13.10 Yeast identificationThe taxon

13.10 Yeast identification
The taxonomy of yeast, including brewing strains is discussed in Chapter 11 (Section 11.2). The methods used for the cultivation of yeast for the purposes of identifying contaminants are described in Chapter 17 (Sections 17.3.5; 17.3.6). Here the methods used for the differentiation of brewing yeasts are described. Methods are roughly divisible into two groups, the traditional and the modern. Traditional methods are often based on conventional microbiological techniques. They rarely have taxonomic significance but have evolved within individual breweries to meet the need for identification and differentiation of proprietary brewing yeast strains. Modern techniques frequently have taxonomic significance. Usually they have been developed within academic research organizations and are not specifically targeted at brewing. Commonly they use sophisticated and costly apparatus. Traditional approaches are still used to avoid the cost and requirement for skilled operatives needed for many modern techniques. Modern methods may be used in confirmatory tests by third parties. However, the use of molecular genetic analyses is becoming more commonplace and inexpensive. These may soon be seen as the methods of choice for routine brewery QA testing.
13.10.1 Microbiological tests
Plating microbiological samples on solid nutrient media is routinely used for enumerating microbial populations. By using selective or chromogenic media the method can have diagnostic significance. The method most widely used for differentiating brewing from wild strains relies on the ability of the latter to grow in the presence of inhibitors such as Cu2+ or the antibiotic cycloheximide (Section 17.3.6). General-purpose media such as WLN help in the differentiation of brewing strains. WLN contains the indicator dye bromocresol green and this causes yeast colonies to take on a variety of shades of green. The particular shade of colouring is characteristic of some but not all strains. The plates must not overloaded. The method needs a skilled practitioner with experience of the yeast strains being examined. The use of giant colony morphology is described in Section 13.8. The requirement for several weeks' incubation reduces its usefulness.
Differentiation of lager and ale colonies can be accomplished by plating out onto a medium containing 5-bromo-4-chloro-3-indoyl--D-galactoside, known as X--Gal (Tubb and LiljestroÈm, 1986). Lager, but not ale, strains contain -galactosidase which cleaves the chromogenic substrate to give a product which forms a blue precipitate. Colonies of ale yeasts remain colourless whereas lager types assume a blue colour.
13.10.2 Biochemical tests
Several tests have been developed, which probe the biochemical properties of individual yeast strains. Many of these tests are part of the standard armoury of the microbiologist. There is some overlap with the methods discussed in the previous section. Other techniques probe aspects of biochemistry that are more directly relevant to brewing performance.
The ability of an organism to utilize selected carbon sources under aerobic conditions (assimilation) or anaerobic conditions (fermentation) has been widely used as a method of differentiation and identification. Several techniques based on this approach are used. They share in common the assessment of growth on a basal nutrient media supplemented with a variety of carbon sources. Basal media include peptone water and yeast nitrogen base (Section 17.3.6). Liquid media require the use of pure cultures, frequently indicator dyes are included and a trap for detecting any CO2 formed. Solid media are also usually inoculated with pure cultures. However, with replica plating (Section 17.3.6) it is possible to assess mixed populations. Commercial kits are available for identifying particular groups of micro-organisms, both bacteria and yeast (for example, API test kits, bioMeÂrieux, Marcy-l'Etoile, France). These take the form of strips containing wells each of which is filled with a basal medium and a supplement of a different carbon source. After inoculation and incubation, growth is indicated by the change in colour of an indicator dye. As with many of the general microbiological approaches, these methods are best suited to identifying wild yeast strains. One assimilation test does have value. Since lager strains possess -galactosidase and ale strains do not, the former are able to hydrolyse melibiose and grow on the released sucrose and galactose.

