2.2 Isolation of yeast Isolation of

2.2 Isolation of yeast Isolation of yeast was carried out using the enrichment culture technique as described by Limtong et al. (3). Onegram of samples was inoculated into 100-mL of autoclavedyeast extract-malt extract broth (YM broth) containing0.3% yeast extract, 0.3% malt extract, 0.5% polypeptoneand 1% glucose. The medium was also supplementedwith 4% (v/v) ethanol. After inoculation, the culture brothswere incubated in a shaker incubator (150 rpm) at 35oCfor 3 days. 1% of the active culture was transferred into afresh YM medium supplemented with 4% (v/v) ethanoland continuously culturing for 3 days as previouslydescribed. After 3 days of incubation, enriched cultureswere streaked on YM agar plates and then incubated at35oC. Colony appeared on the YM agar medium wascollected and re-streaked until the pure cultures wereobtained. All pure cultures were maintained on YM agarslants at 4oC and subculturing was performed every 3months. For long-term storage, the cultures were kept in50% (v/v) glycerol solution and stored at -20oC.

2.3 Screening of thermotolerant fermentative yeasts2.3.1 Growth ability test at high temperaturesThermotolerant yeasts were selected based ontheir growth ability at high temperatures (30 to 50oC) bystreak plate technique, which was modified from that ofYuangsaard et al. (4). Each of the isolated strains wasgrown on YM agar medium and incubated at 30, 35, 37,40, 45 and 50oC for 3 days. Growth ability of the isolatedyeast strains was recorded and strains capable of growingat temperature higher than 37oC were selected for furthertests.2.3.2

Results (Thai) 1:

2.2 ดำเนินการแยกยีสต์แยกยีสต์ออกใช้เพิ่มคุณค่าวัฒนธรรมเทคนิคตามที่อธิบายไว้โดยลิ่มทอง et al. (3) Onegram ตัวอย่างคือ inoculated ใน 100 มิลลิลิตรของสารสกัดจาก autoclavedyeast มอลต์สกัดสารสกัดจากน้ำซุป (น้ำซุป YM) containing0.3% ยีสต์ สารสกัด จากข้าวมอลต์ 0.3%, 0.5% polypeptoneand 1% กลูโคส สื่อก็ได้เอทานอล 4% (v/v) supplementedwith หลังจากกักบริเวณ brothswere วัฒนธรรมได้รับการกกในตู้อบที่ปั่น (150 rpm) ที่ 35oCfor 3 วัน 1% ของวัฒนธรรมงานโอนย้ายเป็นซีก YM ปานกลางเสริม ด้วย ethanoland 4% (v/v) ที่นำไปเลี้ยงต่อเนื่อง 3 วันเป็น previouslydescribed หลังจาก 3 วัน อุดม cultureswere ลายบนแผ่นวุ้น YM และ at35oC ได้รับการกกแล้ว อาณานิคมปรากฏบน wascollected YM ปานกลางของวุ้น และลายใหม่จน wereobtained วัฒนธรรมบริสุทธิ์ บริสุทธิ์ทั้งวัฒนธรรมถูกรักษาไว้บน YM agarslants ที่ 4oC และ subculturing ก็ดำเนินการทุก 3months สำหรับระยะยาวเก็บ วัฒนธรรมถูกเก็บ in50% (v/v) กลีเซอรอลโซลูชั่น และเก็บไว้ที่ - ที่ 20oC2.3 การคัดกรองของ thermotolerant หมัก yeasts2.3.1 เจริญเติบโตสามารถทดสอบที่ยีสต์ temperaturesThermotolerant สูงถูกเลือกตาม ontheir สามารถเจริญเติบโตที่อุณหภูมิสูง (30-50oC) bystreak แผ่นเทคนิค ซึ่งล่าสุดจากที่ ofYuangsaard et al. (4) Wasgrown สายพันธุ์แยกบนวุ้น YM กลาง และรับการกกที่ 30, 35, 37,40, 45 และ 50oC 3 วันละ บันทึกความสามารถในการเจริญเติบโตของสายพันธุ์ isolatedyeast และ furthertests.2.3.2 ได้ถูกคัดเลือกสายพันธุ์สามารถสูงกว่า 37oC อุณหภูมิ growingat

Results (Thai) 2:

2.2 การแยกการแยกยีสต์ยีสต์ถูกดำเนินการโดยใช้เทคนิคการเพาะเลี้ยงเพิ่มปริมาณตามที่อธิบายลิ่มทอง, et al (3) Onegram ของกลุ่มตัวอย่างได้รับเชื้อเป็น 100 มิลลิลิตรของ autoclavedyeast สารสกัดจากมอลต์สกัดจากน้ำซุป (YM น้ำซุป) สารสกัดจาก containing0.3% ยีสต์, สารสกัดจากมอลต์ 0.3%, 0.5% polypeptoneand 1% กลูโคส สื่อก็ยัง supplementedwith 4% (v / v) เอทานอล หลังจากฉีดวัคซีนวัฒนธรรม brothswere บ่มในเครื่องปั่นศูนย์บ่มเพาะ (150 รอบต่อนาที) ที่ 35oCfor 3 วัน 1% ของวัฒนธรรมการใช้งานที่ถูกย้ายเข้ามาอีกครั้งกลาง YM เสริมด้วย 4% (v / v) ethanoland อย่างต่อเนื่องการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 3 วันเป็น previouslydescribed หลังจากนั้น 3 วันของการบ่มอุดม cultureswere ลายบนแผ่นวุ้น YM แล้วบ่ม at35oC อาณานิคมปรากฏในสื่อ YM วุ้น wascollected และอีกลายจนกระทั่งเชื้อบริสุทธิ์ wereobtained ทั้งหมดเชื้อบริสุทธิ์ได้รับการดูแลใน agarslants YM ที่อุณหภูมิ 4 องศาเซลเซียสและถ่ายเชื้อได้รับการดำเนินการทุก 3 เดือน สำหรับการจัดเก็บระยะยาววัฒนธรรมถูกเก็บไว้ in50% (V v /) สารละลายกลีเซอรอลและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส.

2.3 การคัดกรองของการทดสอบความสามารถในการหมัก yeasts2.3.1 การเจริญเติบโตของยีสต์ทนร้อนที่ temperaturesThermotolerant สูงได้รับการคัดเลือกตามความสามารถในการเจริญเติบโต ontheir ที่อุณหภูมิสูง ( 30 ถึง 50 องศาเซลเซียส) เทคนิคแผ่น bystreak ซึ่งได้รับการแก้ไขจากที่ ofYuangsaard et al, (4) แต่ละสายพันธุ์ที่แยก wasgrown ในสื่อ YM agar และบ่มวันที่ 30, 35, 37,40, 45 และ 50 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 วัน ความสามารถในการเจริญเติบโตของสายพันธุ์ที่ได้รับการบันทึก isolatedyeast และสายพันธุ์ที่มีความสามารถของอุณหภูมิ growingat สูงกว่า 37oC ถูกเลือกสำหรับ furthertests.2.3.2

Results (Thai) 3:

2.2 การแยกยีสต์สกัดยีสต์ โดยใช้เทคนิคเพาะเสริมตามที่อธิบายไว้โดย limtong et al . ( 3 ) onegram ตัวอย่างเป็นเชื้อ 100 มิลลิลิตร สารสกัดจาก autoclavedyeast malt extract broth ( ซุป ) ) containing0.3 % สารสกัดจากยีสต์ สารสกัดจากมอลต์ 0.3% , 0.5% polypeptoneand 1% กลูโคส สื่อก็ supplementedwith 4 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) เอทานอล หลังจากที่ได้รับวัฒนธรรม brothswere บ่มในเครื่องปั่นเครื่องฟักไข่ ( 150 รอบต่อนาที ) ที่ 35ocfor 3 วัน 1 % ของวัฒนธรรมที่ใช้งานถูกย้ายเข้ามาใหม่ ) เติม 4 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) ethanoland อย่างต่อเนื่อง เพาะเลี้ยงได้ 3 วัน เป็น previouslydescribed . หลังจาก 3 วันบ่ม อุดม cultureswere ลายบนแผ่นวุ้น ) แล้วบ่ม at35oc . อาณานิคมที่ปรากฏในการใช้อาหารวุ้นและลายจนเชื้อบริสุทธิ์ ใช้ . เชื้อบริสุทธิ์ทั้งหมดรักษา agarslants ) และที่ 4oc การแสดงทุก 3 เดือน . สำหรับการจัดเก็บข้อมูลระยะยาว , วัฒนธรรมที่ถูกเก็บไว้ in50 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) สารละลายกลีเซอรอลและเก็บไว้ที่ - 20oc .2.3 การคัดกรองสาร yeasts2.3.1 วิศวกรรมเคมี การทดสอบความสามารถในยีสต์ temperaturesthermotolerant สูงเลือกความสามารถตามการใช้ที่อุณหภูมิสูง ( 30 50oc ) bystreak จานเทคนิค ซึ่งดัดแปลงจาก ofyuangsaard et al . ( 4 ) ของแต่ละสายพันธุ์ที่แยก wasgrown บนอาหารวุ้น ) บ่มที่ 30 , 35 , 37,40 , 45 และ 50oc เป็นเวลา 3 วัน ความสามารถในการบันทึก isolatedyeast สายพันธุ์และสายพันธุ์ที่สามารถ growingat อุณหภูมิสูงกว่า 37oc เลือก 2.3.2 furthertests .