Leishmaniasis, a neglected tropical

Leishmaniasis, a neglected tropical disease (NTD) causes major health problems in the tropical and subtropical world. Most of the antileishmanial modern therapies with different formulations of pentavalent antimonials, Miltefosine, Amphotericin B etc. are not satisfactory in recent times due to high toxicity to the host and present rising strain resistance issues. So there is an urgent need to develop new, safe and cost-effective drugs against leishmaniasis. In this regard, bioactive phytocomponents may lead to the discovery of new medicines with appropriate efficiency. The prominent roles played by Leishmania proteases in the virulence of this parasite make them very promising targets for the development of current therapeutics of leishmaniasis. As part of a search for novel drugs, we have evaluated in vitro anti-leishmanial activity of serine protease inhibitor rich fraction (PTEx) obtained from potato tuber. The extract (PTEx) was prepared by sodium bisulfite fractionation and inhibitors were identified by reverse zymography. Inhibition study of PTEx in gelatin-zymogram and spectrophotometric assay using BApNA and BTpNA as substrate reveal its strong inhibitory activity against trypsin as well as serine proteases present in cell lysate of Leishmania donovani infective strain. The in vitro MTT based colorimetric assay as well as ex vivo L. donovani infected macrophages showed reduced parasite viability and intracellular parasite load with IC50 = 312.5 ± 0.1 μg/ml and IC50 82.3 ± 0.2 μg/ml of PTEx respectively in a concentration dependent manner. This anti-leishmanial effect was also preceded by PTEx induced acute formation of ROS and prolonged NO generation. The PTEx has no significant cytotoxic effect on host macrophages. So taken together, these findings indicate that PTEx has promising leishmanicidal effect and thus this study provides a new perspective of natural serine protease inhibitor from potato tuber on the development of new drug against leishmaniasis.

Results (Thai) 2:

leishmaniasis เป็นโรคเขตร้อนที่ถูกทอดทิ้ง (NTD) ทำให้เกิดปัญหาสุขภาพที่สำคัญในโลกร้อนและเขตอบอุ่น ส่วนใหญ่ของการรักษาที่ทันสมัย​​ antileishmanial กับสูตรที่แตกต่างกันของ antimonials pentavalent, Miltefosine, Amphotericin B ฯลฯ ไม่น่าพอใจในช่วงเวลาที่ผ่านมาเนื่องจากความเป็นพิษสูงไปยังโฮสต์และปัจจุบันเพิ่มขึ้นปัญหาต้านทานความเครียด จึงมีความจำเป็นเร่งด่วนในการพัฒนาใหม่ยาเสพติดที่ปลอดภัยและประหยัดค่าใช้จ่ายที่มีประสิทธิภาพต่อ leishmaniasis ในเรื่องนี้ phytocomponents ออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่อาจนำไปสู่​​การค้นพบยาใ​​หม่ที่มีประสิทธิภาพที่เหมาะสม บทบาทที่โดดเด่นเล่นโดยโปรตีเอส Leishmania ในความรุนแรงของพยาธินี้ทำให้พวกเขาเป้าหมายที่มีแนวโน้มมากสำหรับการพัฒนาของการรักษาในปัจจุบันของ leishmaniasis ในฐานะที่เป็นส่วนหนึ่งของการค้นหายาใหม่ที่เรามีการประเมินในกิจกรรมการต้าน leishmanial หลอดทดลองยับยั้งโปรติเอสซีรีนส่วนที่อุดมไปด้วย (PTEx) ที่ได้จากหัวมันฝรั่ง สารสกัด (PTEx) ได้รับการจัดทำขึ้นโดยแยกโซเดียม bisulfite และสารยับยั้งการถูกระบุ zymography กลับ การศึกษาการยับยั้งการ PTEx ในเจลาติน zymogram และทดสอบโดยใช้สเปก BApNA และ BTpNA เป็นสารตั้งต้นเปิดเผยยับยั้งที่แข็งแกร่งกับ trypsin เช่นเดียวกับซีรีนโปรตีเอสในปัจจุบัน lysate เซลล์สายพันธุ์ของเชื้อ Leishmania donovani ในหลอดทดลอง MTT ทดสอบตามสีเช่นเดียวกับ ex vivo L. donovani ขนาดใหญ่ที่ติดเชื้อลดลงแสดงให้เห็นว่าการมีชีวิตปรสิตและโหลดปรสิตเซลล์ที่มีค่า IC50 = 312.5 ± 0.1 ไมโครกรัม / มิลลิลิตรและ IC50 82.3 ± 0.2 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร PTEx ตามลำดับความเข้มข้นในลักษณะที่อนุ . นี้ผลป้องกัน leishmanial ยังถูกนำหน้าด้วย PTEx เฉียบพลันเหนี่ยวนำให้เกิดการก่อตัวของอนุมูลอิสระและเป็นเวลานานรุ่น NO PTEx ไม่มีผลกระทบอย่างมีนัยสำคัญในพิษขนาดใหญ่โฮสต์ ดังนั้นการดำเนินการร่วมกันค้นพบเหล่านี้แสดงให้เห็นว่ามีผลกระทบ PTEx leishmanicidal แนวโน้มและการศึกษาครั้งนี้จึงให้มุมมองใหม่ของการยับยั้งเอนไซม์โปรติเอซีรีนธรรมชาติจากหัวมันฝรั่งในการพัฒนายาใหม่กับ leishmaniasis