Results (Vietnamese) 1:

13,10 nhận dạng nấm menPhân loại của nấm men, trong đó có pha chủng được thảo luận trong chương 11 (phần 11.2). Các phương pháp được sử dụng cho việc trồng nấm men cho các mục đích của việc xác định chất gây ô nhiễm được mô tả trong chương 17 (phần 17.3.5; 17.3.6). Ở đây các phương pháp được sử dụng cho sự khác biệt của sản xuất bia nấm men được mô tả. Phương pháp được khoảng chia thành hai nhóm, các truyền thống và hiện đại. Phương pháp truyền thống thường được dựa trên kỹ thuật vi sinh thông thường. Họ hiếm khi có phân loại ý nghĩa nhưng đã phát triển trong nhà máy bia cá nhân để đáp ứng nhu cầu để xác định và sự khác biệt của các chủng nấm men bia độc quyền. Các kỹ thuật hiện đại thường xuyên có ý nghĩa phân loại. Thông thường, họ đã được phát triển trong các tổ chức nghiên cứu học tập và không đặc biệt nhắm mục tiêu tại pha cà phê. Thông thường, họ sử dụng thiết bị phức tạp và tốn kém. Phương pháp truyền thống vẫn được sử dụng để tránh chi phí và yêu cầu cho HTX có tay nghề cao cần thiết cho nhiều kỹ thuật hiện đại. Hiện đại phương pháp có thể được sử dụng trong các thử nghiệm confirmatory bên thứ ba. Tuy nhiên, việc sử dụng của phân tích di truyền phân tử đang trở nên phổ biến hơn và không tốn kém. Những sớm có thể được xem như là phương pháp của sự lựa chọn cho nhà máy bia thường xuyên kiểm tra bảo đảm chất lượng.13.10.1 xét nghiệm vi sinhMạ vi sinh mẫu trên phương tiện truyền thông rắn dinh dưỡng thường xuyên được sử dụng để liệt kê các quần thể vi khuẩn. Bằng cách sử dụng phương tiện truyền thông chọn lọc hoặc chromogenic phương pháp có thể có ý nghĩa chẩn đoán. Phương pháp được sử dụng rộng rãi nhất cho khác biệt pha từ hoang dã chủng dựa vào khả năng của sau này phát triển sự hiện diện của chất ức chế ví dụ như Cu2 + hoặc kháng sinh cycloheximide (phần 17.3.6). Phương tiện truyền thông đa năng chẳng hạn như WLN giúp trong sự khác biệt của pha chủng. WLN có chỉ số thuốc nhuộm bromocresol màu xanh lá cây và điều này gây ra thuộc địa của nấm men mất trên một loạt các sắc thái của màu xanh lá cây. Bóng màu, cụ thể là các đặc tính của một số nhưng không phải tất cả chủng. Các mảng không phải quá tải. Các phương pháp cần một bác sĩ có tay nghề cao với kinh nghiệm của các chủng nấm men được kiểm tra. Việc sử dụng các hình thái khổng lồ thuộc địa được mô tả trong phần 13.8. Yêu cầu cho một vài tuần ủ bệnh làm giảm tính hữu dụng của nó.Sự khác biệt của thuộc địa lager và bia có thể được thực hiện bởi mạ ra vào một trung bình có chứa 5-bromo-4-chloro-3-indoyl--D-galactoside, được gọi là X - Gal (Tubb và LiljestroÈm, 1986). Lager, nhưng không phải rượu bia, chủng chứa - hoá mà cleaves bề mặt chromogenic để cung cấp cho một sản phẩm mà tạo thành một precipitate màu xanh. Thuộc địa của nấm men rượu bia vẫn không màu trong khi các loại lager giả định một màu xanh.13.10.2 xét nghiệm sinh hóaMột số thử nghiệm đã được phát triển, mà thăm dò các tính chất sinh hóa của các chủng nấm men cá nhân. Nhiều người trong số những thử nghiệm này là một phần của armoury tiêu chuẩn của nhà vi sinh