The industrially utilised β-galacto

The industrially utilised β-galactosidases from Kluyveromyces spp. and Aspergillus spp. feature undesirable kinetic properties in praxis, such as an unsatisfactory lactose affinity (KM) and product inhibition (KI) by galactose. In this study, a metagenome library of about 1.3 million clones was investigated with a three-step activity-based screening strategy in order to find new β-galactosidases with more favourable kinetic properties. Six novel metagenome β-galactosidases (M1–M6) were found with an improved lactose hydrolysis performance in original milk when directly compared to the commercial β-galactosidase from Kluyveromyces lactis (GODO-YNL2). The best metagenome candidate, called “M1”, was recombinantly produced in Escherichia coli BL21(DE3) in a bioreactor (volume 35 L), resulting in a total β-galactosidase M1 activity of about 1100 μkatoNPGal,37 °C L−1. Since milk is a sensitive and complex medium, it has to be processed at 5–10 °C in the dairy industry. Therefore, the β-galactosidase M1 was tested at 8 °C in milk and possessed a good stability (t1/2 = 21.8 d), a desirably low apparent KM,lactose,8 °C value of 3.8 ± 0.7 mM and a high apparent KI,galactose,8 °C value of 196.6 ± 55.5 mM. A lactose hydrolysis process (milk, 40 nkatlactose mLmilk,8 °C−1) was conducted at a scale of 0.5 L to compare the performance of M1 with the commercial β-galactosidase from K. lactis (GODO-YNL2). Lactose was completely (>99.99%) hydrolysed by M1 and to 99.6% (w/v) by K. lactis β-galactosidase after 25 h process time. Thus, M1 was able to achieve the limit of

Results (Thai) 1:

Galactosidases β utilised ปณิ Kluyveromyces ออกซิเจนและออกซิเจน Aspergillus มีคุณสมบัติไม่พึงปรารถนาเคลื่อนไหวในเรื่อง เช่นผลิตภัณฑ์ยับยั้ง (KI) โดยกาแล็กโทสแล็กโทสที่น่าพอใจของความสัมพันธ์ (กม.) ในการศึกษานี้ metagenome ไลบรารีของโคลนประมาณ 1.3 ล้านถูกสอบสวน ด้วยกลยุทธ์สามขั้นตามกิจกรรมคัดกรองเพื่อหาใหม่β-galactosidases มีคุณสมบัติเคลื่อนไหวดีขึ้น หก metagenome นวนิยายβ-galactosidases (M1 – M6) พบกับประสิทธิภาพการย่อยแลคโตดีขึ้นเดิมนมเมื่อเปรียบเทียบกับβ-galactosidase พาณิชย์โดยตรงจาก Kluyveromyces lactis (ท่อง-YNL2) ที่ดีที่สุด metagenome ผู้สมัคร เรียกว่า "M1", recombinantly ผลิตใน Escherichia coli BL21(DE3) ในถังปฏิกรณ์ชีวภาพ (ปริมาตร 35 ลิตร), เป็นผลในกิจกรรม M1 รวมβ-galactosidase ของประมาณ 1100 μkatoNPGal, 37 ° C L−1 ตั้งแต่นมเป็นสื่อสำคัญ และซับซ้อน มีการประมวลผล 5-10 ° c ในอุตสาหกรรมนม ดังนั้น β-galactosidase M1 ได้รับการทดสอบที่ 8 ° C ในนม และครอบครองเสถียรภาพที่ดี (t1/2 = 21.8 d), KM ชัดเจนผากต่ำ แลคโตส 3.8 ± 8 ° C ค่า 0.7 มม.และ KI ชัดเจนสูง กาแล็กโทส 196.6 ± 8 ° C ค่า 55.5 มม. กระบวนการย่อยแลคโตส (นม 40 nkatlactose mLmilk, 8 ° C−1) ถูกดำเนินการที่สเกล 0.5 L เพื่อเปรียบเทียบประสิทธิภาพของ M1 กับβ-galactosidase พาณิชย์จากเค lactis (ท่อง YNL2) แลคโตสได้อย่างสมบูรณ์ (> 99.99%) ถูกย่อย โดย M1 และ 99.6% (w/v) โดยเค. lactis β-galactosidase 25 h กระบวนการหลังจาก ดังนั้น M1 ได้บรรลุถึงขีดจำกัดของ < แลคโต 100 มิลลิกรัมต่อลิตร นมที่เหมาะสำหรับผลิตภัณฑ์นมมีป้ายว่า "แลคโตปราศจาก

Results (Thai) 2:

ที่ใช้ในอุตสาหกรรมβ-galactosidases จาก Kluyveromyces เอสพีพี และ Aspergillus spp คุณลักษณะที่ไม่พึงประสงค์คุณสมบัติการเคลื่อนไหวใน Praxis เช่นความสัมพันธ์ที่น่าพอใจแลคโตส (KM) และยับยั้งสินค้า (KI) โดยกาแลคโต ในการศึกษานี้มีห้องสมุด metagenome ประมาณ 1.3 ล้านคนโคลนถูกตรวจสอบด้วยสามขั้นตอนกิจกรรมตามกลยุทธ์การตรวจคัดกรองเพื่อหาสิ่งใหม่β-galactosidases ที่มีคุณสมบัติการเคลื่อนไหวที่ดีขึ้น หกนวนิยาย metagenome β-galactosidases (M1-M6) พบกับประสิทธิภาพการทำงานที่ดีขึ้นไฮโดรไลซิแลคโตสในนมเดิมเมื่อเปรียบเทียบโดยตรงกับการค้าβ-galactosidase จาก Kluyveromyces lactis (GODO-YNL2) ผู้สมัคร metagenome ที่ดีที่สุดที่เรียกว่า "M1" ถูกผลิต recombinantly ใน Escherichia coli BL21 (DE3) ในระบบถังหมัก (ปริมาตร 35 L) ส่งผลให้ในกิจกรรม M1 β-galactosidase รวมประมาณ 1,100 μkatoNPGal 37 ° CL-1 เนื่องจากนมเป็นสื่อที่มีความละเอียดอ่อนและซับซ้อนก็จะต้องมีการประมวลผลที่ 5-10 ° C ในอุตสาหกรรมนม ดังนั้นβ-galactosidase M1 ได้รับการทดสอบที่ 8 ° C ในนมและครอบครองเสถียรภาพที่ดี (T1 / 2 = 21.8 D) ต่ำ desirably ชัดเจน KM, แลคโตส 8 °ค่า C 3.8 ± 0.7 mm และสูงอย่างเห็นได้ชัด Ki, กาแลคโต, 8 ° C ค่าของ 196.6 ± 55.5 มิลลิ กระบวนการไฮโดรไลซิแลคโตส (นม 40 nkatlactose mLmilk, 8 ° C-1) ได้ดำเนินการในระดับ 0.5 L เพื่อเปรียบเทียบประสิทธิภาพการทำงานของ M1 กับเชิงพาณิชย์β-galactosidase จากเค lactis (GODO-YNL2) แลคโตสได้อย่างสมบูรณ์ (> 99.99%) ย่อยโดย M1 และ 99.6% (w / v) โดยพ lactis β-galactosidase หลังจากระยะเวลาดำเนินการ 25 ชั่​​วโมง ดังนั้น M1 ก็สามารถที่จะบรรลุขีด จำกัด ของการ <100 มิลลิกรัมต่อแลคโตสในนมลิตรซึ่งเป็นที่แนะนำสำหรับผลิตภัณฑ์นมที่มีข้อความว่า "แลคโตสฟรี"

Results (Thai) 3:

ในทางอุตสาหกรรมใช้บีตา - galactosidases จาก kluyveromyces spp . และ Aspergillus spp . คุณลักษณะที่ไม่พึงประสงค์จากคุณสมบัติในการปฏิบัติ เช่น การไม่ติด ( km ) และสารผลิตภัณฑ์ ( กี ) โดยกาแลกโตส . ในการศึกษานี้ metagenome ห้องสมุดประมาณ 1.3 ล้านโคลนถูกตรวจสอบด้วยขั้นตอนการคัดกรอง เพื่อหากลยุทธ์ใหม่บีตา - galactosidases ที่มีคุณสมบัติการเคลื่อนไหวที่ดีขึ้น หกนวนิยาย metagenome บีตา - galactosidases ( M1 ) M6 ) พบที่มีการปรับปรุงประสิทธิภาพในการย่อยแลคโตสนมสดเดิมเมื่อได้โดยตรงเมื่อเทียบกับบีตาพาณิชย์ - galactosidase จาก kluyveromyces lactis ( godo-ynl2 ) ผู้สมัคร metagenome ที่ดีที่สุดที่เรียกว่า " M1 " คือ recombinantly ผลิตใน Escherichia coli BL21 ( DE3 ) ในถังปฏิกรณ์ชีวภาพ ( เล่ม 35 L ) ส่งผลให้บีตา - galactosidase M1 กิจกรรมทั้งหมดประมาณ 1 , 100 μ katonpgal 37 ° C L − 1 เนื่องจากนมเป็นอาหารที่ละเอียดอ่อนและซับซ้อน มันต้องประมวลผลที่ 5 – 10 ° C ในอุตสาหกรรมนม ดังนั้น บีตา - galactosidase M1 คือการทดสอบที่ 8 ° C ในนมและมีเสถียรภาพที่ดี ( T1 / 2 = 21.8 D ) , ต่ำ desirably ชัดเจน km , แลคโตส , 8 ° C ค่า 3.8 ± 0.7 มม. และสูงชัดเจน กิ , galactose , 8 ° C ค่า 196.6 ± 55.5 มม. กระบวนการไฮโดรไลซิสแล็กโทส ( นม mlmilk nkatlactose 40 8 ° C , − 1 ) ดำเนินการที่ระดับ 0.5 ลิตร เพื่อเปรียบเทียบประสิทธิภาพของ M1 กับพาณิชย์บีตา - galactosidase จาก K . lactis ( godo-ynl2 ) แลคโตสเป็นอย่างสมบูรณ์ ( 99.99% ) ที่ผ่านจาก M1 และติ % ( w / v ) K . lactis บีตา - galactosidase หลังจาก 25 เวลากระบวนการ H . ดังนั้น , M1 ได้บรรลุขีด < 100 มก. ต่อลิตรนมแลคโตสซึ่งเป็นที่แนะนำสำหรับผลิตภัณฑ์นมผลิตภัณฑ์ labelled เป็นแลคโตสฟรี "