Results (Thai) 3:

โรคติดเชื้อลิชมาเนีย , หลงเขตร้อนโรค ( NTD ) ทำให้เกิดปัญหาสุขภาพที่สำคัญในเขตร้อนและกึ่งเขตร้อนของโลก ที่สุดของ antileishmanial สมัยใหม่รักษาด้วยสูตรที่แตกต่างกันของเพนตะวาเลนท์ antimonials miltefosine amphotericin B , , ฯลฯ ไม่เป็นที่พอใจในครั้งล่าสุดเนื่องจากพิษสูง ไปยังโฮสต์ และปัจจุบันเพิ่มขึ้นสายพันธุ์ต้านทานปัญหาจึงมีความต้องการที่จะพัฒนาใหม่ ปลอดภัย และประหยัดค่าใช้จ่ายยาต้านโรคติดเชื้อลิชมาเนีย . ในการนี้ทางชีวภาพ phytocomponents อาจนำไปสู่การค้นพบยาใหม่ที่มีประสิทธิภาพที่เหมาะสม บทบาทที่โดดเด่นโดยลิชมาเนียทางในความรุนแรงของพยาธินี้ทำให้พวกเขามีเป้าหมายแนวโน้มมากสำหรับการพัฒนาของการรักษาในปัจจุบันของลิชมาเนีย .เป็นส่วนหนึ่งของการค้นหายาใหม่ เราได้ประเมินในการต่อต้านกิจกรรมของเอนไซม์ protease inhibitor รวย leishmanial เศษส่วน ( ptex ) ที่ได้จากมันฝรั่งมันฝรั่ง สารสกัด ( ptex ) เตรียมได้โดยการแยกและการได้รับโซเดียมไบระบุรีไซโมกราฟี .การศึกษาไอโซไซม์ในการยับยั้ง ptex เจลาตินและ การทดสอบ และการใช้ bapna ) btpna เป็นสับสเตรทของเอนไซม์สามารถแสดงกิจกรรมต่อต้าน รวมทั้งเพื่อยับยั้งอยู่ในเซลล์ lysate ของลิชมาเนีย donovani การติดเชื้อสายพันธุ์ ในหลอดทดลองโดยวิธี MTT Colorimetric เช่นเดียวกับอดีตตัว Ldonovani การติดเชื้อ macrophages มีพยาธิและปรสิตในเซลล์ลดลง สามารถโหลดกับ ic50 = 312.5 ±μ 0.1 g / ml และ ic50 82.3 ± 0.2 μกรัม / มิลลิลิตร ตามลำดับ ใน ptex ความเข้มข้นขึ้นอยู่กับลักษณะ นี้ป้องกัน leishmanial Effect ก็นำหน้าโดยกระตุ้นการสร้าง ptex เฉียบพลันของ ROS และเป็นเวลานานไม่มีรุ่น การ ptex ไม่มีผลอย่างมีนัยสำคัญต่อเซลล์แมคโครฟาจโฮสต์แล้วที่ถ่ายด้วยกัน จากผลการวิจัยแสดงให้เห็นว่า ptex มีผล leishmanicidal สัญญา ดังนั้นการศึกษานี้ให้มุมมองใหม่ของตัวยับยั้งโปรติเอสเซอรีนธรรมชาติจากหัวมันในการพัฒนายาใหม่ต้านโรคติดเชื้อลิชมาเนีย .