học. Chúng ta có một số chồng chéo với các phương pháp thảo luận trong phần trước. Kỹ thuật khác thăm dò các khía cạnh của hóa sinh có thêm trực tiếp liên quan đến sản xuất bia hiệu suất.Khả năng của một sinh vật để sử dụng các nguồn được chọn cacbon dưới điều kiện hiếu khí (đồng hóa) hoặc điều kiện kỵ khí (quá trình lên men) đã được sử dụng rộng rãi như là một phương pháp của sự khác biệt và nhận dạng. Một số kỹ thuật dựa trên cách tiếp cận này được sử dụng. Họ chia sẻ chung đánh giá về tăng trưởng trên một phương tiện truyền thông chất dinh dưỡng cơ sở bổ sung với một loạt các nguồn cacbon. Phương tiện truyền thông cơ sở bao gồm chế phẩm peptone nước và nấm men nitơ cơ sở (phần 17.3.6). Chất lỏng truyền thông yêu cầu việc sử dụng các nền văn hóa tinh khiết, thường xuyên chỉ số thuốc nhuộm được bao gồm và một cái bẫy cho phát hiện bất kỳ CO2 hình thành. Phương tiện truyền thông rắn cũng thường được tiêm chủng với nền văn hóa tinh khiết. Tuy nhiên, với bản sao mạ (phần 17.3.6) có thể để đánh giá các quần thể hỗn hợp. Bộ dụng cụ thương mại có sẵn để xác định các nhóm cụ thể của vi sinh vật, vi khuẩn và nấm men (ví dụ, kiểm tra API bộ dụng cụ, bioMeÂrieux, Marcy l'Etoile, Pháp). Những lấy mẫu của dải có giếng mỗi trong số đó đầy với một phương tiện cơ sở và một bổ sung nguồn cacbon khác nhau. Sau khi tiêm chủng và ủ, tăng trưởng được chỉ định bởi sự thay đổi trong màu sắc của một loại thuốc nhuộm chỉ báo. Như với nhiều người trong số các phương pháp tiếp cận chung của vi sinh, những phương pháp này là thích hợp nhất để xác định các chủng nấm men hoang dã. Một đồng hóa thử nghiệm có giá trị. Kể từ khi lager chủng có - hoá và rượu bia không, trước đây có thể hydrolyse melibiose và phát triển phát hành Sucroza và galactoza.

Results (Vietnamese) 2:

13.10 xác định men
Các nguyên tắc phân loại của nấm men, kể cả các chủng sản xuất bia được thảo luận trong chương 11 (Mục 11.2). Các phương pháp được sử dụng cho việc trồng nấm men nhằm mục đích xác định các chất gây ô nhiễm được mô tả trong chương 17 (Phần 17.3.5; 17.3.6). Ở đây, các phương pháp được sử dụng để phân biệt các loại men bia được mô tả. Phương pháp này là khoảng chia thành hai nhóm, các truyền thống và hiện đại. Phương pháp truyền thống thường dựa trên kỹ thuật vi sinh thông thường. Họ hiếm khi có ý nghĩa phân loại nhưng đã tiến hóa trong các nhà máy bia cá nhân để đáp ứng nhu cầu để xác định và phân biệt các chủng nấm men bia độc quyền. Kỹ thuật hiện đại thường xuyên có ý nghĩa phân loại. Thông thường, họ đã được phát triển trong các tổ chức nghiên cứu học tập và không có mục tiêu cụ thể vào sản xuất bia. Thường họ sử dụng bộ máy tinh vi và tốn kém. Phương pháp tiếp cận truyền thống vẫn được sử dụng để tránh chi phí và yêu cầu về tác lành nghề cần thiết cho nhiều kỹ thuật hiện đại. Phương pháp hiện đại có thể được sử dụng trong xét nghiệm xác nhận bởi các bên thứ ba. Tuy nhiên, việc sử dụng các phân tích di truyền học phân tử đang trở thành phổ biến hơn và không tốn kém. Đây có thể sớm được xem như là các phương pháp tốt cho thói quen kiểm tra nhà máy bia QA.
