2. Methods2.1. Isolation and select

2. Methods
2.1. Isolation and selection of thermotolerant yeast strains
Yeasts were isolated from soil and water samples from sugar cane plantations and sugar factories in four provinces, namely Phra Nakhon Si Ayutthaya, Ratchaburi, Suphanburi and Uthaithani, Thailand. Isolation was carried out at 35 ºC by an enrichment technique using sugar juice media containing sugar cane juice (5% or 8% total sugars), 0.05% (NH4)2SO4 and 4% (v/v) ethanol and with (pH 4.5) and without pH adjustment (pH 3.8). After inoculation, cultures were incubated for 3 days in a rotary shaker (Gallenkamp Orbital Incubator, Leicester, UK) at a predetermined temperature with shaking speed of 170 rpm. Enriched cultures were then streaked on agar plates containing the same medium and inoculated at 35 ºC. Purified yeast cultures were kept on YPD agar slants (1% yeast extract, 2% peptone, 2% glucose and 2% agar)
and stored at 8 ºC. Thermotolerant yeast strains were selected based on their growth performances at 40 and 45 ºC in sugar cane juice broth containing 8% total sugars and 0.05% (NH4) 2SO4 and supplemented with 4% (v/v) ethanol. Successful cultures were collected and screened further for their ethanol production efficiency at elevated temperature.

Results (Thai) 1:

2. วิธี2.1. การแยกและการเลือกสายพันธุ์ยีสต์ thermotolerant ยีสต์ที่แยกได้จากตัวอย่างดินและน้ำจากไร่อ้อยและโรงงานน้ำตาลในจังหวัด ได้แก่พระนครศรีอยุธยา ราชบุรี สุพรรณบุรี และอุทัยธานี ประเทศไทย แยกดำเนินการที่ 35 ºC โดยเทคนิคการตกแต่งที่ใช้สื่อน้ำน้ำตาลน้ำอ้อย (5% หรือ 8% รวมน้ำตาล), 0.05% (NH4) 2SO4 และเอทานอล 4% (v/v) และ มี (pH 4.5) และไม่ มีการปรับค่า pH (pH 3.8) หลังจากกักบริเวณ วัฒนธรรมที่ได้รับการกก 3 วันในการปั่นโรตารี่ (ตู้อบวง Gallenkamp เลสเตอร์ สหราชอาณาจักร) ที่อุณหภูมิที่กำหนดด้วยการสั่นที่ความเร็ว 170 rpm อุดมด้วยวัฒนธรรมแล้วลายบนแผ่นวุ้นที่ประกอบด้วยตัวกลางเดียวกัน และ inoculated ที่ 35 ºC วัฒนธรรมยีสต์บริสุทธิ์ถูกเก็บไว้บน YPD วุ้น slants (สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% peptone กลูโคส 2% และ 2% วุ้น)และเก็บไว้ที่ 8 ºC สายพันธุ์ยีสต์ Thermotolerant ถูกเลือกอิงแสดงการเจริญเติบโตของพวกเขาที่ 40 และ 45 ºC ในซุปน้ำอ้อยที่ประกอบด้วยน้ำตาลรวม 8% และ 0.05% (NH4) 2SO4 และเสริม ด้วยเอทานอล 4% (v/v) รวบรวม และคัดกรองวัฒนธรรมประสบความสำเร็จเพิ่มเติมสำหรับประสิทธิภาพของการผลิตเอทานอลที่อุณหภูมิสูง

Results (Thai) 2:

2. วิธีการ
2.1 การแยกและการเลือกของยีสต์ทนร้อนสายพันธุ์
ยีสต์ที่แยกได้จากตัวอย่างดินและน้ำจากพื้นที่เพาะปลูกอ้อยและโรงงานน้ำตาลในสี่จังหวัดคือจังหวัดพระนครศรีอยุธยาราชบุรีสุพรรณบุรีและอุทัยธานี, ไทย แยกได้ดำเนินการที่ 35 องศาเซลเซียสโดยใช้เทคนิคการเพิ่มปริมาณการใช้สื่อน้ำผลไม้น้ำตาลมีน้ำอ้อย (5% หรือ 8% น้ำตาลทั้งหมด) 0.05% (NH4) 2SO4 และ 4% (v / v) เอทานอลและ (pH 4.5) และโดยไม่ต้องปรับค่าพีเอช (pH 3.8) หลังจากฉีดวัคซีนวัฒนธรรมถูกบ่มเป็นเวลา 3 วันในเครื่องปั่นแบบหมุน (Gallenkamp วง Incubator, เลสเตอร์, สหราชอาณาจักร) ที่อุณหภูมิที่กำหนดไว้ด้วยความเร็วเขย่า 170 รอบต่อนาที วัฒนธรรมที่อุดมอยู่แล้วลายบนจานอาหารเลี้ยงเชื้อที่มีขนาดกลางเดียวกันและเชื้อที่ 35 องศาเซลเซียส บริสุทธิ์วัฒนธรรมยีสต์ถูกเก็บไว้ใน slants YPD วุ้น (สารสกัดจากยีสต์ 1%, 2% เปปโตนกลูโคส 2% และ 2% วุ้น)
และเก็บไว้ที่ 8 องศาเซลเซียส สายพันธุ์ยีสต์ทนร้อนที่ได้รับการคัดเลือกขึ้นอยู่กับการเจริญเติบโตของพวกเขาที่ 40 และ 45 องศาเซลเซียสในอ้อยน้ำซุปน้ำผลไม้ที่มีน้ำตาลทั้งหมด 8% และ 0.05% (NH4) 2SO4 และเสริมด้วย 4% (v / v) เอทานอล วัฒนธรรมที่ประสบความสำเร็จถูกเก็บรวบรวมและคัดเลือกต่อไปสำหรับประสิทธิภาพการผลิตเอทานอลของพวกเขาที่อุณหภูมิสูง

Results (Thai) 3:

2 . วิธีการ2.1 . การแยกและคัดเลือกสายพันธุ์ยีสต์ทนยีสต์ที่แยกได้จากตัวอย่างดินและน้ำจากอ้อย ไร่ โรงงาน น้ำตาล ใน 4 จังหวัด คือ พระนครศรีอยุธยา ราชบุรี สุพรรณบุรี และอุทัยธานี , ไทย การกระทำที่ 35 º C โดยการใช้สื่อที่มีเทคนิคน้ำตาลอ้อยคั้นน้ำ ( 5% หรือ 8% total sugars ) 0.05 % ( NH4 ) 2so4 และ 4 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) และเอทานอล ( pH 4.5 ) และไม่มีการปรับ pH ( pH 3.8 ) หลังจากที่ได้รับวัฒนธรรมที่ถูกบ่มเป็นเวลา 3 วันในเครื่องปั่น Rotary ( gallenkamp โคจรฟักไข่ เลสเตอร์ , อังกฤษ ) ที่กำหนดไว้ที่อุณหภูมิกับเขย่าที่ความเร็ว 170 รอบต่อนาที ผสานวัฒนธรรม แล้วลายบนแผ่นวุ้นที่มีสื่อเดียวกัน และเชื้อยีสต์ที่ 35 º C บริสุทธิ์วัฒนธรรมไว้ใน ypd วุ้น slants ( กลูโคส 2 % สารสกัดจากยีสต์ 1 % 2 % ตามลำดับ และ 2 % Agar )ที่เก็บรักษาที่อุณหภูมิ 8 º C สารยีสต์สายพันธุ์ที่ใช้ในการเจริญเติบโตของพวกเขาแสดงที่ 40 และ 45 º C ในน้ำอ้อยอาหารที่มี 8 % total sugars และ 0.05 % ( NH4 ) 2so4 และเสริมด้วย 4 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) เอทานอล วัฒนธรรมความสำเร็จการเก็บรวบรวมและคัดกรองเพิ่มเติมเพื่อประสิทธิภาพการผลิตเอทานอลที่อุณหภูมิสูง