biểu đồ phát hiện sử dụng lai
đầu dò và thủy phân (Taqman®) đầu dò được
mô tả trong Fig.5.2