Indirect sandwich ELISA is illustra

Indirect sandwich ELISA is illustrated as follows and in Fig. 4. In indirect sandwich ELISA assay stages i¨Civ are quite similar to those of the direct sandwich ELISA. Thus, antibodies are passively attached to the solid phase and antigen(s) are captured. However, stage v involves the addition of detecting antibodies. In this case, the antibodies are not labeled with enzyme. After incubation and washing (stage vi), the detecting antibodies are themselves detected by addition and incubation with an antispecies enzyme conjugate (stage vii). The bound conjugate is then processed as described in the other systems (stages xiii¨Cix). The advantage to this assay is that any number of different sources of antibodies (samples) can be added to the captured antigen, provided that the species in which it was produced is not the same as the capture antibody. More specifically, the enzyme conjugated antispecies antibody does not react with the antibodies used to capture the antigen. It is possible to use the same species of antibody if immunochemical techniques are used to select and produce particular forms of antibodies and with attention to the specificity of the enzyme conjugate used. Thus, as an example, the capture antibody could be processed to a bivalent molecule without the Fc portion (also called F(ab')2 fraction). The detecting antibodies could be untreated. The enzyme conjugate could then be an antispecies anti-Fc portion of the Ig molecule. Thus, the conjugate would react only with antibodies containing Fc (and therefore not the capture molecules). The need to devise such assays depends on the reagents available.

Page 22 It may be that a mAb is available that confers a desired specificity as compared to polyclonal sera or that one wishes to screen a large number of mAbs against an antigen that must be captured (it may be at a low concentration or in a mixture of other antigens). In this the case use of F(ab')2 polyclonal sera is unsuccessful; therefore, the preparation of fragments for the capture antibody is worthwhile, and in fact, relatively easy-to-use kits are available for this purpose. The use of a commercially available antimouse Fc completes the requirements

Results (Vietnamese) 1:

Gián tiếp sandwich ELISA được minh họa như sau và trong hình 4. Ở gián tiếp sandwich ELISA khảo nghiệm giai đoạn i¨Civ là khá giống với những người trực tiếp sandwich ELISA. Vì vậy, kháng thể thụ động được gắn liền với các pha rắn và antigen(s) bị bắt. Tuy nhiên, giai đoạn v liên quan đến việc bổ sung các phát hiện kháng thể. Trong trường hợp này, các kháng thể không được gắn loại enzyme. Sau khi ủ và rửa (giai đoạn vi), phát hiện kháng thể là chính mình phát hiện ra bằng cách bổ sung và ủ với một liên hợp enzym antispecies (giai đoạn vii). Liên hợp ràng buộc sau đó được xử lý như mô tả trong các hệ thống khác (giai đoạn xiii¨Cix). Lợi thế để khảo nghiệm này là bất kỳ số lượng các nguồn khác nhau của các kháng thể (mẫu) có thể được thêm vào các kháng nguyên chiếm được, miễn là các loài trong đó nó được sản xuất là không giống như kháng thể chụp. Cụ thể hơn, enzyme kháng thể antispecies ngoại không phản ứng với các kháng thể được sử dụng để nắm bắt các kháng nguyên. Có thể sử dụng cùng một loài kháng thể nếu immunochemical kỹ thuật được sử dụng để chọn và sản xuất các hình thức cụ thể của các kháng thể và với sự chú ý đến các đặc trưng của enzyme liên hợp được sử dụng. Vì vậy, ví dụ, kháng thể chụp có thể được xử lý với một phân tử bivalent mà không có phần Fc (cũng được gọi là F(ab') 2 phần). Phát hiện kháng thể có thể không được điều trị. Liên hợp enzym sau đó có thể là một phần anti-Fc antispecies của các phân tử Ig. Vì vậy, liên hợp sẽ phản ứng với các kháng thể có chứa Fc (và do đó không phải là các phân tử chụp). Sự cần thiết phải đưa ra thử nghiệm những phụ thuộc vào các chất phản ứng có sẵn. Page 22 nó có thể là rằng một mAb là có sẵn mà confers một đặc tính mong muốn so với polyclonal huyết thanh hoặc một mong muốn để một số lượng lớn các mAbs chống lại một kháng nguyên mà phải được chụp trên màn hình (có thể ở nồng độ thấp hoặc trong một hỗn hợp của kháng nguyên khác). Trong trường hợp sử dụng F(ab') 2 polyclonal sera là không thành công; Vì vậy, việc chuẩn bị của các mảnh vỡ cho kháng thể chụp là đáng giá, và trong thực tế, tương đối dễ dàng để sử dụng bộ dụng cụ có sẵn cho mục đích này. Sử dụng một thương mại có sẵn antimouse Fc đã hoàn tất các yêu cầu

Results (Vietnamese) 2:

Bánh sandwich ELISA gián tiếp được minh họa như sau và trong hình. 4. Trong bánh sandwich ELISA giai đoạn khảo nghiệm gián tiếp i¨Civ là khá tương tự như bánh sandwich trực tiếp ELISA. Như vậy, các kháng thể được thụ động gắn liền với các pha rắn và kháng nguyên (s) đều bị bắt. Tuy nhiên, giai đoạn v liên quan đến việc bổ sung các phát hiện kháng thể. Trong trường hợp này, các kháng thể không có nhãn với enzyme. Sau khi ủ và rửa (giai đoạn vi), các kháng thể phát hiện được mình phát hiện bằng cách bổ sung và ủ với một liên hợp antispecies enzyme (giai đoạn vii). Sau đó liên hợp ràng buộc được xử lý như đã mô tả trong các hệ thống khác (giai đoạn xiii¨Cix). Lợi thế cho xét nghiệm này là bất kỳ số lượng các nguồn khác nhau của các kháng thể (mẫu) có thể được thêm vào kháng nguyên bắt, với điều kiện là các loài trong đó nó được sản xuất là không giống như các kháng thể chụp. Cụ thể hơn, các enzyme liên hợp antispecies kháng thể không phản ứng với các kháng thể sử dụng để chụp các kháng nguyên. Có thể sử dụng cùng một loài kháng thể nếu kỹ thuật immunochemical được dùng để chọn và sản xuất các hình thức cụ thể của kháng thể và với sự chú ý đến tính đặc thù của các enzyme liên hợp sử dụng. Vì vậy, như một ví dụ, các kháng thể chụp có thể được xử lý với một phân tử hoá trị hai mà không cần phần Fc (còn gọi là F (ab ') 2 phần). Các kháng thể phát hiện có thể được điều trị. Các liên hợp enzyme sau đó có thể là một phần chống Fc antispecies của phân tử Ig. Như vậy, liên hợp sẽ chỉ phản ứng với kháng thể chứa Fc (và do đó không phải là các phân tử chụp). Sự cần thiết phải đưa ra các xét nghiệm như vậy phụ thuộc vào các chất phản ứng có sẵn.

Page 22 Nó có thể là một mAbs có sẵn vốn mang đặc trưng mong muốn so với đa giá huyết thanh hay mà người ta mong muốn trình chiếu một số lượng lớn các mAbs chống lại kháng nguyên đó phải được giữ lại (nó có thể ở nồng độ thấp hoặc trong một hỗn hợp các kháng nguyên khác). Trong việc sử dụng trường hợp của F (ab ') 2 đa giá huyết thanh là không thành công; Vì vậy, việc chuẩn bị của các mảnh vỡ cho các kháng thể chụp là đáng giá, và trong thực tế, tương đối dễ sử dụng bộ dụng cụ có sẵn cho mục đích này. Việc sử dụng một Fc antimouse thương mại có sẵn hoàn thành các yêu cầu