13.10.1 xét nghiệm vi sinh
Mạ mẫu vi sinh trên phương tiện truyền thông dinh dưỡng rắn thường được sử dụng để liệt kê các quần thể vi sinh vật. Bằng cách sử dụng phương tiện truyền thông chọn lọc hay chromogenic phương pháp có thể có ý nghĩa chẩn đoán. Các phương pháp được sử dụng rộng rãi nhất để phân biệt sản xuất bia từ các chủng hoang dã dựa trên khả năng của sau này lớn lên trong sự hiện diện của các chất ức chế như Cu2 + hoặc cycloheximide kháng sinh (Phần 17.3.6). Phương tiện truyền thông có mục đích chung như WLN giúp đỡ trong việc phân biệt chủng sản xuất bia. WLN chứa thuốc nhuộm chỉ thị bromocresol xanh và điều này gây ra thuộc địa men để đưa vào một loạt các sắc thái của màu xanh lá cây. Bóng râm đặc biệt của màu là đặc trưng của một số nhưng không phải tất cả các chủng. Các tấm không phải quá tải. Phương pháp này cần một học viên có tay nghề cao với kinh nghiệm của các chủng nấm men được kiểm tra. Việc sử dụng các hình thái thuộc địa khổng lồ được mô tả trong mục 13.8. Các yêu cầu để ủ vài tuần làm giảm tính hữu dụng của nó.
Sự khác biệt của loại bia ale và thuộc địa có thể được thực hiện bằng cách mạ lên một môi trường có chứa 5-bromo-4-chloro-3-indoyl - D-galactoside, được gọi là X - Gal (Tubb và LiljestroÈm, 1986). Lager, nhưng không ale, chủng chứa -galactosidase phân cắt chất nền chromogenic để cung cấp cho một sản phẩm tạo thành một chất kết tủa màu xanh. Thuộc địa của nấm men ale vẫn không màu trong khi các loại lager giả định một màu xanh.
13.10.2 xét nghiệm sinh hóa
Một số thử nghiệm đã được phát triển, thăm dò các đặc tính sinh hóa của các chủng nấm men cá nhân. Nhiều người trong số những thử nghiệm này là một phần của kho vũ khí tiêu chuẩn của các nhà vi sinh vật. Có một số chồng chéo với các phương pháp thảo luận trong các phần trước. Các khía cạnh khác các kỹ thuật thăm dò sinh hóa liên quan trực tiếp hơn có liên quan đến hiệu suất sản xuất bia.
Khả năng của một sinh vật sử dụng nguồn carbon được lựa chọn trong điều kiện hiếu khí (đồng hóa) hoặc điều kiện yếm khí (lên men) đã được sử dụng rộng rãi như là một phương pháp phân loại và nhận dạng. Một số kỹ thuật dựa trên cách tiếp cận này được sử dụng. Họ chia sẻ những đánh giá chung của tăng trưởng trên một phương tiện chất dinh dưỡng cơ bản có bổ sung nhiều nguồn carbon. Phương tiện truyền thông đáy gồm nước peptone và men cơ sở nitơ (mục 17.3.6). Phương tiện truyền thông lỏng yêu cầu sử dụng của các nền văn hóa thuần túy, thường xuyên thuốc nhuộm chỉ được bao gồm và một cái bẫy để phát hiện bất kỳ hình thành CO2. Môi trường rắn cũng thường lây bệnh với các nền văn hóa thuần túy. Tuy nhiên, với bản sao mạ (Phần 17.3.6) nó có thể đánh giá quần thể hỗn hợp. Bộ dụng cụ thương mại có sẵn để xác định các nhóm đặc biệt của vi sinh vật, vi khuẩn và nấm men cả (ví dụ, bộ dụng cụ xét nghiệm API, bioMeÂrieux, Marcy-L'étoile, Pháp). Những lấy mẫu của dải chứa một giếng mỗi trong số đó được làm đầy với một phương tiện cơ bản và bổ sung một nguồn carbon khác nhau. Sau khi tiêm và ủ bệnh, tăng trưởng được chỉ ra bởi sự thay đổi màu của thuốc nhuộm chỉ thị. Cũng như nhiều các phương pháp vi sinh vật nói chung, các phương pháp phù hợp nhất để xác định các chủng nấm men tự nhiên. Một thử nghiệm đồng hóa không có giá trị. Kể từ khi các chủng loại bia có chủng -galactosidase và ale không, các cựu có thể thủy phân melibiose và phát triển trên sucrose phát hành và galactose.